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91.
在已有的demecolcine(以下简称Deme)诱导去核技术路线的基础上,以昆明白小鼠卵母细胞为实验材料,对影响去核率的几个因素(包括Deme浓度、Deme处理起始时间和作用时间、卵母细胞的卵龄)逐次进行实验。结果表明:(1)激活卵母细胞在浓度为0.4μg/mL和0.5μg/mL Deme-KSOM液中处理60 min均能有效去核,但0.5μg/mL组获得更高的去核率(33.3%)。(2)卵母细胞在激活后0~5 min之内迅速放入0.5μg/mL Deme-KSOM液中,处理60~180 min得到了相对较高的去核率(31.9%~24.5%)。(3)昆明白小鼠hCG注射后17~18 h收集的卵母细胞更有利于Deme诱导去核,去核率为27.1%。经比较分析,建立了优化的Deme诱导去核程序。
Abstract: On the basis of exiting technique pathway of demecolcine-induced enucleation(IE),several factors(Demecolcine concentration、time of demecolcine inition and treatment、oocytes age) affecting the IE rate were tested using Kunming mouse oocytes.The experiments’ results demonstrated that: In experiment 1,activated oocytes could be enucleated efficiently by treating with KSOM medium containing 0.4μg/mL or 0.5μg/mL demecolcine for 60 min,but 0.5μg/mL group gained the higher IE rate(33.3%).In experiment 2,maximum IE rate (31.9%~24.5%) were obtained when oocytes were exposed to 0.5μg/mL demecolcine between 0 and 5 min postactivition and treated for 60~180 min.In experiment 3,oocytes collected from Kunming mouse at 17~18h after hCG administration were favoriate to demecolcine-IE(27.1%). By comparision and analysis of the data,we established the optimized IE procedure. 相似文献
92.
骨髓间充质干细胞体内诱导分化为心肌细胞 总被引:13,自引:0,他引:13
观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)植入体内后,在心肌微环境诱导下分化为心肌细胞的能力。无菌条件下取出大鼠双侧股骨及胫骨,冲洗骨髓腔获得细胞,贴壁筛选法纯化MSCs,体外培养、扩增,4,6-二咪基-4-联苯基吲哚(4,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)标记细胞,注入结扎冠脉左前降支所致心肌梗塞模型鼠的心肌组织。在不同时间点处死大鼠,获取心肌组织,采用HE染色和电镜技术对植入MSCs进行形态学观察和超微结构检测,荧光免疫组化检测植入MSCs肌球蛋白重链(MHC)和心肌特异性抗原Cx43的表达,同时应用RT-PCR技术检测心脏早期发育基因NKx2.5、GATA-4的表达。结果发现细胞标记效率为100%,通过连续检测MSCs植入后细胞形态从无规则状态、幼稚细胞表型逐渐向成熟心肌细胞方向转化,植入细胞排列同正常肌纤维方向平行,且植入四周后电镜检测到闰盘的存在;两周出现MHC的表达,后随时间延长表达逐渐增强。四周出现Cx43的表达,以后表达稳定,RT-PCR检测NKx2.5、GATA-4在一天即出现弱表达,两周~三周时表达最强,以后强度逐渐减弱。结果表明MSCs在体内微环境条件下能够转化为心肌细胞。 相似文献
93.
94.
水杨酸在AM真菌侵染和诱导植物抗病性中的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
水杨酸(SA)是一种广泛存在于高等植物体内的酚类物质,是肉桂酸的衍生物,在植物许多生理过程中发挥重要作用(原永兵和曹宗巽,1994),如诱导某些植物开花和气孔关闭;导致天南星科植物的佛焰花序产热;促进侧芽萌发;抑制乙烯的生物合成;调节某些植物的光周期;影响黄瓜的性别分化等(Wang&Tsao,1979);因而Raskin提出SA是一种新的植物激素(Raskin,1992).许多试验证明SA是重要的能够激活植物过敏反应(HR)和系统获得抗性(SAR)的内源信号分子(Malamy et a1.,1990),能诱导烟草和黄瓜等植物对细菌、真菌、病毒等多种病害的抗病性(原永兵等,1997). 相似文献
95.
长白山自然保护区是典型的温带原始森林生态系统,其植被总初级生产力(GPP)与地形和气候变化密切相关,开展长白山自然保护区GPP的时空变化特征以及影响因子研究,对于了解植被生长状况和生态环境质量具有重要意义。本研究采用光能利用率模型(VPM)对长白山自然保护区GPP进行估算,并分析坡度、海拔、气温、降水、总辐射对其的影响。结果表明:2000—2020年,长白山自然保护区GPP多年平均值为63~1706 g C·m-2·a-1,GPP随海拔的增加而减小。气温是影响长白山自然保护区植被GPP空间分布差异的主要因素,其与GPP之间存在显著正相关性。研究期间,长白山自然保护区年GPP整体呈极显著增加趋势,年均增加值为13 g C·m-2·a-1。年GPP增加的区域占总区域的79.9%,且各植物功能型年GPP增加面积的比例存在差异。年降水与长白山自然保护区43.2%区域的GPP呈显著负相关,而年均温和年总辐射分别与长白山自然保护区47.2%和82.4%区域的GPP呈显著正相关。在未来全球气候变暖的背景下,长白山... 相似文献
96.
