使用激光微束研究哺乳动物早期胚胎分化

近年来，一些研究者用显微操作方法证实， 哺乳动物早期胚胎至少直至8一细胞期，每个卵 裂球仍然是全能的，即还没有开始分化。1965 年Daniel用激光微束照射破坏2一细胞期兔胚中 一个卵裂球后，另一卵裂球在培养条件下发育 至桑堪胚期。此外，还有Tarkowski和Wroblewska (1967）的卵裂球分离实验，Mintz (1965) 卵裂球重聚合实验以及最近Willadsen (1979) 羊胚卵裂球分离实验等。     

抗SARS-CoV N蛋白单克隆抗体的特异性及其识别抗原表位的初步鉴定

为了明确抗SARS-CoV N蛋白单克隆抗体的特异性,并鉴定其识别表位,首先在E.coli中表达了人类冠状病毒229E(HCoV-229E)和OC43(HCoV-OC4)N蛋白,用Western blotting和间接免疫荧光方法分别检测了4株抗SARS-CoV N蛋白单克隆抗体(1-1C2、1-1D6、2-8F11和2-2E5)与HCoV-OC43和HCoV-229E及其N蛋白的交叉反应情况,而后应用12种重组截短型SARS-CoV N蛋白对上述4种单克隆抗体的识别表位进行了初步定位.结果显示(1)在4株抗N蛋白单克隆抗体中,1-1C2、1-1D6和2-2E5不与HCoV-OC43和HCoV-229E及其N蛋白发生交叉反应,为SARS-CoV N蛋白特异性抗体;(2)2-8F11、1-1D6和2-2E5针对的抗原表位位于SARS-CoV N蛋白的aa 30-60,1-1C2针对的抗原表位则位于SARS-CoV N蛋白的aa 170-184.这一研究为阐明SARS-CoVN蛋白的免疫学特征,建立特异性免疫诊断技术和研究其致病机制提供了必要的依据和材料.     

中国毛壳菌科研究III.毛壳菌属和梭孢壳属的种

报道了毛壳菌属和梭孢壳属5个新记录种,同丝毛壳Chaetomiumhomopilatum,刺毛壳C.spinosum,变绿毛壳C.virescens,小孢梭孢壳Thielaviamicrospora,栖土梭孢壳T.terricola。根据所采集的标本和菌种对这些种进行了描述和照像。干制培养物标本和菌种保藏在西北农林科技大学真菌标本室(HMUABO)。     

肺部及中枢神经系统尖端赛多孢子菌感染1例并文献复习

报道我院收治尖端赛多孢子菌致肺部及中枢神经系统感染1例,并探讨其治疗措施。取患者肺泡灌洗液、脑脊液、颅内引流物进行病原学培养及宏基因组二代基因检测,根据菌株的形态学特点和基因测序结果鉴定为尖端赛多孢子菌。手术引流及伏立康唑抗真菌治疗效果明显,但仍需进一步随访。     

澳门翼手类物种多样性调查

2009 ～2012 年,对澳门翼手目(蝙蝠)物种多样性进行了调查。结果共捕捉到10 个物种,属5 科8 属,其中包括澳门原来记载的2 个物种,即蹄蝠科的大蹄蝠(Hipposideros armiger)和蝙蝠科的东亚伏翼(Pipistrellus abramus);本研究新增加8 个物种,即狐蝠科的犬蝠(Cynopterus sphinx) 和棕果蝠(Rousettus leschenaulti),鞘尾蝠科的黑髯墓蝠(Taphozous melanopogon),菊头蝠科的菲菊头蝠(Rhinolophus pusillus),以及蝙蝠科的大足鼠耳蝠(Myotis ricketti)、普通伏翼(P. pipistrellus)、普通长翼蝠(Miniopterus schreibersi) 和南长翼蝠(M. pusillus)。另外,通过野外录音和分析,并与已发表物种声音特征比较核对,发现菊头蝠科和蹄蝠科各一种,前者可能是泰国菊头蝠(R. siamensis)或者中菊头蝠(R. affinis),后者可能是果树蹄蝠(H. pomona) 或者三叶蹄蝠(Aselliscus stoliczkanus)。本文对已捕捉10 种蝙蝠的分布、形态特征和回声定位叫声特征进行报道,同时对其种群数量和保护现状进行了讨论。保护蝙蝠栖息生境(洞穴、古老建筑和蒲葵树等) 对保护澳门蝙蝠物种多样性至关重要。     

