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以大肠杆菌作为嘧啶核糖核苷水解酶(pyrimidine-specific ribonucleoside hydrolase RihA,RihA)表达宿主,利用生物转化的方法将尿苷高效转化为尿嘧啶。首先构建pET22b-RihA质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中重组表达,研究尿苷的转化情况。采用优化pET22b-RihA质粒信号肽和与分子伴侣质粒共表达两种策略进一步提高大肠杆菌转化尿苷的效率。来源于碱性磷酸酶的PhoA信号肽和分子伴侣GroES-GroEL共表达的菌株F在投底物发酵时转化效果最好,当底物浓度为65 g/L转化15 h时,菌株F几乎将尿苷完全转化,尿苷转化率达到98.9%,而原始菌株A的尿苷转化率仅为80.2%。进一步对菌株F转化尿苷的浓度进行优化,投入一倍体积的尿苷底物后继续培养约53 h尿苷转化完全,得到尿嘧啶产量为73.45 g/L,尿嘧啶产率为98.16%。发酵液上清中RihA酶活最高的为PelB信号肽和分子伴侣GroES-GroEL共表达的菌株C,其RihA酶活是原始菌株A的10.0倍。其中总可溶性RihA酶活最高的为PhoA信号肽和分子伴侣DnaK-DnaJ-... 相似文献
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摘要 目的:探讨CD64指数、可溶性白细胞分化抗原14(sCD14)、可溶性白细胞分化抗原163(sCD163)与胸腔镜肺癌根治术后并发重症肺部感染的关系。方法:选择2020年1月至2023年1月南通市肿瘤医院收治的行胸腔镜肺癌根治术治疗的非小细胞肺癌(NSCLC)患者共415例。根据术后是否并发重症肺部感染将患者分为感染组(21例)和未感染组(394例)。检测外周血CD64指数和血清sCD14、sCD163水平。多因素Logistic回归分析影响胸腔镜肺癌根治术后并发重症肺部感染的因素。受试者工作特征(ROC)曲线分析CD64指数、sCD14、sCD163预测胸腔镜肺癌根治术后并发重症肺部感染的价值。结果:感染组外周血CD64指数、血清sCD14、sCD163水平高于未感染组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示高CD64指数、sCD14、sCD163、降钙素原(PCT)是胸腔镜肺癌根治术后并发重症肺部感染的危险因素(P<0.05),高呼气峰值流量(PEF)是保护因素(P<0.05)。CD64指数、sCD14、sCD163、PCT预测胸腔镜肺癌根治术后并发重症肺部感染的曲线下面积为0.834、0.815、0.842、0.784,联合预测曲线下面积为0.928,高于单独预测。结论:血清CD64指数、sCD14、sCD163、PCT水平升高是胸腔镜肺癌根治术后并发重症肺部感染的危险因素。联合CD64指数、sCD14、sCD163、PCT可较好地预测术后重症肺部感染的风险。 相似文献
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苦参黄酮类成分的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
苦参(Sphora flavescens Ait)为豆科槐属植物,根入药,具有清热、燥湿、杀虫之功效。近年来国内外对苦参的研究较为重视。我们对苦参的化学成分进行了系统的研究,从苦参总黄酮中分离出8种黄酮类化合物:高丽槐素(maackiain,1)、4-甲氧基高丽槐素(4-methoxy-maackiain,2)、三叶豆紫檀甙(trifolirhizin,3)、降脱水淫羊藿素(nor-anhydroicaritin,4)、异苦参酮(isokurarinone,5)、槐属二氢黄酮 B(sopho-raflavanone B,6)、降苦参酮(nor-kurarinone,7)和芒柄花素(formoronetin,8)。化合物1、2和6是首次从苦参中得到的。本文报道苦参黄酮类化合物的研究。 相似文献
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N—乙酰氨基己糖苷酶产生菌的筛选与产酶条件 总被引:4,自引:2,他引:2
About 1200 strains of microorganisms were screened including fungi, actinomyces, and bacteria, in which 237 strains producing the enzyme desired. The results showed that the beta-GlcNAcase and beta-GalNAcase always co-existed in one strain, though may be in different ratio. From strains mentioned above the authors screened out a potent beta-N-acetylhexosaminidase producing strain, Aspergillus tamarii S215, from the soil sample. The optimal conditions for enzyme production were as follows: the microorganisms was inoculated in a 5% wheat bran suspension, cultured at 28-30 degrees C on shaker for 5-6 days. The productivity can be moderately enhanced by the addition of cellobiose or glucosamine or galactosamine or by the extra supplement of (NH4)2SO4 and NH4NO3 as N sources. In the culture filtrate of Asp. tamarii, the alpha, (beta)-galactosidase, beta-glucosidase, alpha-mannosidase and beta-fucosidase were also found. 相似文献
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蛋白激酶C在血小反聚集中的作用 总被引:3,自引:0,他引:3
利用^32P-NaH2PO4标记猪血小板,以蛋白激酶C的40kD底物为蛋白激活的标志。用血小板激动剂在聚集浓度范围内处理血小板,结果表明,除了不能使猪血小板聚集的肾上腺素外,凝血酶等激动剂都使血小板40kD底物蛋白磷酸化明显增加,同时38kD,26kD蛋白质磷酸化也明显增加,且40kD底物磷酸化与血小板聚集有平行增加关系。 相似文献
58.
湖南尖吻蝮蛇毒两个出血毒素的纯化和理化性质 总被引:3,自引:0,他引:3
经SephadexG-75凝胶过滤,QAE-SephadexA-50和CM-Sephadex C-25离子交换层析的步骤,从湖南产尖吻蝮蛇毒中纯化出两个出血毒素。SDS-PAGE测得分子量均为23.5kD,IEF-PAGE测得等电点分别为5.6和5.2,两者具有相似的氨基酸组成,其中酸性氨基酸分别占23%和24%。DaHT-1和DaHT-2的最小出血剂量(MHD)分别为0.5μg和0.8μg。都具 相似文献
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本通过对温带臭虫生活史中各龄若虫及成虫形态的进一步描述,首次提出臭虫度量的长度随虫龄的成熟而逐步增大。身长与体宽之比基本保持在1:1.8左右,前胸宽及前胸长之比在3:1左右;除一龄若虫外,其基本基缘毛丛的数量。每增加一龄,其毛从根数也增加一根,即n 1,这在臭虫形态分类及对臭虫的进一步研究和防治有着重要的意义。 相似文献
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