苏铁属植物树形优美,苍劲质朴,大型而美丽的叶四季浓绿顶生,具独特之观赏效果。如布置在庭园及大型会场可收庄严肃穆之效;配置于花坛中心,使人有安详之感;作古代建筑之陪衬,则显古老苍劲;作现代建筑之配植,则四季浓绿而赏心怡神;植于寺庙之旁则有避邪之妙用。苏铁属植物多数具有很高的观赏价值,且由于其古老性、濒危性和科研价值,而被列入禁止野生贸易的物种名单,我国把所有野生苏铁列为一级保护物种。大多数苏铁植物既耐阳,亦耐荫,易栽培管理和繁殖,在园林中有很好的应用前景,如行道、街心花园、广场、庭园、居民生活小区… 相似文献
97.
昆虫细胞培养已经在小儿灰髓炎、乙肝表面抗原等研究中得到系统应用,此外,许多高值的治疗性蛋白药物,如tPA、白细胞介素-2、β-干扰素和促红细胞生成素等的研究过程中昆虫细胞及杆状病毒的培养已成为新的生物工程手段。在美国、荷兰等国已成功地得到了外源基因大量表达的药物。在我国也已成功构建了人-α干扰素的昆虫细胞/杆状病毒表达系统。同时昆虫杆状病毒本身可以制备成各种专一性较强的广谱、无公害、无毒性的的农用杀虫剂。但是昆虫细胞及其杆状病毒的大规模培养对 相似文献
98.
根据中国不同地理区森林生产力和气候环境变量的数据构建了中国森林气候生产力模型,以此为基础研究了气候变化对中国森林生产力的影响。结果表明在所构建的模型中,除海拔高度与净生产力的相关模型外,其它模型均有较高的实用价值,模型的拟合曲线变化,基本反映了中国森林现实生产力的地理分布格局;中国森林生产力的分布格局主要取决于气候环境中的水热条件,水分条件是决定中国大部分地区森林生产力水平和地理分布格局的主导因素;根据7个GCM 相似文献
99.
肝素对成纤维细胞促增殖作用的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
应用核仁组成区相关嗜银蛋白(AgNORs)染色和抗Ⅲ型胶原以及抗5-溴脱氧尿苷单抗免疫组化技术,观察了肝素对体外培养的NIH/3T3成纤维细胞增殖的影响,发现:(1)肝素能促使成纤维细胞数量增加,如0.1mg/L浓度的肝素在培养第3天成纤维细胞数量相当于对照值的1.3倍;(2)对成纤维细胞AgNORs的合成显示出明显的促进作用,如0.2mg/L浓度的肝素培养第3天,其AgNORs数量为对照值的2.7倍;(3)进一步分析肝素对成纤维细胞DNA和Ⅲ型胶原合成的影响,结果表明,加入0.2mg/L肝素培养第3天,S期成纤维细胞和Ⅲ型胶原阳性细胞数分别为对照值的2.7倍和1.8倍。上述实验结果为探讨肥大细胞分秘的活性介质参与器官纤维化作用的机理进而采取相应的对抗措施提供了依据 相似文献
100.
氮添加对长白山阔叶红松林2种树木幼苗光合生理生态特征的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
植物的光合作用是评估全球变化背景下碳循环的重要环节。目前,氮沉降增加日益明显,作为植物生长关键因子的可利用氮将对植物的光合生理生态过程产生影响。以长白山阔叶红松林主要树种红松和紫椴的幼苗为例,通过模拟氮沉降增加(氮添加量分别为0、23、46和69 kg N hm~(-2)a~(-1))的方法,利用Li-6400光合测定系统分别测算了两个树种的最大净光合速率(A_(max))、气孔导度(G_(smax))和水分利用效率(WUE)的值,并测算了叶氮含量、叶绿素含量、比叶面积、光合氮利用效率(PNUE)的值。通过分析A_(max)随不同施氮量的变化规律,同时结合其他叶片特征参数的变化,进一步探讨植物光合随氮添加的变化原因。研究结果显示:两个树种的A_(max)值在0—46 kg N hm~(-2)a~(-1)的氮添加范围内随施氮量的增加而增大,继续增加施氮量至69 kg Nhm~(-2)a~(-1)则出现下降。叶绿素含量、G_(smax)、PNUE和比叶面积在不同的氮添加水平下的变化规律与A_(max)的一致,且均与A_(max)呈显著正相关关系。叶氮含量与A_(max)的值仅在0—46 kg N hm~(-2)a~(-1)氮添加范围内呈显著正相关。A_(max)与WUE的相关关系不显著。相同氮添加水平下,氮添加对阔叶树种紫椴各生理生态参数(A_(max)、G_(smax)、叶氮含量、比叶面积、PNUE和WUE)的促进程度高于对针叶树种红松各生理生态参数的促进程度。研究结果可为评估氮沉降增加背景下我国东北地区的碳循环提供依据。 相似文献