SSCP技术分析活性污泥微生物群落结构的条件优化及检验

单链构象多态性(SSCP)技术是一种分析环境微生物遗传多态性的有效方法,具有快速、简便、灵敏等特点.但是,该技术用于分析复杂环境微生物群落结构时需要有针对性地优化操作条件.本研究针对聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)胶浓度、上样缓冲液中去离子甲酰胺浓度、电泳温度,电泳时间等确定了PCR-SSCP技术的优化条件,并以自养脱硫反硝化反应器启动期的活性污泥样品对此优化条件进行了检验,证明了16S rDNA V1～V3区为靶对象时,丙烯酰胺与甲叉的质量比49:1,质量分数12%的聚丙烯酰胺凝胶,上样缓冲液中去离子甲酰胺的体积分数1/3,在4℃,300 V,电泳18 h是最优的操作条件,可以获较理想的SSCP图谱.     

腺苷脱氨酶及同工酶对自身免疫病诊断和病情监测的作用

摘要 目的：检测腺苷脱氨酶(ADA)及其同工酶在自身免疫病患者血清中的变化,探讨其诊断和病情监测作用。方法：收集70例系统性红斑狼疮（SLE）、114例类风湿性关节炎(RA)、55例强直性脊柱炎(AS)、及其年龄性别对应的健康血清标本。测定血清总ADA（tADA）、ADA1及ADA2活性。ROC曲线分析其诊断价值。结果：与健康对照相比,ADA活性在SLE患者血清中显著升高[tADA：15（12,20）vs 8（7,10）U/L;ADA1：3.5（2,5）vs 3（2,3）U/L;ADA2：11（8,15）vs 6（5,7）U/L;P<0.01）]。与健康对照相比,RA患者血清中tADA和ADA1活性无显著变化(P>0.05),ADA2活性水平升高[8（5.25,10）vs 7（5,9）U/L,P<0.05）];与健康对照相比,AS患者血清中tADA和ADA1活性无显著变化(P>0.05),ADA2活性升高[7（5,9）vs 6（5,7）U/L,P<0.05）]。ROC分析显示tADA及ADA2对SLE具有较好诊断价值（tADA：88.6%特异性、77.1%敏感性;ADA2：92.9%特异性、68.6%敏感性）。ADA活性对RA及AS患者无诊断价值。spearman相关性分析显示,tADA活性与SLE患者疾病活动度有一定正相关性（r=0.303,P=0.011)。结论：血清tADA活性检测可作为SLE辅助诊断和病情监测指标。     

一种罕见的透翅蛾

长足透翅蛾Macroscclesialongipes（Moore,1877）,是Hampson（1919）根据MelitialongipesMoore设置的,其后足附节很长,异于Melitoa属,而且雄性外生殖器也遇然不同。孩虫在我国最初采自上海,现又发现于江西、福建（光泽）。这是一种罕见的透翅蛾,故记述如下。翅展20mm,体长gmm,黑褐色。喙发达。下唇须基节生白色长毛,中节生育黑色、灰色长毛5端节黑褐色。复眼褐色,内侧基缘白色。额黑褐,头顶有黑褐色长毛,头后缘有黄褐色刚毛。触角端有小毛束,干背黑色,干腹红褐色。领片来生黄褐色鳞片。胸部下面白色,足暗褐,前足腿节散…     

青蟹线粒体COI假基因的分离和特征分析

线粒体DNA标记在遗传结构和系统进化研究中得到广泛应用,然而核假基因的存在对此有很大威胁。本文以中国东南沿海的青蟹(Scylla paramamosain)为研究对象,利用线粒体COI基因的通用引物和特异性引物进行扩增,分别得到34个假基因（nuclear mitochondrial pseudogenes, Numts）和5个线粒体COI基因序列。在所获得的34个假基因中共定义了29种单倍型,根据序列的相似度,这些假基因可以分为2类,每类假基因都有各自保守的核苷酸序列。第Ⅰ类假基因存在2处插入序列和1处8 bp的缺失序列,这些位点导致了整个阅读框的移位;在第Ⅱ类假基因和5个线粒体COI序列中只有碱基替换,未发现插入和缺失序列。实验结果分析表明,这两类假基因分别代表了2次核整合事件,即核转移事件的最低值。研究结果提示了     

北京大学两家附属医院电子病历系统易用性比较研究

??????? 目的 探索并评估、比较北京大学两家附属医院电子病历系统的易用性,并就其出现的易用性问题提出改进建议。方法 使用美国国家标准技术研究所制定的电子病历功能标准测试方法和用例,利用认知研究软件工具CogTool模拟熟练用户在无错误操作情况下使用系统,统计电子病历系统7项关键任务的完成时间。结果 两家医院电子病历系统完成7项测试任务的平均总时间为723.3秒,其中平均心理思考时间为257.7秒。系统A、B完成7项测试任务总时间分别为728.5秒、718.0秒。其中完成用药列表任务时间差异最大。完成人口统计学任务心理思考时间所占的百分比差异最大。结论 由于易用性设计缺陷,医生花费大量的时间进行人机交互;通过改进系统易用性以便减少人机交互总的时间和心理思考时间所占的比例,提高医疗效率。     

