M.natoriense TNJL143-2菌的D-氨基酰化酶的固定化研究

D-氨基酰化酶可用于D-氨基酸的生产,本研究利用来源于Microbacterium natoriense TNJL143-2的D-氨基酰化酶,分别通过琼脂糖包埋、介孔二氧化硅MCM-41和SBA-15吸附,制备了三种固定化酶,并对三种固定化酶的固定化条件、酶学性质、活性保持时间、重复使用次数、米氏常数等参数进行了研究。结果表明,MCM-41载体固定化酶的蛋白固定率为91.6%,SBA-15载体固定化酶的蛋白固定率为88.0%,琼脂糖包埋法蛋白固定率为79.5%。MCM-41、SBA-15以及琼脂糖三种载体固定化酶最适反应pH均为7.0,最适反应温度范围均为37℃。在固定化酶的活性保持时间以及重复利用活性方面,SBA-15固定化酶同样优于其他两种固定化酶。以D型苯丙氨酸(D-Phe)为底物时,琼脂糖包埋固定化酶的Km为28.8 mol/L,SBA-15固定化酶的Km为25.9 mol/L,MCM-41固定化酶的Km为25.0 mol/L。同时本文还探索了三种固定化酶的pH使用范围及酸碱稳定性、温度使用范围及热稳定性,结果显示,SBA-15作为固定化载体均表现出较广的适用范围及较高的稳定性。在不同条件的反应体系中,SBA-15固定化酶的蛋白损失率始终小于其他两种固定化酶。     

三种锦鸡儿属植物过氧化氢酶基因的克隆及表达特性分析

为研究过氧化氢酶基因在锦鸡儿属植物抵御干旱胁迫中发挥的作用,采用兼并PCR (degenerate polymerase chain reaction, Deg-PCR)和末端克隆(rapid amplify cDNA ends, RACE)技术分离了柠条锦鸡儿(Caragana korshinskiikom)、小叶锦鸡儿(C. microphylla)和中间锦鸡儿(C. davazamcii)的过氧化氢酶(Catalase, CAT)基因cDNA序列,并对它们在干旱胁迫条件下的表达特性进行了比较分析。这3种锦鸡儿属植物CAT cDNA均为1 755 bp,含有1个1 479 bp的开放阅读框(open reading frame, ORF)、85个碱基的5'非编码区和201个碱基的3'非编码区,编码492个氨基酸的蛋白质。序列比较分析发现,该3条序列仅在322 bp处有一个碱基的差异(CkCAT为T碱基, CmCAT和CdCAT为C碱基),但它们编码相同的氨基酸。生物信息学分析显示,CkCAT、CmCAT和CiCAT的与其他植物的CAT蛋白具有较高的同源性,在进化上与豇豆和大豆的CAT亲缘关系较近。实时荧光定量PCR分析结果显示,在干旱胁迫条件下CkCAT、CmCAT和CdCAT的表达量明显升高,显示CAT在锦鸡儿属植物抵御干旱逆境中发挥重要作用。     

微重力通过m6A修饰影响骨骼肌糖原代谢初探

长期航天飞行会导致骨骼肌萎缩，糖代谢紊乱可能是重要原因之一。N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)是真核生物最常见和最保守的信使核糖核酸(messenger RNA,mRNA)修饰，通常参与关键基因表达的调控。本研究主要探究微重力对肌细胞糖原代谢的影响及微重力引起的m6A修饰改变与糖原代谢相关酶表达改变的相关性。通过蒽酮法检测骨骼肌细胞糖原含量，通过流式法检测荧光-D-葡萄糖类似物2-(N-7-硝基-2,1,3-苯并恶二唑-4-氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖[2-N-(7-nitrobenz-2-oxa-1,3-diazol-4-yl)amino-2-deoxyglucose,2-NBDG]标记骨骼肌细胞的葡萄糖摄取，利用点杂交检测信使RNA m6A修饰的变化情况以及通过qPCR、Western blot检测糖原代谢相关酶和m6A修饰相关酶的表达，通过RNA甲基化免疫共沉淀(methylated RNA Immunoprecipitation,meRIP)检测肌细胞糖原代谢相关酶m6A修饰水平，同时通过GEO数据库分析临床及动物实验中糖原代谢相关酶和m6A修饰相...     

