2,4-D、BA对人参体细胞胚胎发生过程的影响研究

以人参芽胞、二年生人参根、实生苗（茎、叶）为外植体研究了体细胞胚的发生条件,并对其发生过程中可溶性蛋白、相关酶活性及内源激素的变化等进行了研究。结果表明,诱导愈伤组织的培养基为MS＋2,4-D4．0mg／L＋BA0．2mg／L;在MS＋2,4-D1．0mg／L＋KT0．2mg／L培养基上继代培养,可获得胚性愈伤组织;在无2,4-D的培养基上可诱导出胚状体。将胚状体转入无任何激素的MS培养基上继续培养,之后转入1／2MS培养基上获得再生植株。在体细胞胚胎发生过程中,可溶性多糖和可溶性淀粉含量在早期胚时较低,可溶性蛋白含量、POD及PPO活性在早期胚时最高;IAA在早期胚时期含量最高,在成熟胚时期ABA含量最高,而ABA／IAA比值在成熟胚时较高,利于体细胞胚的发育成熟。     

利用含油果实及藻类生产生物柴油

作为替代能源之一的生物柴油已日益受到欧美及亚洲一些能耗大国的重视并获得了较快的发展。仅欧洲诸炼油厂利用油菜籽、大豆及其他能源植物2006年就生产出生物柴油14亿加仑（1加仑=3．78541L,下同）,当年全球用于生物柴油的支出达17亿美元,至2020年将达到260亿美元。但亚洲与欧美在发展生物柴油方向侧重点不同。     

用渗透剂胁迫鉴定谷子芽期耐旱性的方法研究

采用PEG-6000、甘露醇2种渗透剂7种渗透势模拟水分胁迫,以谷子芽期发芽率、芽长、根长的相对值作为鉴定评价指标,研究谷子芽期耐旱性鉴定的水分胁迫条件。结果表明：在胁迫强度较弱时,40％谷子品种萌发、80％谷子品种胚芽、胚根的生长表现促进作用;在胁迫强度较强时,表现出抑制作用。在PEG-6000、甘露醇胁迫下,萌发耐旱指数与种子千粒重呈负相关。与相对发芽势主要表现为中度正相关,与相对根／芽比主要表现为负相关（PEG-6000胁迫）,与相对芽长、相对根长相关系数很小;相对芽长与相对根长的相关关系主要表现为中度正相关。种子萌发耐旱指数与相对根长两个指标宜作为谷子芽期耐旱性鉴定指标,-0.75MPa PEG-6000、-1.00MPa甘露醇处理可以作为谷子芽期耐旱性鉴定的水分胁迫条件。     

毛白杨COMT基因cDNA的克隆、序列与特异性表达分析

The cDNA fragment encoding caffeic acid 3-O-methyltransferase(COMT) in Chinese white poplar (Populus tomentosa Carr.) was isolated and cloned by RT-PCR technique. The size of the cDNA fragment is 1 080 bp, which almost covers the whole cDNA-encoding region. Authors’ cDNA fragment in P. tomentosa shares 98.7% homology with the reported corresponding cDNA in the P. tremuloids at nucleotide level, 99.4% homology at amino acid level, respectively. The analysis of Northern dot hybridization showed that COMT is expressed specifically in the developing secondary xylem of stem during the season of xylem differentiation, which means the linkage between the gene expression for a monolignol biosynthetic enzyme and seasonal regulation of xylem development in woody plant.     

肝癌患者体内乙型肝炎病毒基因组BCP/Pre C区基因突变多样性分析北大核心CSCD

为研究肝癌患者组织样本中HBV DNA核心启动子区(BCP区)和前C区(Pre C区)的基因突变多样性及其突变规律。收集第四军医大学附属西京医院2015年收治的192例HBV阳性的肝癌患者组织样本,PCR扩增HBV BCP/Pre C区DNA片段并进行测序分析,从测序失败的样本中随机抽取21例,采用构建单克隆文库后测序的方法进行分析。结果显示37.89%(72/190)的HBV阳性肝癌患者体内HBV病毒因呈现多种突变株混合感染的特点而导致PCR产物直接测序失败,经单克隆测序揭示,每一例失败样本的HBV DNA准种池中至少有2~11种突变株共同存在;突变株中缺失突变和插入突变的发生率高达80.95%;其它突变形式按照频率从高到低分别为A1762T/G1764A双突变90.48%,G1756C/T1803A/Δ(1 757~1 765)/Δ(1 824~1 832)四联突变80.95%,T1753C/A1762T/G1764A三联突变57.14%,A1762T/G1764A/G1896A三联突变42.86%,G1756C/Δ(1 757~1 765)双突变28.57%,T1753C/A1762T/G1764A/G1896A四联突变23.81%。由此可见,肝癌患者体内HBV病毒具有BCP/Pre C区DNA突变的多样性,这些缺失与插入突变是导致序列移码与PCR产物测序失败的直接原因。研究结果为HBV持续感染及基因突变检测、相关机制研究和个体化防治奠定了基础。     

