关于《甲型流行性感冒病毒自然温度敏感(ts)株的发现及其意义》的几点讨论

几年以前,当我们在国内外的学术会议上作以上题目的报告时,曾有过一些有趣的提问和讨论。现将这个题目的摘要重新登载一下,并将讨论的主要内容,包括提出的问题和我们的答复列后,在摘要中注明了我们发表的原始文献出处,俾有兴趣的读者可以一阅原文。在此要说明的是,虽然我们的工作是结合流感流行病学、病原学和活疫苗株选育工作进行的,但本题“甲型流行性感冒病毒自然温度敏感(ts)     

(A)KTAexplorerl00测定蛋白质相对分子质量的实验分析

讨论用(A)KTAexplorerl00快速纯化工艺开拓系统进行凝胶层析测定蛋白质相对分子质量所涉及的限定条件问题.对该系统有关特性测试及应用表明,它具有加样量少、重复性好、定性和定量准确、快捷方便等优点.     

小麦HMW-GS1Dx5基因的克隆及其特异性表达

显微切割了普通小麦钢８２－１２２（Ｔｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍ２ｎ＝４２）具有１Ｄｘ５＋１Ｄｙ１０亚基的１Ｄ染色体长臂端,利用ＰＣＲ扩增得到了ＨＭＷ－ＧＳ１Ｄｘ５亚基的５（端４００ｂｐ序列片段．以此作为探针从基因的组织特异性和特定发育阶段的表达两个方面研究了ＨＭＷ－ＧＳ１Ｄｘ５基因表达的规律．结果表明,干种子及萌发种子中存在此基因,而在发育的幼苗中此基因未表达．ＨＭＷ－ＧＳ１Ｄｘ５基因可能从开花初期开始表达．ＨＭＷ－ＧＳ１Ｄｘ５基因在籽粒成熟期表达,然而在营养器官如叶片中未表达,其表达存在组织特异性．ＨＭＷ－ＧＳ１Ｄｘ５基因在蜡熟期籽粒表达水平最高,其次是乳熟期籽粒．从开花１５ｄ至蜡熟期籽粒,表达趋于增加．开花１５ｄ其ｍＲＮＡ水平是蜡熟期籽粒ｍＲＮＡ的２８％,灌浆期为４０％、乳熟期为７２％、完熟期为５４％．这为进一步研究其表达调控和改善小麦品质打下基础     

加强多院区大型医院门诊工作的实践与探讨

针对医院门诊工作现状,扩大项目、夯实基础、细化流程、建立机制,实现多院区医院门诊工作专家及专病专业化、各院区门诊资源均衡化、门诊诊疗模式多样化、门诊服务流程标准精细化、门诊诊疗全程信息化、社会不同人群及层次门诊服务需求特需化。     

临床技能考核纳入卫生系列职称评聘的探讨

随着人事制度的改革,职称评聘制度也在不断改进和完善,但作为卫生专业,其实践操作性较强,单纯依靠学术成果来评价其专业能力是远远不够的,探索一套能较全面、准确地评定临床卫生专业技术人员水平的体系是医院人力资源管理部门迫在眉睫的问题。为进一步深化职称制度的改革,介绍将临床技能考核纳入临床卫生专业技术人员的职称评聘当中的过程及取得的成果,并介绍了建立完整的临床考核研究体系,同时也提出了将临床技能考核纳入职称评聘过程中存在的问题。     

涝渍地农业示范小区综合整治开发的理论与方法研究

寻求与当地自然条件和农业经济水平相适应的土地开垦及其合理利用方式,是我国南方涝渍地域面临的一个重要问题,选择江汉平原四湖地区一个由湖泊垦殖形成的碟形微域作为研究对象。借助对该地区进行综合开发的契机,对其生态学特点、开发模式等进行了重新探讨。结果表明,该地区随地面高程的梯级递变,土壤类型、剖面结构、土壤水分和土壤温度动态变化等方面存在明显的梯级分异特征。总体上可分成5个梯级,根据对该梯级分异的具体面积和位置的分析,该地区存在水稻面积过大,低湖地区资源利用不合理,水旱轮作地区农田整治水平低,利用不充分等问题。通过对其进行工程整治,将原有的5个梯级归并成4个梯级;在此基础上开展以农业综合开发和优化农作制度为主要内容的“梯级开发”,使该地区的农业经营效益得到大幅度提高。     