陕西省永寿县药用植物资源调查分析

依托第四次全国中药资源普查，采用野外踏查、样线调查和样方调查的方法对陕西省永寿县药用植物资源进行调查与分析；查清永寿县药用植物资源分布情况，为该县药用植物资源保护、开发利用提供科学依据。结果表明，永寿县现有药用植物276种，隶属79科222属，科组成以菊科、豆科为优势科，分别包含36种和22种药用植物；草本植物为永寿县药用植物的主要类型，占总数的72.83%；野生重点调查药用植物65种，隶属35科61属，其中以根及根茎类入药的药用植物占比为最高（46.15%）；同时，调查还发现了甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch.）、杜鹃兰[Cremastra appendiculata (D. Don) Makino]等10种珍稀濒危药用植物。综上所述，永寿县药用植物资源种类丰富、耐旱喜阳药用植物居多、中药资源开发利用前景广阔。通过本次中药资源普查，基本摸清了永寿县中药资源家底，可为当地中药产业的可持续发展提供参考。     

长非编码RNA CASC15影响肝细胞SREBP1a表达及定位

长非编码RNA CASC15(long non-coding RNA CASC15,CASC15)被认为是一种与肿瘤相关的lncRNA,参与调控多种肿瘤的侵袭、增殖和迁移等生物学过程。然而CASC15在细胞内脂质代谢中的作用仍不明确。胆固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)是细胞内调控脂质代谢的关键转录因子，其成员SREBP1a主要调控脂肪合成中关键酶基因的表达。本文通过分子生物学实验及细胞功能学实验，研究CASC15对人肝细胞中脂质调控因子SREBP1a表达及定位的影响。研究结果显示，在肝细胞中，过表达CASC15(P<0.001)后细胞内的SREBP1a的mRNA和总蛋白质水平不变，前体蛋白质水平增加(P<0.05)且定位发生改变，即入核增加；SREBP1a调控脂肪酸合成相关产物游离脂肪酸(P<0.001)和甘油三酯(P<0.001)呈下调趋势。本文揭示了CASC15调控肝细胞脂代谢的一种可能机制，希望为脂代谢紊乱相关疾病的治疗和研究提供新思路。     

新一代基因组测序-通往个性化医疗

M.贾尼特编著,薛庆中等译科学出版社出版书号:978-7-03-033007-9,定价:48元内容简介本书由工业界和学术界领域的专家,集中于最新的新一代DNA测序技术及其对基因研究的影响和药物发现研究的发展。因此,它提出了对商用平台下的基因组测序技术的详细比较分析,以及替代性的见解,全面介绍了新出现的测     

利用N糖苷酶F对单克隆抗体N糖酶解条件的优化

为了优化利用N糖苷酶F（PNGase F）酶解单克隆抗体中N糖的方法，应用本公司生产的单抗对PNGase F酶的酶解条件进行优化，包括缓冲液pH、酶种类、仪器、酶解程度、变性缓冲液及酶加入量等，总结酶解条件对N糖谱结果的影响。结果显示，置换缓冲液至1×PBS中可以避免某些单抗在低pH酶解时G0F转化为G0F-GN并可改善峰型；快速PNGase F和加入变性缓冲液能有效提高酶解效率；UPLC和1.7 μm粒径色谱柱能提高分离度；不完全酶解影响N糖含量结果。研究结果表明，采用优化的酶解条件可快速、有效的酶解单抗上的N糖，使N糖谱结果准确可靠，为细胞株筛选和单抗药物质量控制提供有效手段。     

不同粒径生物炭对土壤磷吸附-解吸特性的影响

粒径是影响物质吸附性能的一个重要因素。本研究以不同粒径(0.25～1 mm、0.075～0.25 mm、<0.075 mm)油菜秸秆生物炭(SBC)和鸡粪生物炭(MBC)分别与两种土壤(高磷土、低磷土)混合进行室内培养30 d,通过土壤磷等温吸附试验与解吸试验，结合土壤磷吸附相关性质，评价不同粒径生物炭对土壤磷吸附-解吸特性的影响。结果表明：在水体系中，3个粒径的SBC与MBC对磷的吸附能力大小均表现为<0.075 mm(43125、20083 mg·kg^-1)>0.075～0.25 mm(37376、13199 mg·kg^-1)>0.25～1 mm(27749、12251 mg·kg^-1);在土壤体系中，同一种生物炭的3个粒径间土壤磷吸附量差异较小。与无生物炭处理相比，添加SBC提高了土壤对磷的最大吸附量(S_max),增幅为236.8%～755.7%,并降低了土壤磷解吸率；添加MBC的S_max增幅较SBC低，但提高了土壤磷解吸率(增幅为7.2%～295...