西马津(Simazine)药效生物测定法—去胚乳小麦幼苗法

本文报导了一个简便可靠的抑制光合作用除莠剂西马津的生物测定方法,以去胚乳的小麦幼苗为材料,在处理6—7天后卽可获得测定结果,幼苗高度与西马津剂量(0.9—30.0微克)的对数成直线关系,我们并较系统的观察了苗龄,光强,处理时间及其他调节物质对于去胚乳的小麦幼苗的影响,与其他西马津的生物鉴定方法的比较指出本测定方法的特点是所需样品量极微(0.9微克),可测剂量范围亦较广,测定周期短,且专一性高。     

哺乳动物卵母细胞及早期胚胎核仁结构与rRNA基因表达研究进展

核仁是细胞中合成哺rRNA的场所,与细胞的蛋白质合成密切相关,近年的研究证明,在卵子发生和早期胚胎发育过程中,核仁的结构和机能都发生着有规律的变化,对于研究卵子发生和早期胚胎发育机理有着重要的意义。本文以牛为主要对象,综述了有关核仁的结构,发生以及卵母细胞成熟及早期胚胎发育过程中核仁结构和rRNA转录变化规律的研究进展。     

PCCA表达与肾透明细胞癌患者预后相关性

[目的]探究PCCA基因与肾透明细胞癌(KIRC)患者预后的联系。[方法]下载TCGA数据库中KIRC患者基因表达数据及临床信息,利用PCCA基因表达差异分析探究KIRC患者中PCCA的表达情况;生存分析测定PCCA基因表达与患者生存时间的联系;采用逻辑回归和Cox回归分析研究PCCA基因表达与患者grade、stage、T分期和M分期等临床特征的相关性;基因集富集分析(GSEA)测定KIRC患者中与PCCA表达相关的通路。[结果]基因表达数据包含肿瘤组织539例,正常组织72例;临床数据包含537例患者信息;患者肿瘤组织中PCCA表达显著低于正常组织(P <0.000);生存分析显示PCCA低表达组患者生存时间显著低于高表达组(P <0.000); PCCA表达与临床特征显著相关(P <0.000),肿瘤等级、分期越高,PCCA表达越低;丙酸代谢,赖氨酸减少,胰岛素信号通路、色氨酸代谢、过氧化物酶体以及丙酮酸代谢等通路富集于PCCA高表达组。[结论]对于539例肿瘤组织,72例正常组织及537例病人的数据进行初步分析发现,PCCA低表达组患者6年生存率低于50%,而...     

哺乳动物卵泡发育模式及其调控机理

了解卵泡发育动脉及其调控机理对于提高动物繁殖率和控制人类生育,都具有重要的意义。近年来随着超声波扫描技术的发展,人们对家畜卵泡发育模式及其调控机理有了更深入的认识。本文简要综述了当前在家畜卵泡发育基本模式,参与卵泡发育调节的各种因子及卵泡发育的种属特异性等方面的研究进展。     

乙型肝炎病毒全S基因疫苗诱导小鼠的特异性免疫应答

乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)感染是我国常见病及多发病。ＨＢＶ难以清除的原因之一就是机体的免疫功能障碍。目前虽然基因重组ＨＢＶ表面抗原 (ＨＢｓＡｇ)疫苗预防ＨＢＶ感染取得了较好的效果 ,但基因重组ＨＢｓＡｇ疫苗主要能诱导特异性体液免疫 ,不能刺激机体的细胞免疫应答。近年来发现基因疫苗可诱导机体产生细胞及体液免疫反应 ,特别是诱导细胞免疫反应的能力优于蛋白、多肽类疫苗 ,更适应于慢性病毒感染的预防与治疗[1,2 ] 。为了探讨应用ＨＢＶ基因疫苗预防ＨＢＶ感染的可能性 ,本文构建了ＨＢＶ全Ｓ基因和ＨＢｓＡｇ基因疫苗 ,观察和比…     

含分泌型萤光素酶和绿色荧光蛋白双报告基因的慢病毒载体的制备与表达分析

目的:制备含分泌型萤光素酶和绿色荧光蛋白双报告基因的慢病毒载体,为慢病毒载体的进一步广泛应用奠定基础。方法:克隆构建含分泌型萤光素酶和绿色荧光蛋白双报告基因的转基因载体pCS-gluc-2A-eGFP,酶切与序列分析鉴定其正确后,与包装质粒pCMVHR’Δ8.2、包膜质粒pVSV-G共转染293FT细胞,获得含分泌型萤光素酶和绿色荧光蛋白双报告基因的重组慢病毒载体;重组慢病毒载体感染A549、Huh7细胞后,用荧光显微镜直接观察报告基因GFP的表达,或取细胞上清实时检测分泌型萤光素酶的表达。结果:制备了含双报告基因的重组慢病毒载体,感染细胞后可以活体观察绿色荧光蛋白的表达,也可以快速灵敏地检测到分泌型萤光素酶的表达。结论:所获含分泌型萤光素酶和绿色荧光蛋白双报告基因的重组慢病毒载体感染效率高,表达易于活体实时检测,灵敏度高。本研究为慢病毒载体的广泛应用奠定了基础。     

