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目的建立一种简洁稳定、特异灵敏的检测泰泽病原体(Tyzzer’s organism)的反向斑点杂交方法(reverse dot blot,RDB)。方法根据泰泽病原体16S rDNA保守基因组序列设计引物和特异性探针,上游引物用生物素标记,进行PCR扩增,建立反向斑点杂交方法,用此法进行了特异性和灵敏度实验,同时,用RDB、ELISA和IFA对41只小鼠、38只大鼠进行了检测。结果 RDB特异性强,最低检测限为4.5 ng/μL。对79例实验动物的检测中,与ELISA检测结果一致性为100%,阳性率是7.59%(6/79);与IFA一致性为92.4%(73/79),IFA阳性率是0%。结论建立了PCR扩增与分子杂交相结合的准确、灵敏、特异的泰泽病原体反向斑点杂交检测方法。 相似文献
153.
目的建立铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa环介导等温扩增技术(LAMP)检测方法并初步应用于实验小鼠微生物控制。方法根据铜绿假单胞菌oprL基因设计LAMP特异性引物,优化反应条件,确立LAMP的检测体系;再通过对小鼠血清样本的检测,与《GB/T 14926. 17-2001实验动物绿脓杆菌检测方法》对比,阳性结果再用PCR方法验证。结果新建立的LAMP方法特异性强,灵敏度比普通PCR高10~3倍;当反应温度为66℃,内引物和环引物的浓度分别为70μmol·L-1和30μmol·L-1时,LAMP反应体系最佳;利用建立的LAMP方法检测87份小鼠血清样本,铜绿假单胞菌检出率为11. 5%(10/87),比《GB/T 14926. 17-2001实验动物绿脓杆菌检测方法》的高(0/87),阳性结果与PCR方法一致。结论本研究建立的LAMP方法特异性强、灵敏度高、可重复率高、稳定性好,为检测铜绿假单胞菌提供了新的研究手段。 相似文献
154.
广东与海南养殖罗非鱼无乳链球菌的分离、鉴定与特性分析 总被引:16,自引:0,他引:16
从中国广东、海南罗非鱼主养区发生爆发性疾病的多个养殖场的罗非鱼病鱼体上,分离到多株致病菌株。人工感染试验显示分离菌株具有较强的致病力,有多株经腹部注射分离细菌浓度为1×106CFU/mL时可使100%的受感染鱼死亡,选择其中7株强毒株进行药物敏感性实验与鉴定。不同菌株对药物敏感性存在一定的差异但与菌株来源无相关性,29种抗生素中对13种敏感、7种不敏感、9种存在菌株的差异。各分离菌株均为革兰氏阳性菌,呈β溶血。采用链球菌快速鉴定系统ID32STREP、Lancefield分析及多项补充生理生化鉴定结果,初步判断为无乳链球菌Streptococcus agalactiae。PCR扩增16S rRNA基因和GBS-specific gene cfb(CAMP factor)基因的全长序列,BLAST分析显示所有菌株的16S rRNA基因与GenBank上登录的无乳链球菌的相应序列高度同源(99.8%),各分离菌株间的16S rRNA基因序列也高度同源(≥99.9%?100%)。各菌株cfb基因序列高度同源(100%),BLAST显示与已知无乳链球菌的相应序列也具有高度同源性(≥99.0%)。综合上述实验结果,可判定广东与海南罗非鱼主养区2009年夏季发生的罗非鱼爆发性疾病的病原菌为无乳链球菌。 相似文献
155.
156.
157.
中药栀子类药材资源调查和商品药材鉴定 总被引:20,自引:0,他引:20
目的 :对中药栀子类药材进行品种整理。方法 :到产地进行原植物调查并对收集到的国内 30余件商品药材进行了性状鉴定。结果 :列出了栀子原植物分类检索表、产地分布表和商品药材鉴定表。结论 :我国栀子属植物约有 10个品种 ,商品药材的来源以栀子为主 ,其次为水栀子、大红栀子 ,其它仅为地方用药 相似文献
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159.
采用12 株正常动物肠菌群,经微囊化后,组方四个复方生态制剂(1 、2 、3 和4 组) ,加上基础饲料,饲喂20kg~90kg 的生长育肥猪。结果显示四个配方对生长育肥猪均有不同程度的增重肥育效果,但其中1 组对前期(20kg ~40kg) 增重效果显著,日增重率提高52.57 % ,P< 0.05 ;3 组对后期(40kg ~90kg) 增重效果显著,日增重率提高20.40 % ,P< 0.05 。由此可推论出:育肥猪前期和后期肠道正常菌群的组成可能不一样,故需补充的生态制剂的菌株也不尽相同,只有补充适当的生态制剂,方能促使动物增重育肥效果显著。 相似文献
160.