丹参酮生物合成途径关键酶CYP76AH3的晶体结构与分子对接

丹参在治疗心绞痛、冠心病和心肌梗死等疾病中具有广泛应用。CYP76AH3是其活性成分丹参酮合成途径中的关键P450酶,位于丹参酮复杂合成网络通路的分支处,其晶体结构解析及关键氨基酸分析对丹参酮的合成生物学具有重要意义。作为跨膜蛋白的Ⅱ型P450酶的蛋白质纯化、晶体培养和晶体结构解析的难度一贯较大。本研究通过构建原核表达重组质粒,纯化目的蛋白质,成功培养了CYP76AH3晶体,解析了晶体结构。根据CavityPlus分析确定对接范围,采用分子对接程序Discovery Studio筛选出与底物相互作用的关键氨基酸,包括与底物有氢键相互作用的Gly298和Asp294,以及与底物有疏水相互作用的Phe479、Leu367和Leu293;通过点突变模拟进一步预测了关键氨基酸的突变对蛋白质结构稳定性的影响。本研究将为CYP76AH3的蛋白质工程提供目标,为丹参酮的合成生物学研究奠定了基础。     

仙琴蛙颜色感知具有左脑优势

蛙类在暗视条件下能辨别不同颜色,但颜色感知时大脑神经活动的动态神经机制尚不清楚.本文通过分析峨眉仙琴蛙(Nidirana daunchina)在蓝、绿、黄三种颜色光刺激下脑电信号δ、θ、a、β 4种节律的功率谱,研究脑电节律与颜色感知之间的关系,探索颜色感知的动态神经机制.首先采集不同颜色刺激下端脑、间脑和中脑的脑电信...     

伤寒Vi多糖菌稳定性研究

为研究国产伤寒Vi多糖菌苗的稳定性,将保存三年以上的伤寒Vi多糖菌苗成品采用自然风干和37℃恒温干燥两种方法浓缩后,用CL－4B柱层析分析系统,测定KD在0．25前多糖的回收率,结果均大于50％,同时对保存三年以上的制品按规程进行了全球,结果均符合规程要求,表明国产菌苗放置三年依然合格。     

植物磷脂酸的特性及其在ABA诱导气孔运动中的作用

磷脂酸(PA)是应答多种生理过程的第二信使, 其作为一个脂质信号快速积累从而响应多种环境。PA主要通过磷脂酶D (PLD)和磷脂酶C/甘油二酯激酶(PLC/DGK)途径产生。基于PLDs的生化特性、激活机制以及在不同类型胁迫下被激活的特定同种型的差异, 不同类型胁迫下会产生特定分子种组成的PA。PA在多种环境下起信号转导作用, 在调节气孔运动中, PA的作用模式主要是通过与多种蛋白结合, 激活或抑制这些蛋白的活性, 进而执行其信使功能。该文主要综述PA的生化特性以及信号途径中PA互作蛋白的研究进展, 并提出PA研究中亟待解决的问题及今后的重点研究方向。     

长江下游产卵期凤鲚、刀鲚和湖鲚肌肉生化成分及能量密度

为研究产卵期凤鲚(Coilia mystus)、刀鲚(C.ectenes)和湖鲚(C.ectenes taihuensis)肌肉生化成分与能量密度,评价其营养价值并探讨生态习性差异对鱼类肌肉生化成分的影响。采集卵巢发育至Ⅴ期的样本各50尾,分别测定相关指标,实验均设置3个重复,结果取平均值。3个种群样本肌肉水分含量为74.62%～81.87%,粗蛋白占肌肉鲜重的比例为15.06%～18.08%,粗脂肪为1.65%～6.78%,粗灰分为0.98%～1.49%,能量密度为4.447～7.209kJ/g。必需氨基酸指数为70.49～76.04,不饱和脂肪酸与ω-3多不饱和脂肪酸含量分别为62.50%～72.48%与6.54%～8.39%。肌肉中矿物元素含量最高的均为钾,最低的均为铜。结果表明,凤鲚、刀鲚和湖鲚均为理想蛋白源,不饱和脂肪酸及矿物元素含量丰富,同时还富含赖氨酸、支链氨基酸、EPA和DHA等生理必需因子。生化成分对比分析结果显示,刀鲚粗脂肪含量和能量密度显著高于凤鲚和湖鲚,这种差异直接反映了洄游习性对鱼类肌肉生化成分的影响。     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征血压变异性及运动心肺功能与病情的相关性分析

