绿色荧光蛋白及其在细胞生物研究中的应用

绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)作为一种新型的标记蛋白,已被广泛的应用。它发出的荧光稳定,检测简单,结果真实可靠。GFP可对活细胞的生理过程进行监控,并且可以用于活细胞中蛋白质分子的定位及动力学研究。其特有的生物化学性质使其在细胞生物学和分子生物学领域有着广泛的应用前景。     

利用低温水箱进行细胞长期保存的研究

利用-70℃低温冰箱成功进行了对细胞的长期保存,在保存长达8个月的时间内,复苏的细胞,与液氮保存的细胞复苏效果相同,该方法是液氮保存外的一种简便,可行、低成本方法。     

阿维莲霉菌中aveD基因缺失对阿维菌素合成的影响

利用aveD基因的缺失载体pCZ8(pKC1139::△aveD)对阿维菌素（Avermectin）的产生菌阿维链霉菌（Streptomyces avermitilis)76-9的aveD基因进行缺失获得aveD缺失突变株。经摇瓶发酵和HPLC检测,发现该突变株只产生阿链菌素B组分。说明将阿维链霉菌的aveD基因缺失,并不影响下游aveF的表达。缺失突变株的阿维菌素的总产量与出发菌株的总产量基本相同,突变株中B1的产量略有提高,阿维菌素B2的含量显著提高。     

一种黑豆蚜储存蛋白质的分离纯化及其亚基的性质

从黑豆蚜 (AphiscraccivoraKoch)血淋巴中经DE5 2纤维素离子交换层析、SephadexG 15 0凝胶过滤以及在FPLC上QSepharose分离出一种蛋白质。该蛋白质经SDS PAGE测定在非还原和还原条件下分子量均为 6 0kD左右 ,等电聚焦电泳测得其等电点约为 5 .0 ,为糖蛋白。若蚜期间该蛋白质在蚜虫体内积累 ,羽化至成蚜时含量明显减少 ,为蚜虫提供发育所需氨基酸 ,在成蚜期间仍以低浓度存在。根据其分子量和氨基酸组成与含量变化动态应属不完全变态昆虫的一种持续性储存蛋白质。     

新型生物医用材料—止血纤维的制备与应用研究

作者以高分子生物医用材料,采用气体牵伸纺丝技术,制备了医用止血纤维。经止血机理及结构的研究,其在外伤止血、护创和手术局部止血方面疗效显著。     

喀斯特槽谷区土地石漠化与综合治理技术研发

深入揭示流域尺度水-土-生资源格局和研发因地制宜的水-土-生治理技术是"十三五"石漠化治理工程的主要瓶颈。国家重点研发计划——"喀斯特槽谷区土地石漠化过程及综合治理技术研发与示范"项目(2016YFC0502300)针对槽谷区特点,锁定两个关键科学问题和五个关键技术,从过程机理研究-技术研发-应用示范3个层面解剖区域水/土/生物资源分布格局与地质地貌之间的关系,阐明石漠化过程中的相关生态变化机理,因地制宜地研发水土资源高效利用、土壤地上/下流/漏失阻控与生态恢复技术;研发野生砧木及经济树种互作效应与优化配套技术,构建槽谷区可持续的生态系统和生态产业模式并示范推广,为区域生态改善和贫困问题解决提供科技支撑。     

植物免疫应答过程中 Ca2 ＋及 CaM/CML 的功能

钙离子是一个多功能的第二信使,在植物响应各种生理刺激时,Ca2＋参与调节植物的多种生长发育和胁迫适应过程。在这些过程中,Ca2＋信号带有特异性标签,通过Ca2＋结合蛋白及其下游靶蛋白感知不同刺激并翻译成响应的细胞反应。钙调素（CaM）和钙调素类蛋白（CML）是Ca2＋主要感受器,通过调节不同靶蛋白的活性调控多种细胞功能。最近在植物对抗病原菌的防卫反应中有关Ca2＋／CaM信号转导系统的研究取得了一定进展。重点关注植物免疫应答过程中受CaM／CML调控的信号组分的研究,包括参与Ca2＋信号产生和Ca2＋依赖的表达基因组分调控。     

基于医院管理者视角的医学新技术转化应用模式分析

目的 对医院管理者视角下,新技术的引进,引进后的使用与管理及使用后的综合评估与反馈进行综合分析。方法 通过对53名医院管理人员1~1.5小时的半结构式访谈收取定性资料,并进行属性归类分析。结果 研究发现新技术在引入过程中主要考虑的因素涉及新技术的特性及循证依据的情况、新技术引入可能对医生的影响、新技术引入可能为医院带来的影响、新技术引入过程中涉及的相关政策、新技术引入可能对医患关系的影响;明晰了新技术引入的程序、新技术的使用管理及使用后的评估。结论 二三级医院基本已经形成一整套新技术的引进及管理反馈机制,在医院层面新技术的引进及使用过程中,政策因素起到非常重要的作用。     

不同微生物的α—乙酰乳酸脱羧酶的生理生化特性的研究

分析测定了不同微生物的α-乙酰乳酸脱羧酶（ALDC）酶活力,结果表明不同来源的ALDC酶力有较大差异,酶反应速度曲线存在明显差异;酶反应体系的pH对ALDC酶活力有明显的影响,如乳酸乳球菌的ALDC酶反应最适PH为6．6,而产气气杆菌的ALDC酶反应的最适PH为5．8,酶反应体系中加入不同浓度的亮氨酸,缬氨酸和异亮氨酸对不同来源的ALDC酶活性有较明显的影响。     

蛋白激酶B对活性氧调节7721人肝癌细胞生长的影响

以有义和反义人猛型超氧化物歧化酶（MnSOD）、蛋白激酶B（PKB）cDNA分别转染入7721肝癌细胞系建立高、低表达MnSOD和PKB的模型,通过改变细胞内、外源性活性氧和抗氧水平及PKB的活性,研究活性氧调节肝癌细胞生长过程中与PKB信号转导途径的关系。结果表明,低浓度外源性活性氧过氧化氢（1～10umol/L）应激及MnSOD低表达细胞中内源性活性氧水平升高,都可促进肝癌细胞增殖,而抗氧化剂丹参素(40mg/L）干预及MnSOD高表达使细胞内源性活性氧水平相对下降,都可一定程度抑制细胞的生长。采用^32P参入法检测细胞PKB酶活性,发现细胞内、外源性活性氧均能激活PKB,而采用抗氧化干预,能明显抑制PKB的酶活性。采用PT-PCR法检测AP-1转录因子组成成员c-fos和c-jun基因的mRNA表达,发现与PKB活性呈正比。说明活性氧在特定细胞内氧化/还原环境下可通过激活PKB途径传递信号、调控转录因子AP-1表达、促进肝癌细胞生长。