米曲霉GX0015蔗糖酶基因克隆及生物信息学分析

在亚洲,低聚果糖的工业生产通常利用米曲霉或黑曲霉发酵蔗糖而来,而曲霉含有水解蔗糖和低聚果糖的蔗糖酶。因此要生产高纯度低聚果糖,必须抑制蔗糖酶的水解活性。本研究以工业生产低聚果糖的米曲霉菌株GX0015为研究材料,采用RT-PCR技术,克隆获得蔗糖酶基因(GenBank登录号:EU181219)。利用生物信息学手段对蔗糖酶基因进行分析:该酶为525个氨基酸残基组成的亲水性膜外蛋白;功能域分析结果显示:该酶具有信号肽序列,糖苷酶32家族N端特征序列和糖苷酶32家族特征序列;并具有糖苷酶32家族酶活性中心的NDPNG、RDP和EC保守序列。米曲霉蔗糖酶与酵母菌的转化酶在进化树上的位置最近。     

移植骨髓间充质干细胞源性神经元样细胞治疗大鼠脊髓损伤

目的:研究骨髓间充质干细胞源性神经元样细胞移植治疗成鼠脊髓损伤的可行性。方法:选取成年SD大鼠32只,两只用以提取骨髓间充质干细胞,其余被分为3组,其中细胞移植组10只,PBS缓冲液组10只,空白对照组10只。骨髓间充质干细胞分离传代培养并诱导成神经元样细胞后用Hoechst33342标记,损伤1周后采取静脉注射移植的方法移植于大鼠脊髓损伤区,移植六周后用免疫荧光方法检测细胞的存活及与宿主脊髓的整合情况。脊髓损伤后的1~6周对各组动物进行BBB评分,用SPSS12.0进行数据分析。结果:细胞移植组动物的BBB评分提高显著,于其他两组差异有统计学意义。细胞移植组免疫荧光显示,移植细胞在体内大量存活并桥接于脊髓损伤区的两端,存活的多数细胞神经元特异性标记物NSE、NF-200、星形胶质细胞特异性标记物GFAP表达呈阳性。结论:移植定向诱导的神经元样细胞有助于大鼠脊髓损伤后的功能恢复。     

介绍一种方便的细胞内灌流装置

本文研制了一种一体化的细胞内灌流换液装置,能使电极内液在４ｓ内全部被更换,同时又有效地避免了噪音干扰。我们用该装置观察了豚鼠心室肌ｃＡＭＰ－依赖性氯离子通道的调控,表明该装置操作简便、用液节省、适用有效。     

Dictyoclostus cf.neoinflatus Licharew的拟内疹

有铰纲腕足动物的壳壁疹孔,具有分类及生态方面的意义。十九世纪中叶,M.D.Carpenter(1853)用光学显微镜,观察了穿孔贝类的壳壁穿孔。以后,K.M.Hatai(1940)、P.E.Cloud(1942)以及A.Williams(1956,1965)等,对此类构造均作过描述,并称之为内疹(Endopuncta)。1968年Williams利用电子显微镜,研究了现代穿孔贝内疹的超微形态,并对其成因和功能作了较详细的探讨。     

安徽天堂寨国家级自然保护区蝶类名录

本文记载安徽天堂寨国家级自然保护区内蝴蝶8科102种,其中4种为安徽省蝶类新记录。     

细胞外Ba~(2 )对内向整流钾通道的阻断作用

实验采用双微电极电压箝 (TEV)法研究Ba2 对非洲爪蟾卵母细胞表达的内向整流钾通道 (IRK1)的阻断作用。细胞外Ba2 浓度分别为 0 ,1,3 ,10和 10 0 μmol/L ,K 浓度分别为 10和 90mmol/L ,可见快速开通道阻断剂Ba2 对IRK1的瞬间电流 (施加电压后 1ms)的阻断作用依赖Ba2 、K 、时间和电压 ;但对IRK1的开关特性几乎无影响 ,IRK1对之不通透。三级指数拟合的结果表明 :细胞外Ba2 低浓度 ( 1和 3 μmol/L)时 ,Ba2 与K 相互竞争同一结合位点 ,随着Ba2 浓度的增加 ,时间常数不增加但拟合的权数却呈浓度依赖性增加 ,所以失活过程随Ba2 浓度的增加越来越快 ;细胞外Ba2 高浓度 ( 10和 10 0 μmol/L)时 ,时间常数随Ba2 浓度的增加而减少 ,拟合的权数却呈浓度依赖性减少 ,失活过程也越来越快 ,说明Ba2 作用位点由通道的表面进入了通道更深的部位。上述结果提示 ,Ba2 对IRK1的阻断存在两种不同的机制。细胞外K 浓度为 90mmol/L和Ba2 浓度为 3 0 μmol/L时 ,Mg2 或Mn2 可与Ba2 争夺结合位点 ,随着Mg2 或Mn2 浓度增加 ,失活过程逐渐减缓 ,Ba2 在通道中的结合点也逐渐离开通道 ,Mg2 能而Mn2 不能进入通道较深处阻断通道 ,说明IRK1中有多离子阻断形式     

立足质量工程为核心的微生物学多元教学策略探讨

以培养适用性强、综合素质高的人才为目标,基于多元智能理论,结合“微生物学”的学科特点,将课程的理论教学及实验教学进行整合、优化,探索构建了“多模块、多层次”的教学体系,实施“目标责任制”、“专题模块制”、“分级阶梯制”等一系列特色教学策略。教学改革实践初步获得良好的效果,切实提高了教学质量,有效促进了学生个人能力的发展及提高,该教学改革具有一定的参考意义。     

分析CpG ODN佐剂对呼吸道合胞病毒重组疫苗诱导的细胞免疫应答的作用

目的:对CpG ODN佐剂对呼吸道合胞病毒重组疫苗诱导的细胞免疫应答的作用进行分析。方法:选取BALB/c小鼠作为试验对象,将小鼠随机分为6组,之后分别制备G1F/M2蛋白,用LDH释放法对CTL的活性进行检测,分析T细胞分化情况,并应用流式细胞仪分析LDH的记忆细胞及CD8+/CD4+记忆细胞。结果:将CpG2216混合G1F/M2后,通过腹腔诱导,其特异杀伤的活性显著好于单独采用G1F/M2进行腹腔注射诱导杀伤活性。并且将两者混合的杀伤活性显著强于常规佐剂Al(OH)3。G1F/M2+Al+CpG(i.p.)组的诱导杀伤活性显著优于CpG+G1F/M2(i.p.)组。结论:将CpG ODN当做呼吸道合胞病毒重组疫苗G1F/M2佐剂,能够将细胞免疫应答显著增强。