目的:探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)血压变异性及运动心肺功能与病情的相关性分析。方法:选取2017年2月～2018年11月期间我院收治的OSAHS患者119例为研究对象,根据每小时睡眠呼吸暂停次数(AHI)将患者分为轻度组(AHI:5～20次/h,n=45)、中度组(AHI:21～40次/h,n=39)、重度组(AHI:40次/h,n=35),检测所有研究对象的血压变异性及运动心肺功能,并作组间比较。采用Pearson积矩相关分析OSAHS患者血压变异性及运动心肺功能与病情的相关性。结果:OSAHS患者收缩压(SBP)昼、舒张压(DBP)夜以及中度组、重度组SBP夜均高于对照组(P0.05);重度组DBP夜以及中度组、重度组SBP昼、SBP夜高于轻度组(P0.05);重度组SBP夜、SBP昼、DBP夜高于中度组(P0.05);而各组DBP昼整体比较差异无统计学意义(P0.05)。OSAHS患者最大摄氧量占预计值百分比(VO2max%pred)、最大摄氧量峰值占预计值百分比(peak VO2%pred)、无氧阈值(AT)、摄氧量功率比值(VO2/WR)、呼吸储备(VEmax/MVV)均低于对照组,且随病情严重程度的增加而降低(P0.05),OSAHS患者二氧化碳通气当量(VE/VCO2)高于对照组,且随病情严重程度的增加而升高(P0.05)。Pearson积矩相关分析结果显示,OSAHS患者病情严重程度与SBP昼、SBP夜、DBP夜、VE/VCO2呈正相关(P0.05),与VO2max%pred、peakVO2%pred、AT、VEmax/MVV、VO2/WR呈负相关(P0.05),与DBP昼无相关性(P0.05)。结论:血压变异性及运动心肺功能指标可反映OSAHS患者病情严重程度,可考虑作为早期监测指标并参考指导治疗。     

亚热带杉木纯林生态系统中营养元素的积累、分配和循环的研究

本文是1980--1983年本所湖南会同森林生态实验站成年杉木纯林中进行定位研究根据所取得的观测资料,分析和论述了营养元素在林内的积累与分配;以及从降雨中的输入量,计算了营养元素的年吸收量和归还量。研究表明,杉木纯林在21--23年生时,即达到主伐年龄期,营养元素年吸收量仍大于归还量,整个林分还处在养分消耗阶段。     

葡萄球菌A型肠毒素的高效表达和分离纯化

根据已知葡萄球菌A型肠毒素 (SEA)的基因序列 ,用PCR从产毒标准株S .aureusFRI 10 0中扩增得到约70 0的SEA基因片段 ,并将该片段克隆至表达载体 pBV2 2 0中 ,实现了高效表达。表达产物以可溶性形式存在 ,表达的毒素用CM SephroseFF离子交换层析进行纯化 ,获得了高纯度的重组SEA ,SDS PAGE显示单一条带。ELISA试验证明所获重组SEA具有与天然SEA相似的免疫学性质。     

RGD-葡激酶突变体(K130T,K135R)的制备与活性分析

以葡激酶突变体质粒mSAK(K130T ,K135R)-pBV220为模板,PCR重叠引物延伸法引入突变位点,并将该片段克隆至载体pBV220 ,构建了RGD-mSAK-pBV220质粒,转化大肠杆菌后热激诱导获得了高效表达,表达产物占菌体总蛋白的50%以上,且主要以可溶性形式存在,所获蛋白依次用Q SepharoseHP柱、SephaycrylS200HR柱和SP柱进行纯化,纯化的蛋白的纯度可达98%以上,纤维蛋白溶圈法体外溶栓活性测定结果表明,所获RGD-mSAK蛋白溶栓活性与野生型葡激酶相当,豚鼠体内免疫试验证明突变体的免疫原性也有所降低,血小板聚集试验分析突变体蛋白的抗血小板聚集能力,RGD 葡激酶突变体具有一定的抗血小板聚集能力。