螯合剂对重金属超量积累植物Thlaspi caerulescens的锌、铜、锰和铁吸收的影响

由螯合剂EDTA和DTPA对重金属超量积累植物Thlaspicaerulescens吸收Zn、Cu、Mn、Fe和P的影响表明：营养液含Zn10μnol／L几条件下,植株地上部全Zn含量和根系吸Zn速率分别达到1681mgkg-1干重和448mgkg-1根干重d－1;43．2μmol／L的EDTA或DTPA处理显著抑制植株的生长,也减少植株单位根重吸收的Zn量,降低地上部和根系全Zn、全Cu、全Mn含量和可溶态含量,增加地上部的全Fe和全P含量;所有处理中地上部全Zn和可溶态Zn含量均明显高于根系,说明T．caerulescens吸收的Zn大部分运向地上部。与Fe（Ⅲ）EDTA处理相比,Fe（Ⅲ）EDDHA处理植株的单位很重吸收Zn总量和地上部全Zn含量均较高。     

重金属超量积累植物研究进展

重金属超量积累植物具有极高的吸收和积累重金属的能力。本文介绍了超量积累植物的特性、种类,对重金属的吸收与忍耐机理,及其在治理污染土壤中的潜力等方面的最新研究进展。     

神经营养因子受体TrkA、TrkB、TrkC和TrkE在参环毛蚓体内的分布

高亲和性神经营养因子受体Trk,广泛存在分布于哺乳神经组织,研究表明：随着动物进化程度的降低,亚型Trk受体的类型有所减少,在低等动物,关于环节动物（Annelida)Trk受体存在与否,分布如何尚未见报道,以我国环节动物门典型代表参环毛蚓（Pheretima aspergillum)为研究对象,运用免疫细胞化学染色技术,在光镜下观察TrkA,TrkB,TrkC和TrkE阳性细胞和纤维的形态与分布,发现Trk存在于参环毛蚓的神经系统和非神经组织,各亚型分布有所差异,TrkA阳性 经细胞存在于咽下神经节和肠神经系,阳性神经纤维存在于腹神经索和肠神经系,TrkB阳性细胞存在于非神经组织的肠上皮,TrkC阳性神经细胞存在于脑,咽下神经节和肠神经细胞,阳性神经纤维存在于围咽神经环,腹神经索和肠神经系,TrkE阳性神经细胞存在于脑,阳性神经纤维存在于咽下神经节和腹神经素,上述研究结果表明：Trk存在于进化程度较的环节动物,Trk在进化上具有悠久的历史,各亚型Trk受体的不同分布提示不同部位的神经细胞受不同神经营养因子的作用。     

HCV NS5A基因表达及其在血清学检测中的应用评估

Full-length NS5A gene of the hepatitis C virus was amplified by PCR using plasmid pBAC25 containing HCV nonstructural gene as template. The amplified fragment (about 1.34 kb) was cloned into plasmid pQE32, and the recombinant plasmid pQENS5A was expressed in JM109 strain. The NS5A protein was purified by NiSO4 metal chelating resin, and characterized by Western-blot. Its antigenecity was determined by ELISA. The positive detection rate of anti-NS5A was 75% (69/92) in ninety-two clinic sera. The positive rate of anti-NS5A was 82.5% (33/40) in fourty positive standand sera, and the negative rate of anti-NS5A was 100% (40/40) in fourty negative standand sera. The results showed that the Full-length NS5A proteinn had the higher sensitivity and specificity in the detection of HCV antibody in sera, we suggested that NS5A protein was a useful antigen for blood screening.     

HCV NS5A基因表达及其在血清学检测中的应用评估

人丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)感染可引起丙型肝炎、肝硬化和肝细胞癌[1] 。丙型肝炎病毒是单股正链ＲＮＡ病毒 ,基因组约长 9.5ｋｂ ,仅有一个开放阅读框 ,编码一个大的聚蛋白前体 ,由宿主蛋白酶和病毒编码的蛋白酶加工成多个成熟蛋白。非结构蛋白ＮＳ5Ａ分子量为 56ｋＤ/ 58ｋＤ。目前对ＮＳ5Ａ蛋白的功能尚不清楚 ,ＮＳ5Ａ蛋白可降低干扰素治疗效果[2 ] ;ＮＳ5Ａ蛋白含核定位序列 ,因此人们推测它在ＨＣＶＲＮＡ复制过程中可能起一定的作用[3～ 4 ] 。本研究在大肠杆菌中表达全长ＮＳ5Ａ蛋白 ,提纯后ＮＳ5Ａ蛋白能与大多数丙肝阳性血清起强烈…