Snai1 miRNA干扰质粒构建及胃癌细胞系稳定株筛选

目的：设计并构建针对Snai1的微小干扰核糖核酸（miRNA）,最终鉴定出有效干扰质粒并筛选稳定转染的胃癌细胞株SGC-7901。方法：设计并构建4对Snai1的pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR microRNA及1对无效对照microRNA干扰质粒。将干扰质粒用罗氏BD转染试剂转染胃癌细胞株SGC-7901,通过倒置荧光显微镜观察绿色荧光确定转染效率。分别用不同浓度l的杀稻瘟菌素作用于SGC-7901细胞,得到杀稻瘟菌素对SGC-7901细胞的筛选浓度。Westernblot检测4对干扰质粒、阴性对照质粒对snai1蛋白水平表达的影响。结果：测序表明,Snai1干扰序列及读码框完全正确,干扰质粒瞬时转染的SGC-7901细胞系在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光达85%以上。杀稻瘟菌素对于SGC-7901细胞的筛选浓度为5μg/ml。Westernblot结果显示,干扰序列Mi-1对Snai1有较强的干扰效果。结论：成功构建了Snai1干扰真核表达载体,同时筛选出有效干扰质粒及稳定转染株,为进一步研究Snai1在胃癌中的作用奠定了基础。     

珍芪降糖胶囊对糖尿病大鼠的药效学研究

目的：研究珍芪降糖胶囊对实验性糖尿病大鼠的治疗效果。方法：采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）制备糖尿病大鼠模型,观察珍芪降糖胶囊对大鼠血糖、胰岛素、血脂、尿素氮、肌酐、血小板聚集及肾小球形态的影响。结果：珍芪降糖胶囊能明显降低糖尿病大鼠的血糖、胰岛素含量,降低糖尿病大鼠低密度脂蛋白胆固醇、尿素氮、肌酐,提高高密度脂蛋白胆固醇含量,对二磷酸腺苷（ADP）诱导的大鼠血小板聚集有明显的抑制作用,并有减轻肾小球病变的作用。结论：珍芪降糖胶囊在降低血糖、调节脂质代谢紊乱、改善肾小球功能等多方面发挥较好的作用。     

雷州半岛红树林湿地鸟类多样性

从2000年5月-2003年11月,调查了雷州半岛红树林湿地鸟类.共记录鸟类133种,水鸟和迁徙鸟分别占总记录鸟类数量的81.7%和70.4%.分别有9种、2种、16种和12种鸟被列为中国红皮书保护种、IUCN保护种、CITES保护种和中国国家Ⅱ级保护种;还有63种被列为中日候鸟协定保护种、32种被列为中澳候鸟协定保护种.不同调查地点,鸟类的种类和数量相差较大,高桥鸟类最丰富,记录到83种鸟;五里鸟类种类最少,仅记录到40种鸟,各地鸟类种的相似性很低.环颈鸻(Charadrius alexandrinus)、白腰杓鹬(Numenius arquata)和红嘴鸥(Larus ridibundus)在雷州半岛的种群数量达到国际重要湿地的标准.雷州半岛鸟类种的丰度和多度季节变化明显,冬季种类多、数量丰富,夏季种类少、数量贫乏.冬季和夏季总的鸟类数量(P=0.043)和水鸟数量(P=0.001)差异明显.保护整个沿海红树林湿地是保护雷州半岛红树林湿地鸟类多样性的关键.     

广东担杆岛鸟类多样性的季节变化

摘要：2008年5月至2009年11月,采用固定样点法对广东省珠海市担杆岛的鸟类进行了调查。共记录到鸟类74种,其中留鸟29种、候鸟45种。雨季记录到鸟类45种,旱季记录到鸟类48种。雨季与旱季每个样点平均记录到的鸟类种数分别为3.5种(n--80)和3.7种(n=69),差异不显著(Z=-0.86,P=0.39);鸟...     

用环介导等温扩增技术快速检测粪便样本中的沙门菌

目的:建立快速检测粪便样本中的沙门菌的环介导等温扩增技术(LAMP),并着重在灵敏度和特异性方面对此方法进行评价。方法:利用LAMP针对沙门菌特定基因invA(靶基因)设计的6条特异引物,通过引物特异性识别特定基因invA上的8个独立区域来快速检测沙门菌;LAMP反应过程中会产生白色沉淀焦磷酸镁,故可以通过监测浊度来判定反应结果。结果:实时浊度仪监测反应结果表明,LAMP反应在60~65℃等温条件下50 min内完成;如果在反应前添加羟基萘酚兰,蓝色阳性结果很明显区别于紫色阴性结果;LAMP的最低检出限为6.97 pg/μL,PCR为69.7pg/μL,LAMP方法的检测灵敏度是PCR的10倍,且具有良好的特异性。结论:LAMP方法用于快速检测沙门菌,具有检测过程简单、实验装置简便、反应结果肉眼可辨、灵敏度高、特异性强的特点,对非沙门菌菌株的结果呈阴性,表明引物设计有很好的特异性。对粪便样本进行检测,发现具有同样的敏感性和特异性。这表明LAMP法是潜在的和有价值的在粪便样本中直接检测沙门菌的方法,具有快速、简便、低成本的特点。LAMP法适用于快速临床诊断。     

