亚慢性砷中毒对大鼠肝脏自噬的抑制作用

目的:在建立亚慢性砷暴露模型的基础上,探讨砷暴露对SD大鼠肝脏自噬水平的影响.方法:出生21天断乳雄性SD大鼠分为不同水平砷暴露组,通过饮水给与NaAsO2的方式染毒;全自动生化分析仪检测血清肝功能项目的变化;HE染色检测肝脏组织病理学改变;透射电镜法超微结构的改变.Western blot方法检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3表达水平变化.结果:砷暴露组肝脏出现显著的异常,同时伴随肝组织形态学改变.于是此同时,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值以及beclin1的表达水平均随着砷作用浓度的升高而降低.结论:亚慢性砷暴露在诱导肝脏损伤的同时可伴随自噬水平的抑制,这种水平的改变可能参与了砷的肝脏毒性.     

核黄素体外辐射增敏机理研究

采用MTT方法和荧光显微镜技术, 以小鼠胸腺细胞和人肝L02细胞株为研究对象, 对核黄素的体外辐射增敏作用进行研究. 在5 Gy ⁶⁰Co γ 射线辐照条件下, 低浓度(5~50 μmol/L)和高浓度(100~400 μmol/L)核黄素作用下的小鼠胸腺细胞存活率的时间依赖关系表现出明显的差异, 其规律为: 低浓度下, 细胞受g射线辐照后并不立刻大量死亡, 但随着时间的推移存活率迅速下降, 4 h后存活水平降低到较低的水平; 而高浓度下, 细胞立刻大量的死亡, 且随时间的变化, 细胞存活仅有微弱的下降. 荧光显微镜研究结果显示, 核黄素在细胞中的分布因高浓度和低浓度而有所不同, 低浓度时核黄素集中于细胞核区, 高浓度时细胞膜区也有较高的分布. 由此得到结论: 低浓度时(<50 μmol/L), 核黄素作用的位点在细胞核, 对DNA辐射损伤增敏; 高浓度时(>100 μmol/L), 核黄素辐射增敏的主要靶位点为细胞膜, 两者均显示出核黄素对细胞辐射损伤具有显著的增敏效应.     

JKA97诱导HepG2凋亡及其分子机制研究

目的:研究药物JKA97对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用及其分子机制.方法:采用MTT法观察药物JKA97对细胞增殖的影响;倒置显微镜观察细胞形态变化;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot方法检测线粒体融合蛋白mfn2表达水平变化.结果:药物JKA97抑制人肝癌细胞HepG2细胞增殖,5、10、20 μmol/L作用组24 h抑制率分别为34.26%、43.08%、54.02%;药物JKA97诱导人肝癌细胞HepG2凋亡,10、20 μmol/L JKA97作用HepG2细胞24h,细胞凋亡率分别为22.9%、72.9%;线粒体融合蛋白mfn2表达水平显著降低.结论:药物JKA97对人肝癌细胞HepG2生长具有明显的增殖抑制作用,诱导细胞凋亡;线粒体融合蛋白mfn2表达水平降低可能是其重要的分子机制之一.     

哺乳动物细胞DNA辐射损伤与修复的研究——Ⅰ.γ-线引起人外周血转化淋巴细胞DNA链的断裂与重接

~(60)Coγ-线照射人外周血转化淋巴细胞后,即刻经碱性蔗糖梯度(5～20%)超离心沉降分析,结果表明随照射剂量(1～6Krad)增大,DNA单链断裂亦增加。3Krad照射细胞经与自体血清37℃保温在2小时以内,DNA断裂链重接分子随保温时间的延长而逐渐增加,然未见完全修复。若继续保温至8小时后,DNA重接分子又发生断裂,至24小时后已重接好的DNA沉降峰几乎消失,并在离心管口出现DNA降解分子,同时细胞活力降低,较保温前下降28%。可以设想DNA重接分子的再断裂是一种不可逆的生化变化,且与细胞死亡有关。     

