黄地老虎颗粒体病毒DNA的基因文库和物理图谱

利用EMBL 4——携带多切点连接序列的λ取代载体,建成了黄地老虎颗粒体病毒(AsGV)DNA基因文库,并绘制出AsGV DNA基因组的物理图谱。当体外包装效率达3 x 104pFU／μg DNA时,Sal和BamHI烈酶完全酶切的EMBL 4和BamHI部分酶切的AsGV DNA,按2：1的接头克分子比,用T4连接酶连接后,在BHB2688与2690体系中进行体外包装,再经在L95和ED 8654中的转染和转导,获得1．5×103噬菌斑。根据Clarke和Carbon公式,筛选概率达到复盖99％的AsGV基因组只需35个重组噬菌斑。我们随机挑取了35个重组噬菌斑,经快速琼脂糖凝胶电泳分析得到13个不同类型的重组噬菌斑,以32P标记的AsGV DNA为探针进行分子杂交,确定了BamHI在AsGV DNA基因组上位点的相邻位置。     

生物素标记GFV—cDNA探针的制备及在检测葡萄扇叶病毒上的应用

以整合到质粒中的ＧＦＶ－ｃＤＮＡ为模板经ＰＣＲ合成了生物素标记的ＧＦＶ单、双链探针。用合成的探针对提纯的ＧＦＶ－ＲＮＡ２、感染ＧＦＶ的昆诺藜叶及１８株葡萄进行ＤＮＡ－ＲＮＡ杂交检测表明：检测提纯病毒ＲＮＡ２的灵敏度为１．５ｐｇ／斑点,感染ＣＦＶ的昆诺提取液最高稀释度可达４０９６０倍;１１株显示典型扇叶症状的样品均为阳性,且汁液稀４００～８００倍仍能测出,７株不显示典型扇叶症状的葡萄中３株受到ＧＦＶ     

秸杆纤维素高效降解菌

我国是农业大国,秸秆纤维素资源非常丰富,而对它的开发利用却十分有限,造成了资源的极大浪费.若能将这些纤维废弃物转化为简单糖类或蛋白质等产品,既可以解决环境污染问题,又可以作为饲料,缓解粮食短缺以及能源危机对当前社会的影响,所以国内外对微生物分解转化纤维素的研究极为重视.目前研究较多的是霉菌,尤以绿色木霉、里氏木霉和康氏木霉为典型.但木霉等霉菌类真菌在培养过程中产生酸败霉腐气味,并具有一定毒性,且产酶周期通常都比较长,这使其在食品酿造和饲料发酵等工业生产中的应用受到较大的限制.芽孢杆菌因具有很好的稳定性和环境适应性、易工业化生产等优点而备受欢迎,因此高产降解纤维素芽孢杆菌的获得能够得到比较稳定的菌剂,便于工农业上的应用,对解决当今世界所面临的粮食短缺、饲料资源紧张、能源危机和环境污染等问题具有深远的意义.     

悬浮细胞再生表达外壳蛋白的转基因Indica水稻对水稻条纹病毒的抗病性(英文)

合成、克隆了水稻条纹病毒中国株的外壳蛋白基因并进行了序列分析,由Indica水稻成熟胚的愈伤组织形成胚性运浮细胞。用含有CP基因的pROK2表达载体的DNA包被1.09μm直径钨粉颗粒轰击培养细胞。被轰击的培养物在含有G418（40mg／mL,）的培养基中进行选择培养,由对G418抵抗的愈伤组织中获得10株再生株。用32P－dCTP标记的CP基因作为探针,以Southernblot测定其转化特性。由抗病的和对照的植株抽提基因组DNA用EcoRI和BamHI进行酶切,其中两个植株显示出0.6kh和0.7kb两条条交带．其大小与CP基因相对应。Westernblot和ELISA测定进步证明CP（32kDa）在转基因水稻中表达。16株转基因植株和100株对照植株用带毒的叶蝉接种,接种病毒后24d只有37.5％的CP转基因植株产生病毒症状,而对照植株为96％。进一步证明转基因水稻植株具有对RSV的抗病性。转基因植株T1代CP的表达分离比例为3.6:1。     

乙肝表面抗原a表位粘膜疫苗的构建及免疫原性检测

利用DNA重组技术 ,构建霍乱毒素B亚单位与乙肝病毒表面抗原a表位的融合基因 ,并在大肠杆菌表达体系pET 30a BL2 1 (DE3)中获得以包涵体形式的高效表达。免疫印迹表明表达产物具有免疫学活性 ,包涵体复性后 ,表达产物能够象CTB那样形成五体 ,以腹腔注射、灌胃、鼻饲形式免疫小鼠均能产生抗HBsAg抗体     

我国大麦条纹花叶病毒的研究 Ⅱ.核酸组分的分离和鉴定

新疆小麦上分离到的大麦条纹花叶病毒(BSMV-XJ),经2.4%聚丙烯酰胺和0.5%琼脂糖凝胶电泳检出四个组分,与Argentina Mild 和North Dakota 161毒株的RNA 组分数相同。分离的BSMV-XJ 的单个RNA 组分没有侵染性,四个RNA 组分的混合物有侵染性,说明侵染性需要一个以上的RNA 组分。培养病毒的温度似对各组分的含量有影响。BSMV-XJRNA 经单分子展层后,在电镜下观察伸展的没有折迭卷曲的线状分子,其中有些分子长度约1,200～1,300毫微米,正好相当于其RNA 链的长度。     

草鱼出血病

草鱼Ctenopharyngodon idella是我国重要的淡水鱼类养殖品种,但养殖过程极易发生出血病导致草鱼大量死亡,给草鱼养殖业带来巨大损失。我国在20世纪70年代开始进行病原的研究,1980年发现病毒颗粒并确认为草鱼出血病病原,1991年国际病毒分类委员会将其命名为草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)。一直以来除呼肠孤病毒感染草鱼引起出血病外,未见有病毒和细菌混合感染的报道。本刊2009年8期介绍了邓国