肺癌循环肿瘤细胞的单细胞EGFR基因突变检测

循环肿瘤细胞（Circulating tumor cells,CTCs）是从肿瘤原发病灶脱落并侵入外周血循环的肿瘤细胞。由于CTCs存在较大的异质性,其与癌症发展转移密切相关,但目前尚缺乏有效的CTCs单细胞异质性检测方法。鉴于此,本文发展了在单细胞层面对CTCs进行基因突变的检测方法并用于单个肺癌CTC的EGFR（Epidermal growth factor receptor）基因突变检测。首先用集成式微流控系统完成血液中稀有CTCs的捕获,接着将CTCs释放入含有多个微孔的微阵列芯片中,得到含有单个CTC的微孔,通过显微操作将单个CTC转入PCR管内完成单细胞基因组的放大,并进行单细胞的EGFR基因突变检测。以非小细胞肺癌细胞系A549、NCI-H1650和NCI-H1975为样本,通过芯片与毛细管修饰、引物扩增条件（复性温度、循环次数）的优化,结果显示在复性温度59℃、30个循环次数的条件下,引物扩增效果最优。利用该方法成功地对非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer, NSCLC）患者的血液样本进行了测试。从患者2 mL血液中获取5个CTCs,分别对其EGFR基因的第18、19、20、21外显子进行测序,发现该患者CTCs均为EGFR野生型。研究结果证明此检测方法可以灵敏地用于单个CTC基因突变的检测,在临床研究上具有重要的指导意义。     

胸腺肽α1联合异甘草酸镁对肝癌经导管肝动脉化疗栓塞术后患者肝纤维化及红细胞免疫功能的影响

目的:探讨胸腺肽α1联合异甘草酸镁对肝癌经导管肝动脉化疗栓塞(TACE)术后患者肝纤维化及红细胞免疫功能的影响。方法:选择2015年1月至2016年12月间我院应用TACE治疗的肝癌患者84例,根据随机数字表法分为研究组和对照组各42例。两组患者均行TACE治疗,对照组同时给予胸腺肽α1治疗,研究组则应用胸腺肽α1联合异甘草酸镁治疗,疗程均为5 d。比较两组治疗前、治疗5 d后肝功能、肝纤维化指标,并观察患者治疗前、治疗后1个月、3个月、6个月红细胞C3b受体花环率(RBC-C3b RR)、红细胞免疫复合物花环率(RBC-ICR)。结果:治疗5 d后两组患者谷氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和总胆红素(TBIL)均显著降低,白蛋白(ALB)显著升高(P0.05),研究组患者ALT、AST、TBIL显著低于对照组,ALB显著高于对照组(P0.05)。治疗5 d后两组患者血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PCⅢ)、层粘连蛋白(LN)、IV型胶原(CIV)均显著降低(P0.05),研究组患者血清HA、LN、PCⅢ和CIV显著低于对照组(P0.05)。与治疗前比较,治疗后1个月、3个月、6个月研究组患者的RBC-C3b RR显著升高、RBC-ICR显著降低(P0.05),且研究组患者RBC-C3b RR显著高于对照组,RBC-ICR显著低于对照组(P0.05)。结论:胸腺肽α1联合异甘草酸镁可以有效的缓解肝癌TACE术后患者肝纤维化和肝功能损伤,促进红细胞免疫功能的提升,有助于肝癌TACE术后患者的康复。     

短期整体身心调节法的全身皮肤电导反应规律(英文)

目的:探讨短期整体身心调节法练习者的全身皮肤电导反应特点。方法:采用单因素完全随机实验设计,将68名在校大学生分为整体身心调节组和放松组,分别进行为期10天的整体身心调节训练和经典的肌肉放松训练,并于训练前和训练结束后,测试两组学生身体7个分支的皮肤电导反应。结果:训练前,大学生前3支皮肤电导反应大于后4支;训练10天后,与训练前相比,整体身心调节训练组第1、2支皮肤电导反应显著减小,7个分支的皮肤电导反应出现均衡的规律;放松训练组学生身体7个分支皮肤电导反应变化不显著。结论:短期整体身心调节法形成了全身皮肤电导反应的均衡,可能反映短期整体身心调节法的整体身心相互作用原理。     