利用立体阵列同位素标记法进行大型蛋白质的结构分析

日本东京首部大学的甲斐庄正恒名誉教授，理化学研究所的PeterGunter研究员等人的团队开发了使用核磁共振（NMR）法进行大分子量蛋白质结构分析的技术。[第一段]     

建立快速定量检测猪瘟兔化弱毒苗的荧光定量PCR技术

在猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株的5’非编码区设计一对引物和一条荧光探针,利用荧光定量PCR原理,结合LightCycler检测系统,首次建立了定量检测猪瘟兔化弱毒苗方法。结果表明,该方法的灵敏度为10^2拷贝数,线性范围为10^7—10^2,达6个数量级;标准样品的变异系数为2．3％—5．1％(n＝10),疫苗样品组内实验变异系数为0．85％—2．8％(n＝5)、组间实验为2．5％—7．3％(n＝5),对同一样品分5次RNA提取和逆转录,其变异系数为5．0％;对9份疫苗样品进行了检测,与免体定型热反应方法相比较,有很好的相关性;整个检测过程仅需4h。该法可望取代传统的兔体定型热反应用于疫苗生产过程中的效价测定及指导疫苗的配制,也为猪瘟病毒分子生物学研究提供了一种新的、简捷有效的工具。     

富勒烯衍生物C60-叶酸对胃癌细胞生长抑制作用的研究

目的研究光照后的富勒烯衍生物C60-叶酸对体外培养的人类胃癌细胞杀伤及其促进胃癌细胞凋亡的作用。方法将光照后不同浓度C60-叶酸与人类胃癌细胞混合培养,用MTT方法检测不同条件下培养的人类胃癌细胞存活率。培养细胞免疫组化检测凋亡细胞中Caspase 3表达。Western blot比较各组中抗凋亡蛋白质Akt1的表达水平。结果随着光照后C60-叶酸浓度增加,人类胃癌细胞的存活率降低,同时凋亡细胞数量增多,且Akt1表达下调。结论 C60-叶酸光照后对人类胃癌细胞有较强的杀伤作用,作用机制与细胞凋亡有关。     

水稻条纹病毒蛋白与核酸的特性

提纯的水稻条纹病毒（云南宜良分离物）在电镜下的形态为多型性,但主要是宽8－10urn,长80－25O的分枝丝状体,有些为直径3urn或8urn的开环环状体,有些为13urn宽,130－190urn长的丝状体,但其基本结构应是直径3urn、长度不等的丝状体。经聚丙烯酸胺凝胶电泳分析,VRNA4编码的病害特异蛋白（SP）分子量为19．9kDa,而VCRNA3编码的外壳蛋白（CP）约为336kDa。在非变性条件下,RSV的4条ssRNAs大小分别为3‘OXIO‘（ssRNAI）、互．2XIc‘（ssR．NAZ）、0．9X10‘（ssRNA3）和0．8X10‘Da（SSRNA4）,有时出现一条大小为0．58X10‘Da的单链RNA（ssRNA）;而4条dsRNAs的分子量分别为4．9X10‘（dsRNAI）、2．8X10‘（dsRNAZ）、20XIOo（dsRNA3）和1．7X10‘D。（dSRNA4）。利用制备电泳分离提纯的外壳蛋白免疫家兔,得到了高特异性的抗血清。A蛋白夹心ELISA检测结果表服RSV－CP与水稻草状矮化病毒（RGSV）CP抗血清有微弱的反应,但与RSV、RGSV的SP抗血清没有反应,而RSV－CP抗血清与RSV．SP及RGSV的SP、CP都无血清学关系,这个结果表明RGSV与RSV之间在进化上具有一定的亲缘关系。