基于液流格型特征值和标准化方法分析胸径和土壤水分对荷木液流的影响

基于液流格型特征值-偏度和峰度分析了不同胸径荷木在水分利用方面的差异,并利用标准化的方法消除强影响因子(光合有效辐射,PAR)对液流的影响,研究了弱影响因子(土壤湿度)与液流的关系.结果表明：荷木胸径越大,偏度越小,液流密度峰值越靠后,相应的液流峰值越大,蒸腾量也越大.与旱季相比,荷木大树在湿季偏度较小,液流密度到达峰值时间靠后,峰值大,蒸腾量也大;而小树偏度在旱、湿季的差异不明显,蒸腾量差异也不大.用PAR峰值对荷木个体蒸腾和土壤湿度进行标准化后,荷木个体蒸腾与土壤湿度呈更明显的正相关关系.在土壤湿度较大的季节,荷木大树的蒸腾量随土壤湿度增加而上升的速率基本稳定;而中等木和小树的某些个体则明显下降,说明这些树木的蒸腾和吸收土壤水分的能力可能接近极限.     

Influence of pigment substitution on the electrochemical properties of Rhodobacter sphaeroides 601 reaction centers

With the help of pigment substitution, self-assembled monolayer film and square wave voltammetry, the influence of pigment substitution on the electrochemical properties of Rhodobac-ter sphaeroides 601 reaction centers was investigated. Results showed that the charge separation could also be driven by externally electric field, similar to the primary photochemical reaction in purple bacterial reaction center. On the surface of Au electrode, a self-assembled monolayer film (the RC-PDDA-DMSA film) was made up of 2,3-dimercaptosuccinic acid (DMSA), poly-dimeth-yldiallylammonium chloride (PDDA) and reaction center (RC). When square wave voltammetry was used to study the RC-PDDA-DMSA film, four redox pairs in the photochemical reaction of RC were observed by changing frequency. With nonlinear fitting, the standard potential of P/P+ and the corresponding electrode reaction rate constant were determined to be 0.522 V and 13.04 S-1, respectively. It was found that the redox peak at -0.02 V changed greatly when b     

沙门菌噬菌体BPS11T2的生物信息学分析及食品杀菌效果评价

为筛选和获取具有应用价值的噬菌体、掌握其遗传背景,本研究对前期分离的一株噬菌体BPS_(11)T_2进行基因组生物信息学分析,以及测试其用于清除鸡皮表面沙门菌的效果。结果表明,噬菌体BPS_(11)T_2的基因组大小为43 797 bp,含有65个基因,第29位基因产物被推定为具有抗菌应用价值的内溶素;其被鉴定为符合应用标准的噬菌体(不含溶源性和其他有害产物相关基因);其使用,能有效清除鸡皮表面的沙门菌。本研究为继续发展噬菌体和内溶素基础的沙门菌防控方法提供了有价值的研究材料和数据。     

中国首例输入性中东呼吸综合征冠状病毒结构基因与附属基因的序列分析

针对中国首例实验室确诊输入性MERS-CoV感染病例,采用鼻咽拭子样品进行核酸提取、基因扩增与测序,获得MERS-CoV_ChinaGD01结构蛋白与附属蛋白编码基因,包括S基因、E基因、M基因、N基因、ORF3、ORF4a、ORF4b、ORF5和ORF8b基因序列。根据S基因进化分析发现中国输入性病例中MERS-CoV虽有少数位点变异,但仍与近年沙特流行株相近,属于MERS-CoV亚型5,N、E、M等结构基因核苷酸变异较少。附属蛋白进化分析表明:ORF3、ORF4a、ORF4b、ORF5均有一定的核苷酸替换,而ORF8b相对保守。总之,中国首例输入性MERSCoV与已发表序列相比总体表现为保守,但在部分基因序列上有一定的变异。这是中国首例输入性MERS-CoV的第一次基因分析结果报道,可为该MERS-CoV感染特点的进一步研究及相关疾病的防控提供参考。