枯草芽孢杆菌基因片段的琼脂糖凝胶电泳分离I．色氨酸C基因片段的分离

限制性核酸内切酶EcoRl酶切枯草芽孢杆菌(Bactllus subtlis) SR 22的 DNA,用琼脂糖凝胶电泳分离了色氨酸C基因(trpC)的片段,位于凝肢柱的10—11厘米处。冷冻挤压回收该段的DNA,荧电光分光光度计直接测定回收液中DNA的含量。电泳后比电泳前trpC 转化活性提高了37.7倍。这一段DNA的平均分子量为5.1×106,trpC片段的纯度为9.3％。     

乳酸乳球菌AL2基因文库的构建及乳链菌肽生物合成基因簇的筛选

用本实验室获得的乳链菌肽高产菌株乳酸乳球菌AL2总DNA为供体,以λ EMBL3为载体,构建了该菌株的基因文库,共获得3900多个噬斑。通过Southern杂交、PCR扩增及DNA序列测定,证实从该文库中筛选到一个含有完整乳链菌肽生物合成基因簇的重组噬菌体λHJ\|3。     

嗜酸乳杆菌发酵代谢产物分析

气相色谱分析表明,乳酸菌素片生产菌的发酵上清液及药品成品—乳酸菌素粉和乳酸菌素片含有大量乳酸及一定量的丁酸（ 或异丁酸） 、乙酸、正反丁烯二酸、六碳脂肪酸、微量丙酸、琥珀酸及微量抗菌多肽。它们不仅对革兰氏阳性菌,而且对革兰氏阴性菌有不同程度抑制作用。乳酸菌素片医治某些肠胃病的机理正是发酵产生的这些有机酸等代谢产物及发酵后的乳酸菌死菌体及其碎片的作用。     

乳链菌肽的生物合成及其分子结构与功能的关系

乳链菌肽 (Ｎｉｓｉｎ)是乳酸乳球菌乳酸亚种 (Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓｌａｃｔｉｓｓｕｂｓｐ.ｌａｃｔｉｓ)某些菌株产生的一种小肽 ,亦称之为乳酸链球菌肽或乳酸链球菌素。由于它对许多革兰氏阳性菌 ,包括葡萄球菌 (Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ)、梭菌 (Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ)、芽孢杆菌 (Ｂａｃｉｌｌｕｓ)、利斯特氏菌 (Ｌｉｓｔｅｒｉａ)等造成食品严重危害的腐败菌有强烈抑制作用 ,并对人体安全无毒 ,是人们广为应用的一种天然食品防腐剂 ,已被全世界 5 0多个国家和地区用于乳制品、罐头食品、植物蛋白食品、肉制品的防腐保鲜。…     

以温和噬菌体pll为载体克隆α-淀粉酶基因

温和噬菌体p11 DNA和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)168染色体DNA用BamHl酶消化和T4 DNA连接酶连接,转化到被噬菌体p11溶源化了的501菌株中,经过体内交换整人到染色体上,培养48小时后,从1020个菌落中挑出含Arol+一Amy+基因的3个转化子,分别命名为p11Amy1、p11Amy2和p11Amy3。取p11Amy1进行繁殖和丝裂霉素c诱导,诱导后的重组噬菌体用于测定噬斑形成能力和转导活性,提取其DNA再用于转化,均证明构建成了含淀粉酶基因的重组特异性转导噬菌体。     

黄地老虎颗粒体病毒DNA片段在枯草芽孢杆菌中的克隆

EcoRI酶解的AsGV-XJ DNA和质粒pUB 110 DNA,经T4 DNA连接酶连接后,转化枯草芽孢杆菌BR 151感受态细胞,涂布在加有新霉素(5,ug／ml)的完全培养基上。用琼脂糖凝胶电泳快速法检测抗新霉素转化子中的重组质粒。在388个转化子中得到12个较PuB110 DNA分子量大的重组质粒。所有重组质粒均可与”PdcTP标记的Fco RI酶解AsGV—XJDNA片段的探针进行分子杂交。通过琼脂糖凝胶电泳对重组质粒中插入AsGV一XJ DNA 片段进行了测定。     

Nisin生物合成有关基因的遗传分析

乳链菌肽是某些乳酸乳球菌产生的细菌素,是目前发现的各种细菌素中最重要的一种。因其具有较大经济价值而研究最为深入,有关它的理化性质及其应用已有文献报道。细菌素这类抗菌物质都是多肽或蛋白质,有分子量小,且结构复杂的特点。Ｋｌｅａｎｈａｍｍｅｒ等依据细菌素的分子量大小,热稳定性及修饰氨基酸等因素,把乳酸菌产生的抗菌蛋白质分为三类：１．热稳定的小肽２．热敏感的大蛋白质３．修饰性朋肽。它们的生物合成方式有核     

枯草芽孢杆菌作为基因克隆的受体

枯草芽孢杆菌是革兰氏阳性杆菌,是来自土壤的真正腐生微生物、已被最广泛、深入地研究。象大肠杆菌一样,在分子生物学研究中作为一各典型体系被最广泛地应用。它具有一些独特的基因,例如:在芽孢形成、萌发以及生长过程中调节生化和形态变化的一些基因。其它独特的基因与胞外酶分泌过程和调节有关。