新型氟保护漆对儿童唾液变形链球菌影响的定量分析

目的观察新型氟保护漆对儿童唾液中变形链球菌数量的影响,从微生态角度探讨其防龋效果。方法随机选取26名适龄儿童,分为有龋组和无龋组。按涂氟操作标准对两组进行多乐氟(Duraphat~~)的涂布,并收集涂氟前及涂氟后1小时、1周、2周、3周、4周、8周、12周的唾液,提取变形链球菌DNA,通过实时荧光定量PCR检测各时间节点变形链球菌的数量,并对其变化趋势进行分析。结果有龋组涂氟后变形链球菌数量与涂氟前相比呈明显下降趋势,且在第8周和12周差异有统计学意义(P_10.05);无龋组涂氟前后变形链球菌数量无明显变化(P_00.05)。结论多乐氟能显著降低有龋儿童唾液中变形链球菌数量,且抑菌效果持续时间较长,对龋易感儿童的防龋效果好,适合作为儿童防龋措施进行推广。     

幽门螺杆菌毒力基因cagA、vacA和iceA与胃十二指肠疾病的关系

目的了解长春地区就医人群中幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.pylori)毒力基因分布,分析本地区H.pylori主要毒力基因型与胃十二指肠疾病关系。方法将胃黏膜标本培养分离H.pylori并运用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)对H.pylori的三种毒力基因cagA、vacA(s1a、s1b、s1c、s2、m1a、m1b、m2、i1和i2)、iceA(iceA1和iceA2)及其亚型进行检测,分析H.pylori的毒力基因型与疾病之间的关系。结果分离H.pylori 60株,标本依据病理诊断结果分为4组:消化性溃疡组(peptic ulcer disease,PUD)25株、非溃疡性消化不良组(non-ulcer dyspepsia,NUD)9株、糜烂性胃炎组(gastritis erode,GE)15株和胃癌组(gastric cancer,GC)11株。cagA基因的阳性率为90.0%,与阴性相比在疾病中的分布差异有统计学意义(x~2=8.4440,P=0.0270)。vacA基因的s1和s2亚型的阳性率分别为86.7%和13.3%。在s1阳性菌株中,s1c等位基因检出率最高为33.3%,其次s1a检出率为23.3%,而s1b在NUD和GC中检出率为0.0%。vacA基因m区m1检出率为43.3%(m1a和m1b检出率均为21.7%)和m2检出率为56.7%。vacA基因i区等位基因i1和i2的检出率分别为78.3%和21.7%,i1明显高于i2,可能是胃肠道疾病的主要毒力因子,但与疾病的类型无明显相关性。iceA1和iceA2的阳性率分别为80.0%和16.7%,iceA1/iceA2混合型的阳性率为3.3%。三种毒力基因混合型以cagA~+/vacAs1m1i1/iceA1的菌株最多,占总数的31.7%,其次为cagA~+/vacAs1m2i1/iceA1,占总数的28.3%。结论本地区H.pylori毒力因子cagA、vacA和iceA都与胃十二肠疾病的发生密切相关,但与疾病的类型无关。H.pylori毒力基因混合型cagA+/vacAs1m1i1/iceA1和cagA~+/vacAs1m2i1/iceA1是胃十二肠疾病疾病中最主要的优势基因型,其分布也与疾病的类型无密切相关性。     

双歧三联活菌散联合葡萄糖酸锌对厌食症患儿摄食调控因子的影响

目的探讨双歧三联活菌散联合葡萄糖酸锌治疗儿童厌食症对摄食调控因子的影响及疗效。方法将儿童厌食症患者84例,随机分为观察组(42例)和对照组(42例)。两组患儿均予以调整饮食及纠正不良饮食习惯。观察组患儿加用双歧三联活菌散联合葡萄糖酸锌治疗,连用8周。其中双歧三联活菌散1.0 g/次,3次/d,温水冲服;葡萄糖酸锌口服液10 mL/次,1次/d,口服。对照组患儿予以单纯葡萄糖酸锌治疗,其用量、用法及疗程与观察组患儿相同。评估并比较两组患儿治疗前后营养状况、血清TNF-α与β-EP水平的变化,并观察其临床效果。结果对照组与观察组患儿治疗中分别失访3例与5例,两组患儿失访率比较,差异无统计学意义(x~2=0.14,P0.05)。治疗8周后,两组患儿血清Hb和PA水平较前明显上升(P0.05或P0.01),且观察组患儿上升幅度较对照组更明显(P0.05);同时两组患儿血清TNF-α与β-EP水平较前明显上升(P0.05或P0.01),且观察组患儿上升幅度较对照组更明显(P0.05);同时观察组患儿临床总有效率(94.59%)高于对照组(76.92%)(x~2=4.79,P0.05)。结论双歧三联活菌散联合葡萄糖酸锌治疗儿童厌食症的疗效较佳,能明显提高食欲与食量,改善厌食儿童营养状况,其作用可能与其能升高血清TNF-α与β-EP水平,纠正摄食调控因子紊乱密切相关。     

基于EST-SSR标记的平欧杂种榛品种鉴定

为建立准确、高效的平欧杂种榛品种鉴定方法,本研究收集目前国内普遍引种的平欧杂种榛品种(品系)43个,选用课题组已开发的12对EST-SSR引物进行品种鉴定方法研究。结果表明:不同引物在供试样品中的PIC值为0.3800~0.7839,平均为0.5113,各引物组合经毛细管电泳均显示出了良好的扩增效果;平欧杂种榛品种(品系)间的亲缘关系较为复杂,其中薄壳红和平欧62、平欧3和平欧7、平欧30和平欧48的遗传距离最近;引物CAF-2、CAF-3、CAF-12和CAF-13组合使用,可完全区分43个平欧杂种榛品种(品系),其中引物CAF-2与CAF-13组合使用,可鉴定16个主栽品种(品系)。上述研究结果为平欧杂种榛的品种鉴定提供了便捷、有效的方法,也可为其他榛属植物研究提供参考。