金佛山自然保护区首次发现白颊黑叶猴

据资料记载,我国黑叶猴主要分布于广西和贵州的部分地区,四川省尚未见黑叶猴分布的报道。1980—1991年间,我们在金佛山渔泉后河村的猎户家收购到白颊黑叶猴(Presbytis francoisi francoisi Pousargues)标本两具,一雌一雄。雌体长41、尾长75、后足长22、耳长3.4cm,体重11.5kg;雄体长44、尾长86、后足长24、耳长3.5cm,体重13.4kg。1991年8月     

中国不同地区庚型肝炎病毒5′非编码区基因异质性分析

为分析庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）５′非编码区（５′ＵＴＲ）基因的异质性,确定中国不同地区ＨＧＶ主要流行株的特点及其分布,本研究对来自江西、湖南、河南、河北、甘肃等地９株ＨＧＶ５′ＵＴＲ区进行基因扩增与序列测定。通过对５′ＵＴＲ区１５４个核苷酸区段的序列进行分析,并与文献报导的其它２５株（１６株中国ＨＧＶ、９株国外代表株）相应区段进行比较与系统树分析,结果表明：（１）中国不同地区ＨＧＶ５′ＵＴＲ区基因存在一定异质性,但不存在明显的地区分布差异;（２）对３４株ＨＧＶ５′ＵＴＲ区的系统树分析,可分为３组,存在明显的地理分布特征;（３）绝大多数（除１株外）中国ＨＧＶ分离株皆分在第三组,并可分为二个亚组。     

SARS-CoV假病毒中和试验技术的建立及评价

为避免传统的SARS病毒中和试验需要操作活毒而存在的生物安全隐患,建立了基于假病毒系统、操作较安全的SARS中和试验技术平台。本研究应用高效表达SARS-CoV S(密码子优化的全长S蛋白,简称S)的真核表达载体(pVRC8304),与HIV慢病毒包装质粒(p CMV△8.2)及转移质粒(pHR′CMV EGFP)3个质粒载体系统共同转染人胚肾细胞293T,包装了SARS假病毒;通过SARS假病毒感染的RD-A细胞中标记基因EGFP表达的分析,确定SARS假病毒能有效进入细胞,建立了可在BSL-2级实验室操作的SARS病毒中和试验技术平台。用该技术平台对不同免疫血清进行了中和抗体分析,并比较了基于假病毒和基于SARS活病毒的中和试验效果。结果显示:SARS假病毒和SARS活病毒两个中和试验系统获得中和抗体滴度变化趋势一致,表明本研究构建的SARS假病毒可替代SARS活病毒用于建立操作上安全的SARS病毒中和试验技术平台。     

真核表达MERS-CoV刺突蛋白亚单位的信号肽序列优化研究

中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)的刺突蛋白(Spike,S)亚单位1(S1)是引起宿主免疫反应和产生中和抗体的主要靶抗原,也是疫苗研发和病原检测的重要靶标,选用适宜的真核表达系统高效表达S1蛋白是进行相关研究的基础。为确定MERS-CoV S1在哺乳动物细胞中高效分泌性表达的信号肽序列,构建了含高斯荧光素酶(Gaussia luciferase,GLuc)、人组织纤溶酶原激活剂(Tissue plasminogen activator,tPA)及小鼠免疫球蛋白G的2a亚型(Mouse immunoglobular G subtype 2a,MIgG2a)7个信号肽(原始序列和改造序列)序列的MERS-CoV S1表达质粒,瞬时转染细胞后,通过Western Blot检测并比较细胞培养上清和裂解液中S1的表达水平及分泌表达效率(条带密度灰度扫描比),并对哺乳动物细胞表达的S1蛋白的纯度与抗原特性进行了分析。结果表明7种信号肽在293T、BHK21和ExpiCHO-S^TM三种细胞系统中介导MERS-CoV S1的高效分泌表达的效率各有不同,其中tPA-1信号肽介导S1抗原在ExpiCHO-S^TM中具有较高的分泌表达效率与产量,纯化的S1蛋白保持了较好的抗原性。本研究为进一步研发基于MERS-CoV S1的亚单位疫苗及免疫学检测试剂奠定了基础。     

胃癌患者胃粘膜无芽胞厌氧菌分析及药物敏感试验

对98例具有消化不良症状的患者做胃镜检查,取胃粘膜组织进行细菌分离培养,结果表明,不同的消化道疾病,胃粘膜微生物群均发生不同的改变,其中胃癌患者改变最明显,胃内微生物检出率最高,无芽胞厌氧菌检出率87.88％（29／33）,其中产亚硝酸优杆菌检出率为57.60％（19／33）,硝酸盐还原试验阳性菌株占72.70％（24／33）。这些细菌和胃癌的关系有待深入研究。对19株产亚硝酸优杆菌做药物敏感试验,结果显示,该菌对青霉素类药物均耐药,对氯霉素,红霉素,庆大霉素敏感。