基于高通量解析和可培养技术的白蔹内生真菌类群分析及分离菌株的抗痤疮致病菌活性

【背景】药用植物蕴含丰富的内生真菌类群资源,而且内生真菌可产生与宿主相关的次级代谢产物,具有多种生物活性,是活性化合物生产的潜在经济来源。【目的】分析药用植物白蔹根部内生真菌的物种多样性,并筛选出具有抗痤疮致病菌活性的目标菌株。【方法】基于高通量和组织分离法分析白蔹内生真菌的类群结构多样性;通过琼脂扩散法对内生真菌代谢产物的抗痤疮致病菌活性进行筛选;以微量肉汤稀释法测定代谢产物的最小抑菌浓度(minimuminhibitory concentration, MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration, MBC)。【结果】高通量测序结果显示,白蔹根部内生真菌可注释到8门22纲45目73科93属,根部的优势属为Tainosphaeria(20.86%)和镰刀菌属(Fusarium, 15.38%)。基于组织分离法共从白蔹根部分离获得83株内生真菌,隶属于12个属,其中青霉属(Penicillium,24.10%)、木霉属(Trichoderma,14.46%)、背芽突霉属(Cadophora, 13.25%)、镰刀菌属(Fusarium, ...     

灌浆期水分亏缺条件下二、四、六倍体小麦收获指数和水分利用效率的演化

为揭示不同倍性小麦生长发育、产量性状及水分利用对灌浆期水分亏缺响应的差异,选用二倍体野生一粒小麦(Triticum boeoticum)、栽培一粒小麦(T.monococcum),四倍体野生二粒小麦(T.dicoccoides)、栽培二粒小麦(T.dicoccon),和两个普通六倍体小麦(T.aestivum)品种‘长武134’和‘陕253’6个小麦品种作为供试材料。采用盆栽控水的方法,测定和分析了不同灌浆期土壤水分条件下小麦株高、旗叶叶面积、穗长、根干重、地上生物量、根冠比、千粒重、粒数、产量、收获指数、蒸腾耗水量和水分利用效率等性状的变化。在小麦染色体倍体由二倍体向六倍体进化的过程中,小麦地上生物量、千粒重、穗粒数、产量、收获指数和水分利用效率都显著增加。随着土壤水分从正常→中度亏缺→重度亏缺的减少,收获指数先增大后减小,分别为41.26%、42.48%和38.19%;生物量水分利用效率逐渐增大,分别为2.39、2.43和2.53g·kg–1;产量水分利用效率分别为1.05、1.10和1.04g·kg–1。在灌浆期水分条件是影响收获指数和水分利用效率的关键因素之一。灌浆期的水分亏缺有利于六倍体小麦的收获指数和四倍体的生物量水分利用效率的提高。中度的水分亏缺有利于四倍体和六倍体产量水分利用效率的提高。     

高剪切乳化技术辅助提取荷叶水不溶性膳食纤维工艺优化及其物性分析

为扩大荷叶在食品加工中的开发应用性,研究采用高剪切乳化技术辅助提取荷叶水不溶性膳食纤维(insoh-ble dietary fiber,IDF),优化提取工艺;测定其基本物性,并与常规粉碎、球磨式粉碎处理进行对比.结果 表明,在剪切转速8 000 rpm剪切时间4min,酸液浓度0.25 mol/L,酸解温度45℃条件...     

不同护理模式对维持性血液透析患者透析依从性与生活质量的影响

目的探讨不同护理模式对维持性血液透析患者透析治疗依从性与生活质量的影响。方法将行维持性血液透析的患者80例,根据护理模式的不同分为对照组与研究组各40例,对照组采用常规护理模式,研究组采用协同护理模式,两组均干预4个月,并对两组患者干预前后进行透析依从性量表、简明健康调查表(SF-36)、护理满意度进行问卷调查,分析干预前后两组患者透析依从性、生活质量变化及对护理满意度情况。结果与干预前比较,干预后研究组患者在透析依从性评分、SF-36评分及护理满意度方面均明显升高,差异有统计学意义(均P0.01);而且与对照组比较差异亦有显著统计学意义(均P0.01)。结论协同护理模式可显著提高维持性血液透析患者的血透治疗依从性及生活质量,提高了护理满意度,值得临床推广应用。     

罗格列酮抑制人胃腺癌SGC7901增殖机制的研究

目的：探讨在体外不同浓度的过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）激动剂罗格列酮（ROZ）对人胃癌细胞系SGC7901的生长及细胞周期的影响。方法：采用MTT法比色实验、集落形成实验、电子显微镜,透射电镜,流式细胞仪分别观察不同浓度罗格列酮0.08μmol/L,0.4μmol/L,2μmol/L,10μmol/L,50μmol/L,作用于SGC7901细胞,对细胞增殖,细胞形态和细胞周期的影响。结果：ROZ可抑制SGC7901细胞的生长以及SGC7901细胞集落的形成,并呈现剂量依赖性,其半数抑制浓度（IC50）约为50μmol/L。透射电镜低倍镜以及高倍下可见凋亡细胞。流式细胞仪结果显示,ROZ可抑制SGC7901细胞,引起G0/G1期细胞大量增加,S期细胞减少,且细胞周期停滞于G1期。结论：ROZ具有抗肿瘤作用,能够抑制SGC7901细胞的增殖并诱导凋亡,这种作用与其诱导细胞周期G0/G1期的停滞和诱导凋亡作用有关。因此,ROZ有望成为胃癌治疗的辅助用药亦或治疗药,PPARγ有潜力成为肿瘤治疗的新靶点。     