大山雀对巢箱颜色的识别和繁殖功效

为了确定大山雀对巢箱颜色是否能够识别和对繁殖功效的影响,以利于更好的进行保护,于2007—2010年3—7月,在吉林省左家自然保护区,通过悬挂黑、蓝、绿、白和红色巢箱,对大山雀的入住状况和繁殖参数进行了调查和分析。结果显示:2007、2008、2010年红色巢箱的入住率最高,2009年低于平均值;窝卵数除2010年红色巢箱组略低于其它颜色组平均值外,其它年份略高于其它组,而各年份的出飞数红色组均高于其它组。将其它组的合并均值与红色组进行了方差分析,结果表明,窝卵数之间无显著差异,而出飞数之间则有显著差异(F=17.65,df=1,P=0.04),表明红色组的出飞数高于其他组的平均值。     

干扰素-α和-γ对灌流假孕大鼠卵巢黄体的作用

利用假孕大鼠卵巢体外灌流方法研究干扰素－α和－γ对黄体分泌孕酮和前列腺素Ｆ－２α的作用,并测定灌流后卵巢中３β－羟甾脱氢酶和２０α－羟甾脱氢酶的活性。观察灌流假孕第８天大鼠卵巢结果表明,三种不同剂量（５０、１００、１０００ｕ／ｍｌ）的干扰素－α和－γ均能抑制孕酮的分泌,但干扰素－α的抑制作用仅在短时间内发生,干扰－α和－γ均有抑制ｈＣＧ诱导孕酮分泌的作用,但有剂量和作用时间差异。两种不同类型的干扰素对卵巢分泌前列腺素Ｆ２α无显著作用。干扰－α对灌流８小时后卵巢中３β－羟甾脱氢酶的活性无显著作用,但是干扰素－γ显著抑制３β－羟甾脱氢酶的活性,两种类型的干扰素对２０α－羟甾脱氢酶的活性无显著作用。实验结果提示：两种类型的干扰素都能降低灌流假孕大鼠卵巢黄体孕酮的水平,但是呈现不同的抑制机制。     

铅中毒的暴露生物标志物

铅是严重威胁人类健康的一种环境污染物,尤其对儿童神经系统的发育以及学习记忆等产生不良的影响。因此,铅毒性的早期预防、早期诊断以及早期治疗尤为重要。生物标志物是公共卫生领域尤其是环境医学领域的一个研究热点,选择合适的生物标志物对于开展铅毒性的生物监测,实现铅生物效应的早期预警、早期干预等都具有重要的作用。本文就现有的主要铅暴露生物标志物的现状作一归纳。     

CMV和SP双启动子增强外源基因在骨骼肌细胞中的特异性表达

构建含有CMV和肌肉特异性启动子SP双启动子及报告基因EGFP的表达载体(Pentry-CMV-SP-Ghrh-EGFP),使得生长激素释放激素Ghrh在诱导分化的C2C12细胞中特异性表达。     

干扰素—α和—γ对灌流假孕大鼠卵巢黄体的作用

利用假孕大鼠卵巢体外灌流方法研究了干扰素－α和－γ对黄体分泌孕酮和前列腺素Ｆ－２α作用,并测定灌流后卵巢中３β－羟甾脱氢酶和２０α－羟甾脱氢酶的活性。观察灌汉假孕第８天大鼠卵巢结果表明,三种不同剂量的干扰素α－和－γ均能抑制孕酮的分泌,但干扰素－α的抑制作用仅在短时间内发生,干扰素－α和－γ均有抑制ｈＣＧ诱导孕酮分泌的作用,但剂量和作用时间差异。     

兔羊膜上皮细胞的体外培养和增殖

研究妊娠晚期兔羊膜上皮细胞(amniotic epithelial cells, AECs)在体外生长和增殖特性.取妊娠晚期兔(27-28E) AECs进行体外培养, 光镜、扫描电镜下观察后, 利用免疫组化单克隆抗体AE1/AE3、AE5检测培养的AECs中细胞角蛋白的表达, 并采用流式细胞仪检测表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)和血清对AECs细胞周期的影响.结果表明妊娠晚期兔AECs在体外培养条件下生长良好、增殖旺盛; 单克隆抗体AE1/AE3、AE5染色阳性; 血清组、EGF组和联合应用组分别与对照组比较, 各周期细胞比例发生变化, G0/G1期减少, S期、G2/M期增加, 细胞增殖指数(PI)增加, P<0.01, 联合应用组分别与血清组、EGF组比较, P<0.05.说明妊娠晚期兔AECs表达细胞角蛋白CK3, 血清和EGF均能通过改变妊娠晚期兔AECs的细胞周期而促进AECs增殖, 两者联合应用对促进AECs的增殖更为显著.