采用熔点曲线法研究乙肝病毒准种与拉米夫定临床耐药相关性

为了研究乙型肝炎病毒(HBV)准种与拉米夫定耐药的关系以指导临床用药,随机选取拉米夫定治疗后发生YMDD变异的慢性乙型肝炎(CHB)患者30例,以及停用拉米夫定后发生病毒反弹的CHB患者30例作为研究对象,同时以未经拉米夫定治疗的CHB患者30例为对照,采用聚合酶链反应(PCR)扩增这些病人体内HBV的P区,再用熔点曲线法分析3组患者体内的HBV准种情况。另外,采用相同方法对HBV C区、S区准种也进行了对比。结果显示,病毒变异组患者体内HBV P区准种数量为2.50±0.86个,病毒反弹组为5.30±0.95个,未治疗组为8.37±0.93个,3组间准种数量两两比较均有显著性差异(P<0.05)。HBV C区病毒变异组准种数量为6.10±1.86个,病毒反弹组为6.37±1.81个,未治疗组为6.33±1.64个,3组准种数量无显著性差异(P>0.05)。HBV S区病毒变异组准种数量为5.23±1.85个,病毒反弹组为6.17±1.93个,未治疗组为5.77±2.11个,3组准种数量无显著性差异(P>0.05)。HBV P区熔点曲线图显示,病毒变异组优势病毒群的熔点与病毒反弹组和未治疗组相比,已发生明显的偏移,而在HBV C区和S区熔点曲线图中,3组的波峰数和优势病毒群的熔点均没有明显变化。可见,在拉米夫定的作用下HBV P区准种数量减少,准种的性质也发生变化,发生变异后劣势耐药病毒株变为优势病毒株易被检测到。拉米夫定对HBV C区、S区作用不明显。     

鸦胆子油乳、艾迪注射液对非小细胞肺癌化疗效果的影响

目的:分析鸦胆子油乳、艾迪注射液配合GP化疗治疗非小细胞肺癌的疗效及对免疫功能的影响。方法:以2010年1月至2016年3月宝鸡市解放军第三医院收治的非小细胞肺癌患者80例为研究对象,根据住院病历号顺序分为观察组和对照组,每组40例,对照组接受GP化疗方案,观察组接受GP化疗方案联合鸦胆子油乳、艾迪注射液治疗,两组均10天为一个周期,4个周期为一个疗程,均治疗1个疗程。比较两组的临床疗效、不良反应、T细胞亚群水平及生活质量评分。结果:观察组的总缓解率和疾病控制率分别为62.5%和92.5%,均显著高于对照组(47.5%和75.0%)(P0.05);治疗后,两组的CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+水平均较治疗前显著降低(P0.05),观察组治疗后的CD3~+、CD4~+、CD8~+水平均明显高于对照组(P0.05);两组治疗后的KPS评分均较治疗前升高,且观察组的KPS评分显著高于对照组(P0.05);治疗期间,观察组的恶心呕吐、腹泻、白细胞计数减少、血小板减少、肝功能损害和肾功能损害的发生率均显著低于对照组(P0.05);半年内,观察组的生存率(87.5%)显著高于对照组的生存率(77.5%)。结论:鸦胆子油乳、艾迪注射液配合GP化疗治疗非小细胞肺癌的疗效显著,不良反应发生率低,提高半年生存率,而且可降低化疗对T细胞亚群水平的影响,并降低患者血清VEGF水平。     

5个HIV基因修饰可明显提高其在不同系统中的表达

目的:确定HIV-1疫苗中有效的交叉保护性细胞免疫抗原,提高各个基因在相应疫苗载体中的表达水平,为研究不同抗原在DNA载体和痘苗病毒载体中的免疫原性奠定实验基础。方法:选择HIV B′/C亚型5个以细胞免疫为主的抗原(Gag、Pol、Rev、Tat和Nef),进行基因序列优化及表达结构改造,并分别构建以质粒DNA和重组痘苗病毒为载体的两大类HIV-1疫苗。结果:优化前后5个目的基因均能够在这2种载体中有效表达;虽然采用相同的基因修饰策略,但与痘苗病毒载体相比,在DNA载体中各基因表达水平的提高均较为明显;含有抑制性序列(INS)的gag、pol基因经密码子优化后,Gag、Pol蛋白的表达均明显提高,其中Pol蛋白的提高更为明显,单独pol基因比gagpol天然结构表达水平要高,而gag基因却变化不大;对于rev、tat、nef基因而言,优化后的单独基因结构要略高于优化后的融合结构(hRTN),且二者均高于未优化的融合结构(RTN)。结论:为进一步确定HIV-1疫苗中有效的交叉保护性细胞免疫抗原、研究不同抗原在DNA载体和痘苗病毒载体中的免疫原性奠定了实验基础,为进一步研究DNA疫苗和重组痘苗病毒疫苗联合免疫提供了实验依据。     

乙肝病毒X基因真核表达质粒及细胞模型的建立

采用聚合酶链反应（PCR）方法扩增HBVX基因,定向亚克隆入真核表达载体pRc／CMV2．构建重组质粒pCMV／X;采用脂质体法转染QSG7701细胞,筛选阳性细胞克隆;RT—PCR法检测HBV XmRNA的表达情况．Western blotting法鉴定HBx蛋白的表达,结果表明,构建的真核重组表达质粒pCMV／X中包含有完整的HBVX基因片断,pCMV／工转染的QSG7701细胞中有HBVXmRNA及HBx蛋白的稳定表达．成功建立了HBVX稳定转染的细胞系,为进一步探讨HBx在HCC的发生发展过程中所起的作用,提供了一个有价值的细胞模型．