痢疾杆菌大质粒的快速分离与检测

质粒是细菌染色体外小的共价闭环DNA (cccDNA)。质粒的分离与检测是微生物遗传 学、基因工程等研究中的基本手段之一。Kopeckots, 叙述了痢疾杆菌大质粒的分离方法,但过 程较繁。国内分离痢疾杆菌大质粒并检测其分 子量的工作尚未见报道。     

277例急性髓细胞白血病的细胞遗传学分析

目的：探讨急性髓细胞白血病（AML）染色体异常核型的分布情况、特点及其与预后的关系。方法：选择2009年1月-2012年12月在本院门诊和住院治疗的AML患者277例,采取新鲜骨髓,采用直接法和短期培养制备标本,以R显带技术进行染色体核型分析。结果：除47例无分裂相共检出异常核型122例,异常率为53．04％。结构异常（75例）以t（15;17）（56例）和t（8;21）（19例）常见,1．78％的M2、90．77％的M3、26．79％的M2和1．85％的M5分别有t（7;11）、t（15;17）、t（8;21）和t（11q23）异常,而100％的t（7;11）、100％的t（15;17）、55．56％的t（8;21）、100％的t（8;15）和66．7％的t（11q23）分别见于M2、M3、M2、M5和M4亚型。数I／1异常（28例）以＋8（12例）为常见,100％的＋22见于M4E0。结构和数目同时异常（19例）以t（8;21）伴性染色体丢失（8例）为最常见,100％为M2。核型异常与临床缓解率高度相关,伴t（15;17）易位组、伴t（8;21）易位组预后佳,正常核型组次之,其它异常核型预后较差,复杂核型预后最差。结论：特定的染色体异常与亚型及预后密切相关,染色体核型分析在急性髓细胞白血病诊断、分型、治疗及预后判断中具有十分重要的地位和作用。     

玉米胚SOD提取物对糖尿病大鼠血糖、血脂及血清氧化应激状态的影响

目的:探讨玉米胚SOD提取物对于糖尿病大鼠血糖及主要脏器抗氧化能力的影响.方法:成年雄性Wistar大鼠36只,随机分为以下6组:1)正常对照组;2)糖尿病模型组:腹腔注射四氧嘧啶175mg/kg,连续两天;3)二甲基双胍对照组:糖尿病模型+灌服10mg/kg盐酸二甲基双胍;4)SOD高剂量组:糖尿病模型+灌服0.3gSOD提取物;5)SOD中剂量组:糖尿病模型+灌服0.18g SOD提取物;6)SOD低剂量组:糖尿病模型+灌服0.06g SOD提取物.连续3周,动态监测血糖,血清总胆固醇和甘油三酯.45天后处死动物,提取血清,采用硫代巴比妥酸法测定脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量;DTNB法测定还原型谷胱甘肽(GSH)含量;黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力.结果:不同剂量的玉米胚SOD提取物对四氧嘧啶所致高血糖模型大鼠具有明显的降低血糖作用,可降低血清中总胆固醇和甘油三酯.并使血清MDA水平降低,抗氧化物质GSH含量增加,SOD活力升高.结论:玉米胚SOD提取物具有一定的降低血糖、血脂功效,可能与增加机体抗氧化能力有关.     

大白菜原生质体培养再生体系的优化

以栽培大白菜亲本材料河头早A、河头早B、青麻叶C、青麻叶D、石特一号9-3、石特一号11-4、玉青、运农一号等8个品种的无菌苗下胚轴为外植体游离获得原生质体,用液体浅层法将原生质体培养在含1．5mg,NAA、0．5mg／L TDZ、0．6mg／LBA、0．5mg／L 2,4-D的DPD培养基中。培养约48h,细胞发生第一次分裂。培养到第6天发生第二次分裂。约4周,形成大量细胞团和肉眼可见的小愈伤组织。当愈伤组织长到直径4mm左右时,转入分化培养基中诱导分化,在含0．05mg／L IBA的培养基中诱导生根。对影响原生质体培养与分化的多种因素进行了较为系统的研究。     

马尾松花粉多糖中单糖组分的HPLC分析

目的：从马尾松花粉中分离得到40％、60％、80％浓度乙醇沉淀的三种多糖,对其单糖组成进行比较分析。方法：多糖经H2SO4水解后,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生,KH2PO4（pH5．6）-乙腈梯度洗脱,高效液相250nm紫外检测,其中单糖的色谱峰分离清晰,达到基线分离。结论：实验结果显示松花粉多糖中单糖系以葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸为主的杂多糖。并通过峰面积计算得到各单糖含量的摩尔比。     

香根草挥发物化学成分的分析

The chemical components of the volatiles from Vetiveria zizanioides were analyzed by SPME and GC-MS. In the roots, the main component was valencene (30.36%), while in the shoots and leaves, they were 9-octadece-namide (33.50 % ), 2, 6, 10, 15, 19, 23-hexamethyl-2, 6, 10, 14, 18, 22-tetracosahexaene (27.46% ), and 1,2-benzendicarboxylic acid, diisooctyl ester(18.29% ). The results showed that there were many terpenoids in the volatils. In shoot volatiles, there existed 3 monoterpenes, 2 sesquiterpenes and 1 triterpene. Most of the volatiles in roots were sesquiterpenes.     

