尘螨变应原Der f1全序列的原核表达及生物信息学分析

目的 构建尘螨变应原Der f1原核表达体系,并了解其分子特征.方法 提取粉尘螨总RNA,用RT-PCR合成Der f1编码基因,将其克隆至pMD19-T载体,亚克隆至表达载体pET-28a( ),转化至大肠杆菌并用IPTG诱导表达.用生物信息学软件对测序结果进行分析并预测其空间结构.结果 从粉尘螨总RNA中扩增获得Der f1 cDNA片段,成功构建了表达质粒pET-28a( )-Der f1,Western blotting显示原核表达获得成功.测序结果提交GenBank,登陆号为EU095368,该基因长966 bp,与参考序列同源性达99.9%,推测其编码氨基酸321个,属疏水蛋白,位于细胞外,信号肽位于1～18氨基酸处.同源性分析提示Der f1和Eur m1相似率为88%,而Der f1和Der p1的相似率为77%,分子进化树中粉尘螨和梅氏嗜霉螨聚成一簇.Der f1的二级结构由α-螺旋(109 aa,33.96%)、延伸链(55 aa,17.13%)、β-转角(18 aa,5.61%) 和随机卷曲(139 aa,43.30%)组成.结论 尘螨变应原Der f1原核表达获得成功,为进一步生产重组变应原奠定了基础.生物信息学分析表明粉尘螨和梅氏嗜霉螨的亲缘关系可能更近,而与屋尘螨关系稍远,此与现行的形态学分类系统并不符合.     

硫化氢中毒的急救与护理

硫化氢是一种毒性较剧烈的窒息性毒物,具有细胞窒息作用及中枢神经抑制作用.患者吸人高浓度硫化氢时,可立即失去知觉,甚至呼吸停止死亡.2004～2006年我院共收治了10例硫化氢中毒患者,现将抢救过程中的护理体会总结如下.     

泡桐花油的GC-MS分析及抑菌作用研究

本文采用索氏提取法提取泡桐花脂溶性成分,并用GC-MS联用技术对其成分进行分离鉴定.共分离出45个组分,各组分提取质谱图,经用人工解析及NIST05标准谱库检索定性,峰面积归一化法定量分析,计算出各成分的相对百分含量.其中含量较高的化学成分有3,7,11,15-四甲基十六-1,6,10,14-四烯-3-醇(14.74%)、二十三(碳)烷(5.79%)、9,19-环羊毛甾-24-烯-3-醇(5.41%)、十六(烷)酸(5.09%)、十六烷基环氧乙烷(4.93%)等.对泡桐花索氏提取后的部分进一步水提,并分别测定其脂溶性成分和水溶性成分对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用.得知其脂溶性成分对金黄色葡萄球菌抑制作用较强,而水溶性成分则对大肠杆菌抑制作用较强.本次实验,可为泡桐花资源的进一步开发利用提供一定的理论依据.     

一种新型大鼠心脏移植模型的制作体会

目的采用腹部套管法建立大鼠心脏移植模型,并分析该方法优劣,为器官移植研究提供合适的动物模型。方法SD大鼠60只,参照Baxter的报道进行同种腹部异位心脏移植,成功制作了该模型并总结了经验。结果共实施手术30例,成功27例,成功率90%;移植心存活30 d以上。结论新型的大鼠心脏移植模型简单易行,成功率高,适合用于器官移植研究,值得推广应用。     

基于光镊与拉曼光谱的红菇担孢子分析

拉曼光谱作为分子振动光谱,具有无损、无需试剂染色和快速方便的特点,在生物学领域的应用越来越广泛。拉曼镊子是光镊与拉曼光谱的结合,应用拉曼镊子技术收集单个红菇担孢子的拉曼光谱,分析单个担孢子的主要成分,不同的储存方法对担孢子成分的影响等。结果发现,单个担孢子的拉曼光谱反映了担孢子内含物的基本组成,红菇担孢子的孢内主要成分是脂类物质;不同种类的红菇担孢子的拉曼光谱基本相同,经过多年保存的孢子仍然保持其孢子内的主要成分不变。各随机选择10个担孢子的拉曼光谱进行主成分(PCA)判别分析,结果显示红菇属内不同种类的孢子无法区分。结果表明单孢子拉曼光谱可以应用于分析孢子内成分的变化,但应用于真菌分类的可能性有待进一步探索。     

