肝郁脾虚证模型大鼠血流变及TXB_2、PGFla的变化（英文）

目的：探查中医肝郁脾虚证模型的血流变及相关调节因子的状态。方法：采用慢性束缚应激＋过度疲劳＋饮食失节法建立大鼠肝郁脾虚证模型,测定大鼠造模三周、自然恢复一周时的血流变和血浆TXB2、PGF1a。结果：与正常组相比,模型组大鼠造模三周150/s、38/s、10/s、5/s切变率下的全血粘度、还原粘度均显著升高（P〈0.001）,红细胞聚集指数显著降低（P〈0.001）,红细胞压积显著升高（P〈0.01）,红细胞变形指数无显著性差异（P〉0.05）;血浆TXB2显著升高（P〈0.001）,6-keto-PGF1a显著降低（P〈0.05）,TXB2/PGF1a显著升高（P〈0.01）;模型组大鼠第四周150/s、38/s、10/s、5/s切变率下的全血粘度、还原粘度仍显著升高（P〈0.001或P〈0.01）;红细胞聚集指数显著降低（P〈0.001）;红细胞压积与变形指数无显著性差异（P〉0.05）;血浆TXB2和TXB2/PGF1a显著降低（P〈0.05）,6-keto-PGF1a显著升高（P〈0.05）。结论：肝郁脾虚证大鼠存在血液高粘和血栓易形成状态,恢复期血液高粘同时伴有扩血管因素的加强。提示肝郁脾虚证有血流变的异常和血浆TXB2-PGI2的平衡失调,主要涉及到血小板和血浆因素的参与。     

福建省有害疣孢霉菌Mycogone perniciosa的种群分化初探

对16株来自福建不同双孢蘑菇产区(县级)的有害疣孢霉菌菌株进行了菌落特征、厚垣孢子形态特征观察并利用ISSR分子标记技术对它们进行了遗传多样性分析,结果表明:不同来源的有害疣孢霉菌的菌落特征和厚垣孢子形态特征均可归为3种类群;ISSR分子标记技术的分析结果也显示,16株有害疣孢霉菌菌株成3个进化分支,并与形态特征相对应,初步确定福建省有害疣孢霉菌出现3个类型的种群分化。     

绿色荧光小鼠胚胎干细胞的分离与培养

目的:建立绿色荧光小鼠胚胎干细胞系.方法:以ICR及GFP转基因小鼠为实验动物,冲取交配后3.5天小鼠GFW-/+囊胚,去透明带后进行完全培养,以13.5天鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为饲养层,并对细胞克隆用亚克隆的方法分离扩大培养.结果:获得了边缘清晰,表面平滑,结构致密,隆起生长的鸟巢状克隆,碱性磷酸酶染色呈强阳性,干细胞特异性的多能因子OCT4及Nanog表达呈阳性,且能稳定表达绿色荧光的雄性干细胞系.结论:本文为小鼠ES细胞系的建立提供了一种稳定而可靠的方法.     

肥胖、2型糖尿病过程中大鼠肝脏形态结构变化的比较

目的:探讨在肥胖、糖尿病过程中大鼠肝脏形态结构的变化.方法:Wistar雄性大鼠,随机分为:普通饮食组,高脂饮食组,高脂饮食+链脲佐菌素组.第0周随机抽取6只大鼠处死后取肝脏进行石蜡包埋,HE染色,制成切片.在饲养过程中选取不同时间点,各组随机处死2只大鼠,取肝脏进行石蜡包埋,HE染色,切片,镜下观察,比较各组差异.结果:与对照组相比,肥胖组大鼠肝脏组织中脂肪细胞数目增多、体积变大,随肥胖程度的增加而加剧,导致肝发生中、重度脂肪变性.肝细胞肿胀,肝窦间隙变窄,可见炎性细胞浸润增多,凋亡细胞增多.糖尿病组大鼠,肝脏组织中脂滴形成,出现大的脂囊.肝细胞出现细胞核固缩,凋亡细胞增多,有炎性细胞浸润,以淋巴细胞为主,未见巨噬细胞增多.血管壁硬化、玻璃样变性.结论:在肥胖/糖尿病发生、发展过中,大鼠肝脏中有脂肪的异位储存(肝脂肪样变性),并伴随有炎性细胞的浸润.     

