稻病毒病介体昆虫灰稻虱的研究

灰稻虱是水稻黑条矮缩病和条纹叶枯病的介体昆虫。黑条矮缩病毒在虫体内循回期多数为17—19天,终生带毒,但不经卵传毒。获毒最低温度在8℃以下,在4—5℃不能传毒。 灰稻虱在浙北平原一年发生6代,第1和第3代长翅型成虫大量迁飞,通过麦→早稻→晚稻途径,完成病毒和介体的生活环。病毒的主要感染期,早稻在5月下旬到6月上旬的早栽本田前期,单季晚稻在6月下旬到7月上旬,双季晚稻在7月中旬到8月初的早栽本田前期和秧田期,大、小麦在年内苗期。 在连片种植,选用耐病品种等农业防治的基础上,抓住冬前麦苗期,早栽晚稻本田前期喷药杀灭介体,能基本控制本病害。     

反选标记法在微生物基因敲除中的应用

随着后基因组时代的到来,简单高效的基因编辑工具和方法在研究微生物的基因表达调控、工程菌株的遗传改造等方面发挥了巨大作用。反选标记法是基于同源重组原理进行基因敲除的一种便捷高效的方法,该方法通过选择性的遗传标记的丢失和回补,实现对靶基因的敲除或目的基因的插入等分子遗传操作。这种选择性的遗传标记一般不依赖于传统的抗生素筛选标签,且同一反选标记能够反复使用,可连续进行多轮遗传操作,实现对多个基因靶位点的分子编辑。对近年来反选标记基因的种类、作用原理及在微生物基因敲除实验中的应用进行综述,以期为高效、可靠的分子编辑方法的研究提供参考。     

藏红花素调控NLRP3通路抑制上皮间质转化治疗糖尿病肾病的机制研究

本研究从上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)和NLRP3通路角度研究藏红花素(crocin, CRO)治疗糖尿病肾病(diabetic kidney disease, DKD)的效果及作用机制。将60只C57BL/6J小鼠适应性喂养1周,随机选取10只作为正常组,采取正常饲养。其余小鼠接受高脂饮食继续喂养8周,之后链脲佐菌素造模并随机平均分为模型组、MCC950组(10 mg/kg MCC950,腹腔注射)、低剂量CRO组(5 mg/kg,灌胃)、中剂量CRO组(10 mg/kg,灌胃)、高剂量CRO组(20 mg/kg,灌胃)。治疗8周后,收集小鼠24 h尿液样本、血液样本、肾脏进行分析测定。采用试剂盒测定小鼠24 h尿蛋白定量(24 h-urine total protein, 24 h-UTP)、血清肌酐(serum creatinine, Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)评估其肾功能。对肾脏同一部位进行苏木素-伊红(hematoxylin-eosin, HE)、马松(Masson)染色...     

流式细胞术和LDH释放法检测NK细胞杀伤效能的实用性比较

目的 流式细胞术和乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)体外杀伤功能的比较和优化.方法 以人外周血PBMCS经体外诱导扩增的NK细胞为效应细胞,K562细胞作为靶细胞,按5:1、10:1、20:1、40:1效靶细胞比共培养,分别采用LDH法和流式细胞术检测靶细胞死...     

金琥的离体快速繁殖

1 植物名称 金琥(Echinocactus grusonii ) 。 2 材料类别 幼嫩的小球。 3 培养条件 (1)诱导小球培养基为B5+BA 2.0 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.2;(2)增殖培养基为B5+BA 0.8+NAA 0.08;(3)生根培养基为1／2B5+BA 0.3+NAA 0.05。3种培养基中蔗糖均为3％,琼脂为0.7％,pH5.8左右,培养温度为(25±2)℃,光照度为2 000 lx,每天光照10 h。 4 生长与分化情况 将金琥小球下部切去1／2,留下上半部,用清水清冼干净,再用无菌水洗5～6次后切成小块,接种到培养基(1)上,经过45 d,刺座开始隆起,1周后,在隆起处开始分化小球,并慢慢长大。 金琥的增殖培养基中,BA浓度超过2.0ng·L-1易导致玻璃化,低于0.5 mg·L-1则增殖缓慢。如利用培养基(1)进行继代增殖,玻璃化十分严重。     

杉木心材精油抑菌活性及其化学成分研究

通过水蒸气蒸馏法提取杉木心材精油,并进行柱层析分离、气-质联用分析和抑菌活性试验,比较分析了精油含量、化学组成和抑菌活性成分.结果表明,杉木心材精油含量为1.794～2.076(w/w);气-质联用分析共分离出47个色谱峰,鉴定出27个化合物(占精油总量的99%),其中主要成分为柏木脑(76.27%);杉木心材精油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、伤寒沙门氏菌等均有较明显的抑制作用;柏木脑是杉木精油的主要抑菌活性成分.     

动态光散射法测定病毒载体基因治疗产品的平均粒径及粒径分布

目的:建立病毒载体基因产品的粒径及分布的测定方法。方法:采用马尔文Zetasizer Nano ZS型纳米粒度仪,以氯化钠注射液作为稀释剂对样品进行适当稀释后,用手动测量方式进行测定。结果:测定的60 nm标准纳米粒子平均粒径为61.24±0.68nm,多分散指数(polydispersity index,PDI)为0.020±0.012 nm。重组人新型P53腺病毒注射液测定6次,平均粒径为122.42±1.80 nm,相对标准偏差(RSD)为1.4%;PDI值为0.056±0.014 nm,RSD为25.1%。重组人新型P53腺病毒注射液于37℃存放时,平均粒径和PDI值随时间延长有显著增加。至28天时,平均粒径增加到130.50,PDI值增加到0.265。结论:动态光散射法快速、简便、准确,可用于病毒载体基因治疗产品的粒径及分布的检测。     

结核分枝杆菌重组38kD蛋白用于新疆南疆维吾尔族和湖南湘中汉族血清学诊断的研究

目的：对结核分枝杆菌38kD蛋白编码基因进行克隆表达及纯化,建立基于重组38kD蛋白的酶联免疫吸附法（EusA）检测结核病人血清标本,评价重组38kD蛋白用于结核病血清学诊断抗原的价值。并比较分析其在汉族和维吾尔族人群中的血清学诊断的差异。方法：用PCR方法扩增38kD蛋白的编码基因,构建重组质粒,转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达,得到纯化的38kD蛋白,建立以38kD蛋白为包被抗原的ELISA,并检测临床确诊的结核病人血清标本。结果：ELISA检测结核病患者血清标本的维吾尔族阳性率为34％（52／153）,汉族为52．4％（65／124）,两者对比有统计学差异（x2=9．538,P〈O．005）。在阴性对照中的维吾尔族特异度为96．4％（159／165）,汉族为98．8％（130／133）,结果无统计学意义（x2=0．111,P〉0．5）。结论：重组38kD蛋白用于血清学诊断的敏感度在维吾尔族和汉族中有差异,而其诊断特异度无差别。     

国家果树种质云南特有果树及砧木圃

国家果树种质云南特有果树及砧木圃,挂靠云南省农业科学院园艺作物研究所。该圃于1984年开工建设,l989年6月通过了由农业部组织的验收,成为全国果树资源保存圃之一。占地7.13hm2,种质资源保存面积为5.06hm2,资源以活体露地保存为主。圃内建有隔离网室、玻璃及阳光板温