Intracellular expression of a single-chain antibody directed against type IV collagenase inhibits the growth of lung cancer xenografts in nude mice

It was documented that type IV collagenase with two subtypes of 72 ku/MMP-2 and 92 ku/MMP-9 plays an important role in tumor invasion and metastasis. The endoplasmic reticulum (ER)- retained, single chain Fv antibody fragment (scFv) was used to inhibit the function of type IV collagenase. For expression in mammalian cells, the assembled scFv M97 gene with ER retention signal encoding 6 additional amino acids (SEKDEL) was reamplified by PCR. The amplified fragments were cloned into the pcDNA3.1 vector. The resulting plasmid was sequenced and then introduced into PG cells, a highly metastatic human lung cancer cell line, by lipofectAMINE method. The result of intrabody gene therapy showed that type IV collegenase expression was down regulated significantly as measured by ELISA. The biological behavior of PG cell, such as the ability of in vitro invasion through Matrigel, colony formation on soft agar, was also inhibited by scFv M97 transfection. Animal experiments in a xenograft model of human lung cancer     

枸杞子水提取物对Bel-7402人肝癌细胞增殖的影响

目的:探讨枸杞水提取物对Bel-7402人肝癌细胞增殖的影响。方法:用RPMI-1640完全培养液温育Bel-7402人肝癌细胞,分为空白对照组和药物组,空白对照组给予培养液处理,药物组分为低剂量组(100μg/m L)和高剂量组(200μg/mL),实验过程加入相应剂量的枸杞子水提取物。于倒置显微镜下观察三组细胞形态学变化,采用流式细胞仪观察细胞的凋亡状况及活性氧簇(ROS)含量,采用MTT法检测细胞增殖的抑制作用,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测Bel-7402细胞中bax m RNA和bcl-2 m RNA的表达。结果:在倒置显微镜下观察,枸杞子水提取物使Bel-7402细胞生长受到抑制,表现为细胞贴壁减少、脱落增加,脱落的细胞浮悬于培养液中,呈圆形,体积缩小。枸杞子水提取物可促进Bel-7402细胞凋亡,药物组Bel-7402细胞的凋亡率比空白对照组明显增加(P0.01),G0/G1期细胞比率减少(P0.05),G2/M2期细胞比率增加(P0.05),且ROS含量增加(P0.05)。枸杞子水提取物对Bel-7402细胞的生长有明显抑制作用,且抑制率随着培养时间的延长而增加,且高剂量组在96小时时抑制率最高。药物组Bel-7402细胞中bax基因灰度比值显著高于空白对照组(P0.01),bcl-2基因灰度比值显著低于空白对照组(P0.01)。结论:枸杞子水提取物可抑制Bel-7402人肝癌细胞的增殖、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡,增加ROS含量,促进bax基因表达,抑制bcl-2基因表达,该实验结果可为枸杞子抗肝癌作用提供实验依据。     

一个胶质细胞调制的双神经元时滞模型

本文考虑由一个兴奋性神经元,一个抑制性神经元和一个星形胶质细胞所组成的摸拟生物神经网络,由于我们考虑了突触延滞和递质扩散,因此我们的模型是微分差分方程,如果延滞τ=0时模型的零解渐近稳定,当τ>0时我们精确地给出了临界延滞τ_c当τ越过τ_c时模型的零解失稳,而当τ越过τ_c后,我们发现了周期现象和混沌现象,更有趣的是,系统出现“阵发性”混沌,即随着τ的变化,系统一会出现混沌,一会出现周期现象.     

鼠伤寒沙门氏菌Ⅲ型分泌系统抗感染类抑制剂的筛选

【背景】肠道沙门氏菌(Salmonella enterica)是一种常见的食源性肠道致病菌,可以感染人畜并引发食物中毒、伤寒等疾病。近年来因抗生素滥用导致肠道沙门氏菌耐药性问题日益严峻,迫切需要开发新型抗感染药物。肠道沙门氏菌致病的关键在于与宿主细胞接触后可以通过Ⅲ型分泌系统(type Ⅲ secretion system, T3SS)向宿主细胞内注射效应蛋白,进而调控宿主细胞囊泡运输和免疫应答等生理活动,以方便其高效侵染宿主细胞。T3SS是一类由超过20种蛋白质组成、高度复杂的跨膜分子机器,是革兰氏阴性病原菌中普遍存在的一类蛋白质运输系统和毒力系统。在不同病原菌中,其结构与功能非常保守。位于T3SS核心跨膜区的SctV家族蛋白是T3SS中最保守的组分之一,参与T3SS能量供应和效应蛋白的分泌过程,SctV蛋白的关键氨基酸突变失活后会导致鼠伤寒沙门氏菌丧失对宿主的入侵能力。【目的】以沙门氏菌SctV家族蛋白为靶点,尝试通过虚拟筛选技术筛选与SctV胞内区相互作用的抗感染类T3SS抑制剂。【方法】结合体外相互作用分析、细菌生长曲线实验、细菌分泌实验和细胞侵染实验等对候选分子进行抑制效果的...