公路路域动物生态学研究方法综述

从公路死亡效应、公路阻隔效应、公路回避效应和公路动物通道四个方面总结了国内外公路路域动物生态学研究的6种方法:样线法/样方法、痕迹法(主要是沙床/雪踪)、红外相机监控法、GPS项圈法、标记重捕法和遗传多样性分析法。通过比较分析各种方法优缺点并结合我国应用情况及国内外研究的发展趋势,提出了6种方法在四大研究领域应用对策:1)选择生态敏感区域的典型路段作为长期监测样线,采用样线法系统调查公路动物死亡效应,在部分路段试点与公路养护部门联合开展公路野生动物死亡的统计工作;2)选择生态敏感区域的典型路段作为长期监测样线,采用痕迹法进行公路阻隔与回避效应的监测,与野生动物保护部门合作,引入GPS项圈法提高监测精度;3)以痕迹法和红外相机监控法为主进行公路回避效应的监测研究,还可引入GPS项圈法从景观层面分析路网的道路影响域;4)以痕迹法和红外相机监控法为主进行野生动物通道的监测,逐步引入GPS项圈、遗传多样性分析法进行景观层面的种群稳定性分析,科学评价动物通道效率。     

条斑紫菜蛋白酶解产物中α-葡萄糖苷酶抑制剂纯化及特性

以α-葡萄糖苷酶抑制活性为指标,优选出1398中性蛋白酶、碱性蛋白酶和氨肽酶在一定条件下复配酶解条斑紫菜蛋白制备α-葡萄糖苷酶抑制剂。酶解液加入乙醇至终浓度为60%以沉淀去除多糖,上清液为α-葡萄糖苷酶抑制剂粗品。该粗品利用SP Sepharose High Performance阳离子交换层析、Sephadex G-10凝胶层析和Mono Q阴离子交换层析进行分离纯化,获得一种肽类α-葡萄糖苷酶抑制剂(LGI)。LGI经反向高效液相层析测定纯度为62.4%,基本特性分析显示其具较好的温度和pH稳定性,对α-葡萄糖苷酶半抑制浓度IC50值为97.36μg/mL,属于一种非竞争性抑制剂。     

上海地区最常见嗜尸性蝇类三龄幼虫图解检索表

本文提供上海地区最常见嗜尸性蝇类三龄幼虫图解检索表,共4科11种.该检索表可用于案发现场法医昆虫的分类鉴定,进而推断尸体的死亡时间,也可用于重要有瓣蝇类幼虫的孽生地调查.     

人Hepcidin融合表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

为了在大肠杆菌中表达生产hepcidin,根据大肠杆菌密码子偏好性,化学合成了人hepcidin的基因序列,并构建了hepcidin的融合表达载体pET -hpc。pET- hpc在大肠杆菌BL2 1 (DE3)中表达的hepcidin融合蛋白以包涵体形式存在,其N端带有 6个组氨酸。通过优化诱导表达条件,该融合蛋白表达水平显著提高,占总蛋白的 2 5 . 2 %。表达的包涵体经 1 %TritonX 1 0 0洗涤后溶于8mol L尿素,在变性条件下采用金属螯合层析进行纯化,所得融合蛋白纯度大于 95 %。     

猪显性白毛调控基因（KIT）的研究

猪的白毛色性状由显性基因KIT决定。本文从KIT基因的定位、突变分析、分子基础和作用机制等方面综述了对该基因的研究现状,叙述了KIT基因的研究意义。 Abstract：The dominant coat color in pigs is controlled by KIT gene.The current status of KIT gene is expressed in location、mutation、molecular basis and mechanism.Significance of KIT gene is also discussed in this paper.     

霍乱毒素B亚单位工程菌MM2在含乳酸培养基中的高表达

确定了工程菌MM2中霍乱毒素B亚单位(CTB)在含乳酸培养基中的高表达方案。采用两阶段控制培养温度(30℃→37℃)可提高CTB产量4倍,提高后期pH值(72→84)可提高CTB比表达水平214倍,中间补加乙酸钠可提高CTB产量65%。在5L发酵罐培养菌密度OD₆₀₀达30,CTB产量达1867mg/L,产物在培养液中以多聚体形式存在,具有抗原性。     

降纤酶治疗急性脑梗死29例临床分析

目的 评价降纤酶治疗急性脑梗死的确切疗效。方法 应用前瞻性随机双盲对照试验方法。以神经功能缺失评分,日常生活功能状态评分,血纤维蛋白原等为指标,评价降纤酶的疗效。结果 降纤酶治疗组显著改善了神经功能缺失,降低了评分,提高了日常生活状态,降低了血纤维蛋白原水平。结论 降纤酶可能通过降低血纤维蛋白原水平,从而保护缺血神经地,改善脑供血和神经功能状态,对急性脑梗死具有确切的疗效。