蜀葵天然色素及其稳定性研究

以新疆地产蜀葵（Althaea rosea L.Cavan.）花为实验材料,用50%乙醇 0.5%盐酸为浸提剂,物料配比为1：10,提取出蜀葵花紫红色素,并从光、温度、pH值,氧化剂,还原剂,蔗糖,苯甲酸钠和不同金属离子对色素稳定性的影响进行了初步研究,结果表明：该色素在pH2时耐光性较好,温度在65℃以下和pH值4以下时色素稳定性较好,色素耐氧化性和耐还原性较差;蔗糖和苯甲酸钠对色素稳定性无不良影响,金属离子Cu^2 ,Fe^3 ,Sn^2 和Pb^2 对该色素稳定性有不良影响,Zn^2 对色素的稳定性只有轻微影响,而Al^3 ,Na^ ,Mg^2 ,K^ ,Fe^2 和Ca^2 对色素的稳定性则皆无不良影响。     

湘北地区野生蔬菜资源的开发利用

本文报道了湘北地区的野生蔬菜种类 ;共计 2 6科 4 2属 4 9种。并探讨了湘北地区野生蔬菜的开发利用前景     

职业献血员中庚型肝炎病毒感染状况的分析

为了解职业献血员中庚型肝炎病毒（HGV）的感染状况,应用ELISA法和RT-PCR法进行检测,在10069名职业献血员中有516例抗-HGV阳性,总感染率为5.12%,其中男性感染率5.79%。女性感染率4.45%,甘肃省感染率4.96%,宁夏区感染率5.70%,青海感染率5.67%以及陕西感染率4.91%,年龄18-25岁的感染率4.48%,26-35岁感染率4.87%;36-45岁感染率6.90%;将抗-HGV阳性作RT-PCR,HBsAg,抗HCV检测,其中HGV-RNA阳性362例,HBsAg阳性25例,抗HCV阳性37例,HBsAg和抗-HCV阳性8例,以上说明,在职业献血员中,HGV的感染与性别,地域及年龄无关,与HBV,HCV有重叠感染现象。     

湖南省南岳原生性森林群落的研究——Ⅱ.水丝梨林

湖南省南岳的水丝梨林即水丝梨 +甜槠 -尾叶山茶 +花竹 -蔓赤车群丛是一种尚未报道的新群落类型。研究了该群落的区系特点、生活型、层次结构、更新演替、物种多样性及其物种相对多度分布格局 ,该群落物种多样性水平接近山地季雨林。     

农村地区小学生的正餐与零食食用行为及其影响因素

目的 调查农村地区小学生的正餐与零食食用行为,探究其影响因素。方法 随机抽取湖南省某贫困县农村地区425名3~6年级学生,开展问卷调查并进行实证分析。结果 被调查小学生不吃早餐;牛奶鸡蛋摄入不足;喜欢腌制、油炸类食品;饮水习惯不科学等不良饮食习惯广泛存在。偏好“限制食用”类零食,倾向于购买低价劣质零食,购买时不查看包装信息,常因食用劣质零食,如辣条冰糕而中毒。据logistic回归,综合来看学生性别、年龄、是否住校、是否留守、家庭规模、家庭子女数、是否以零食代替正餐、是否边看电视边吃零食、吃零食频率、零食单价、食品安全与营养认知水平以及家长对学生关于食物安全营养的指导程度,显著影响被调查儿童的正餐与零食食用行为。结论 家长应加强指导儿童的饮食行为,学校应为学生开展营养教育,且均应注重实际技能操作方面的指导教育,并将食品安全与营养学作为大专院校学生的通识课,培养储备人才。