Calpeptin通过抑制GATA3减轻变应性鼻炎大鼠炎症

摘要 目的：本研究旨在评估钙蛋白酶抑制剂calpeptin减轻变应性鼻炎大鼠炎症的作用并探讨其机制。方法：将20只雄性SD大鼠采用数字表法随机分为4组：正常组（Normal）、变应性鼻炎组（AR）、地塞米松干预AR组（DXMS+AR）、calpeptin干预AR组（Calpeptin+AR）。造模成功后,对大鼠AR症状进行行为学评分,对大鼠鼻黏膜组织切片以HE和PAS染色法观察鼻黏膜病理改变;对大鼠外周血以ELISA法检测总IgE、IL-4、IL-13水平;对大鼠鼻黏膜组织以免疫蛋白印迹法检测GATA3蛋白表达水平。单因素方差分析进行多组间比较,LSD- t检验进行组间两两比较。结果：与Normal组相比,AR组大鼠的鼻部过敏症状、鼻黏膜嗜酸粒细胞计数及外周血总IgE水平均升高,Calpeptin与地塞米松均能减轻气道炎症,减少嗜酸性粒细胞浸润,降低血清中OVA诱导的IgE的生成。探讨机制发现,酶联免疫吸附试验检测Th2细胞因子,与Normal组比较,AR组血清IL-4、IL-13水平均升高（P＜0.05）,而Calpeptin与地塞米松均能降低血清IL-4、IL-13水平（P＜0.05）。免疫蛋白印迹法检测大鼠鼻黏膜GATA3蛋白表达水平显示,与Normal组比较,AR组鼻黏膜 GATA3表达升高（P＜0.05）,而Calpeptin与地塞米松组鼻黏膜 GATA3表达均下降（P＜0.05）。结论：腹腔注射calpeptin能够减轻变应性鼻炎大鼠局部和全身过敏反应,其机制可能下调GATA3表达,影响Th2细胞的分化及细胞因子的分泌有关。     

外胚间充质干细胞在牙组织工程的应用与基因调控

用干细胞构建组织工程化牙齿是近年来口腔医学领域的研究热点,外胚间充质干细胞是目前已知牙源性干细胞的共同前体细胞,细胞的生物学特性和成牙信号分子环境是牙齿发育与再生的核心与关键,并贯穿于牙齿形成的全过程,是研究牙组织工程最具潜力的种子细胞,明确外胚间充质干细胞成牙分化能力及相关表型特征和分化特性,对进一步深入认识牙齿发育与再生机理具有重要作用。     

119例胆道感染患者胆汁病原菌分布及耐药性分析

目的探讨胆道感染患者胆汁培养的病原菌的分布及耐药性,为临床医师有针对性的选择抗菌药物治疗胆道感染提供依据。方法对2010年6月至2012年6月119例胆道感染患者胆汁中分离得到的菌株进行回顾性分析。结果 119例胆道感染患者的胆汁标本中共分离出病原菌80株,阳性检出率为67.2%。其中,检出的革兰阴性杆菌57株,占71.3%;革兰阳性球菌14株,占17.5%,真菌9株,占11.2%。排名病原菌前3位的分别为大肠埃希菌(36.3%)、粪肠球菌(13.8%)、肺炎克雷伯杆菌(12.5%);大肠埃希菌及肺炎克雷伯杆菌对美罗培南的耐药率分别为3.4%和0.0%、哌拉西林/他唑巴坦及阿米卡星的耐药率均是6.9%和10.0%。肺炎克雷伯杆菌对左氧氟沙星的敏感率明显高于大肠埃希菌,分别为64.4%与38.4%。头孢菌素类药物中头孢噻肟的耐药率最高,分别是72.4%和60.0%。粪肠球菌除对糖肽类万古霉素及替考拉宁的敏感率为100.0%外,对其他抗菌药物均有一定的耐药性。在检测出的39株大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌中分离到产ESBLs细菌17株,阳性检出率为43.6%。结论摒弃经验性用药、避免预防性用药、增加标本送检率、结合药敏结果合理选择抗菌药物以及规范手术操作,才能达到提高治疗胆道感染成功率的目的。     

人ABCB6表达载体的构建及稳定表达细胞株A375的筛选

目的构建表达载体pIRES2-ZsGreen1-ABCB6,在转染的人黑素瘤细胞系株A375中筛选其稳定表达的细胞株。方法抽取健康人外周血,分离外周血单个核细胞,提取总RNA,逆转录获取cDNA序列,加入特异性引物经PCR扩增获得ABCB6cDNA双链,再经过BglII、EcoRI双酶切PCR产物及质粒载体pIRES2-ZsGreen1,酶切产物经回收、T4DNA连接酶连接,产物转化到大肠杆菌DH5α,挑取阳性克隆经菌落PCR鉴定、酶切鉴定和测序分析,以确定构建质粒正确。转染人黑素瘤细胞株A375,G418筛选稳定表达ABCB6的单克隆细胞株,应用荧光显微镜鉴定ABCB6蛋白的表达情况。结果 pIRES2-ZsGreen1-ABCB6质粒经菌落PCR、酶切、测序鉴定正确,经过G418筛选后获得稳定细胞株,在荧光显微镜下可观察到绿色荧光蛋白在A375细胞中的表达。结论表达载体pIRES2-ZsGreen1-ABCB6构建正确,并成功筛选出稳定表达ABCB6的A375细胞株,为进一步研究ABCB6的生物学功能奠定了良好基础。