蓝光调节高粱突变体har1 幼苗的去黄化反应

以航空诱变高粱突变体har1为材料, 对其幼苗去黄化过程进行研究。萌发的种子在远红光下预培养6小时后, 置于12小时蓝光/12小时黑暗条件下培养。测量幼苗的各器官伸长, 结果表明, 与野生型R111相比, har1的胚芽鞘、中胚轴、第一叶鞘以及第二叶鞘的伸长均受到蓝光的明显抑制, 而蓝光对叶片生长影响不明显。3天龄har1黄化苗在连续蓝光下中胚轴花色素苷的积累明显增高, 红光和远红光无此效应。此外, 蓝光促进har1叶片叶绿体发育, 且在蓝光照射24小时后叶片中叶绿素含量升高。Western blot检测结果显示, 7天龄R111和har1幼苗隐花色素SbCRY1b蛋白水平呈现蓝光下低、黑暗中高的变化趋势, har1的SbCRY1b蛋白水平在黑暗中高于R111。研究结果表明, 高粱har1在去黄化过程中具有蓝光超敏感表型,SbCRY1b的作用值得进一步深入研究。     

梅毒螺旋体的营养物质转运及能量合成相关代谢机制研究

梅毒螺旋体(Treponemapallidum,Tp)是严重危害人类健康的性传播疾病梅毒的病原体,目前仍难以实现体外人工培养.Tp在感染期间是如何获得足够的能量来完成其复杂的致病过程迄今不明.本文就Tp的葡萄糖转运、糖酵解途径、丙酮酸去路以及NAD+再生的研究进展做一综述,旨在为探索Tp尚未明了的生理代谢机能、突破Tp...     

烤烟‘K326’的组织培养与快速繁殖

为了提供市场所需的大量种苗,适应云南烤烟(Nicotiana tabacum)规模化生产的需要,以田间烤烟的叶片、茎段、培养瓶内种子萌发的叶片和茎段为外植体进行组织培养实验.实验比较了5种培养基,筛选出烤烟的最佳愈伤组织诱导和愈伤组织不定芽分化培养基为MS 6-BA 2 mg·L-1 NAA0.2 mg·L-1 Sugar30 g·L-1 Agar6 g·L-1;生根培养基为MS Sugar30g·L-1 Agar6 g·L-1,生根率为100%;用营养土移栽后,存活率为100%.     

烤烟‘K326’的组织培养与快速繁殖

为了提供市场所需的大量种苗,适应云南烤烟(Nicotiana tabacum)规模化生产的需要,以田间烤烟的叶片、茎段、培养瓶内种子萌发的叶片和茎段为外植体进行组织培养实验。实验比较了5种培养基,筛选出烤烟的最佳愈伤组织诱导和愈伤组织不定芽分化培养基为MS+6-BA 2 mg.L-1+NAA 0.2 mg.L-1+Sugar 30 g.L-1+Agar 6 g.L-1; 生根培养基为MS+Sugar 30 g.L-1+Agar 6 g.L-1,生根率为100%;用营养土移栽后,存活率为100%。     

花椒窄吉丁气味结合蛋白基因AzanOBP3的克隆、原核表达及组织表达谱分析

【目的】本研究克隆花椒窄吉丁Agrilus zanthoxylumi气味结合蛋白(odorant binding protein, OBP)基因AzanOBP3,并对其进行序列和表达分析,旨在更好地了解OBP基因在花椒窄吉丁成虫触角识别气味物质过程中的作用,为农林害虫的绿色防控提供理论依据。【方法】利用RT-PCR扩增花椒窄吉丁气味结合蛋白基因AzanOBP3的cDNA序列,采用生物信息学软件分析其核苷酸和氨基酸序列;构建重组表达载体pET-28a(+)/AzanOBP3,转化到大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)感受态细胞中进行融合蛋白的IPTG诱导表达,SDS-PAGE及Western blot鉴定重组表达蛋白;基于qPCR技术分析AzanOBP3基因在花椒窄吉丁雌雄成虫不同组织(头、胸、腹、足和翅)中的表达情况。【结果】克隆获得了花椒窄吉丁气味结合蛋白基因AzanOBP3的cDNA全长序列(GenBank登录号:MT318832),预测到其开放阅读框长414 bp,共编码137个氨基酸,等电点为4.79,蛋白分子量为16.038 kD,N末端具有29个氨基酸组成的信号肽序列,蛋白序列中具有6个保守的半胱氨酸残基,属于典型的昆虫OBP。序列分析表明,AzanOBP3的氨基酸序列分别与苹果小吉丁Agrilus mali AmalOBP2和白蜡窄吉丁Agrilus planipennis AplaGOBP的一致性最高,分别为74.45%和76.92%,在进化关系上更加同源。构建了重组表达载体pET-28a(+)/AzanOBP3。在37℃180 r/min摇床培养及1 mmol/L IPTG诱导4 h条件下,AzanOBP3在大肠杆菌中成功地表达出了与预测蛋白分子质量大小一致的AzanOBP3融合蛋白。qPCR检测结果表明,AzanOBP3基因在雌性和雄性成虫的不同组织中都有表达,其中在雄成虫足中的表达量最高。【结论】明确了AzanOBP3的核苷酸和氨基酸序列组成及编码蛋白的理化特性。组织表达谱结果提示, AzanOBP3的功能可能不仅局限于嗅觉识别,在非嗅觉器官中可能也具有重要的生理功能,特别是在其寻找寄主植物与取食的过程中可能发挥着重要作用,AzanOBP3功能还需更深入的研究。本研究为今后更深入地探究气味结合蛋白的结构及其在花椒窄吉丁化学感受系统中的作用机制提供依据。