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目的:以生物制备骨形成蛋白10(BMP10)为目标,研究BMP10成熟肽在大肠杆菌中的表达及活性。方法:以人源BMP10成熟肽基因为模板,PCR获得N端带有组氨酸标签(6×His)的融合基因6×His-m BMP10,构建p ET28a/m BMP10表达载体;热击转染大肠杆菌BL21(DE3)菌株,卡那霉素抗性筛选获得重组表达菌株BL21/p ET28a-6×His-m BMP10,IPTG诱导表达后利用SDS-PAGE电泳、Western印迹对蛋白进行分析;超声波破碎菌体,收集包涵体,镍柱亲和层析纯化获得电泳纯目的蛋白;透析复性后,非还原SDS-PAGE检验目标蛋白的二聚体形成;通过体外细胞实验检测蛋白活性。结果:纯化得到纯度90%以上的m BMP10,复性后二聚体得率约为40%;活性实验测得P19细胞的Smad6蛋白表达上调3倍左右。结论:通过大肠杆菌表达体系获得具有生物活性的BMP10,为后续作用机理研究奠定了实验基础。 相似文献
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晚发性阿尔茨海默病 (LOAD)是老年痴呆中最常见的一种 ,它是一种病因复杂、由遗传因素和环境等其他因素共同作用引起的老年期疾病。服用非甾类抗炎类药物能延缓或防止LOAD的发病说明炎症反应可能参与LOAD病理 ,肿瘤坏死因子 (TNF)是炎症反应中主要的细胞因子 ,并且能增加 β 淀粉样肽 (Aβ)的产生说明其可能是LOAD的易感基因。α2 巨球蛋白 (A2M)是一种血清蛋白酶抑制剂 ,它是低密度脂蛋白受体相关蛋白 (LRP)主要的配体 ,并且能与Aβ结合并介导其降解和清除 ,说明它可能是另一个LOAD的易感基因。在 6 7名晚发性阿尔茨海默病人和 14 2名正常对照中比较了载脂蛋白E基因 (APOE)、TNF启动子区 (- 30 8A G)多态和A2M一 5bp核苷酸缺失 (I D)多态 (A2M 2 )与LOAD发病风险的关系。结果显示 ,APOEε4等位基因在AD病人组中显著高于对照组 (χ2=11 6 6 ,P <0 0 1) ,而TNF(- 30 8A G)多态和A2M缺失多态的基因型和等位基因在LOAD病人组和对照组中都无显著差别 (P >0 1)。按年龄和APOEε4等位基因分组同样无相关性 ,说明TNF 30 8A G位点的多态与A2M缺失不是中国人群的晚发性老年痴呆的风险因子 相似文献
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本研究应用RNA干扰(RNAi)技术高效抑制VEGF的表达,明显降低了人肝癌细胞株SMMC7721的致瘤性。化学合成针对人VEGF基因的siRNA,体外瞬时转染人肝癌细胞株SMMC7721,RT-PCR和Elisa法检测表明VEGFsiRNA实验组与对照组相比,细胞内VEGFmRNA表达下降了76.16%,VEGF分泌蛋白表达则下降了96.28%,而MTT法结果显示VEGFsiRNA对SMMC7721细胞增殖没有明显作用。体内实验中,不同时间对荷SMMC7721细胞瘤裸小鼠进行siRNA直接瘤内注射,同时测量瘤体积,最后取瘤块进行组织切片观察并进行分子生物学分析,结果显示,与对照组相比,VEGFsiRNA实验组肿瘤体积明显缩小,瘤内出现细胞坏死,同时肿瘤组织中VEGFmRNA和蛋白表达水平均明显降低。 相似文献
157.
本文通过实地调查和异地栽培试验研究了蛇床的生物学特性及资源分布,为蛇床子药材的生产、收购提供了科学依据。 相似文献
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海房沟异羽叶的新联合(Anomozamites haifanggouensis (Kimura et al.) comb. nov.)是辽西和内蒙古东部中侏罗统海房沟组一种特有的本内苏铁类植物.仅发现一块标本(正、反面印痕).标本上保存3枚营养羽叶,它们同几个苞片状的小叶和一些小孢子叶联合在一起,但球果的雌蕊群部分未被保存.标本被收集于内蒙古东部的宁城县山头乡道虎村附近,产于中侏罗统海房沟组.以往在辽西葫芦岛市的南票和白马石乡上三角城等地的同一层位中也曾发现过很多分散保存的苞片状小叶和相似的小孢子叶.它们最初被潘广(1983)认为是一种双子叶的半被子植物(Cycadicotis),并将小孢子叶视为"具皱纹的雌性种囊".后来,又经Kimura等(1994)详细研究,因未找到任何与被子植物有关的证据,将它们归入一个分类位置不明的形态属Pankuangia,并被描述在P. haifanggouensis种名之下.研究结果表明,本文中被研究的标本是同本内苏铁类的Anomozamites异羽叶相连,从而为这些分散保存的生殖器官的确切分类位置的确定提供了有力的证据. 相似文献
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粉煤灰基质-草坪砖栽培环境对坪草生长的影响 总被引:8,自引:0,他引:8
为了解决停车场、甬路、渠坝与草坪争地的矛盾,增加城市绿地面积,在已研究粉煤灰草坪基质最佳混合比例的基础上,进一步探讨草坪砖作为草坪栽培环境(砖孔内填人粉煤灰混合基质,简称砖孔环境)的肥力效应与生物效应。为了对比分析,特此设置了土孔环境(在土壤中挖取与草坪砖形状和容积相同的孔并填入粉煤灰混合基质)与土灰环境(在粉煤灰混合基质中按照草坪砖孔模式划出同样大小的圈)种植黑麦草作为对照。研究结果表明:坪草N、K、Na、Cu、Zn等含量以砖孔环境最高,土灰环境和土孔环境较低,差异显著,说明砖孔环境能为植物生长提供较多的养分元素;砖孔环境中的坪草含有的Fe、Cu、Zn浓度远高于坪草最佳需求量,今后不再需要补充铁肥、铜肥和锌肥。试验还表明砖孔环境的蒸散率最小,基质含水量最大,基质势最高,持续供水能力强,抗旱效果十分明显。砖孔环境与土孔环境中的草坪草屑累积量差异不显著,但均比土灰环境中的高,且差异显著。夏季高温期砖孔环境中的草坪质量显著高于土孔环境和土灰环境中的草坪质量。 相似文献
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