葡萄糖脱氢酶高产工程菌的构建及融合蛋白的一步纯化

PCR扩增葡萄糖脱氢酶基因(glucose dehydrogenase, gdh),连接到测序载体pUC19,转化大肠杆菌JM109,测序(GenBank登录号:EF626962)后,亚克隆到表达载体,转化大肠杆菌M15,筛选得到GDH高产工程菌M15/pQE31-gdh8.工程菌经IPTG诱导表达,超声波破碎,粗酶液比活力高达15 U/mg.镍凝胶柱亲和层析纯化表达蛋白,超滤、冻干后,比活力达360 U/mg.重组质粒pQE31-gdh8在E .coli M15中稳定程度高达99.8%.工程菌M15/pQE31-gdh8诱导表达的重组酶活力高,易纯化,重组质粒稳定程度高,具有良好的工业应用前景.     

基于焦磷酸测序的杉木人工林微型土壤动物多样性

为探讨微型土壤动物在人工林生态系统中的功能及其对环境变化的响应,利用18S rDNA宏基因组比较了湖南省攸县不同发育阶段(3、13、26年)以及不同栽培代数(1、2、3代)杉木人工林微型土壤动物的群落多样性及结构.结果表明:焦磷酸测序共得到94922条优质序列,平均长度为436 bp.杉木人工林微型土壤动物主要类群包括:脊索动物门60.8%、环节动物门24.0%、节肢动物门7.4%、线虫动物门3.6%、轮形动物门1.5%和扁形动物门1.2%.5块样地的ACE指数与Shannon指数具有显著性差异,其中第1代13年生杉木林的ACE指数(712.33)、Chao1指数(500.00)、Shannon指数(2.66)均最低,Simpson指数(0.26)最高,表明第1代13年生杉木林微型土壤动物多样性最低.相关分析发现,速效钾含量与ACE指数和Chao1指数之间存在显著负相关,而Shannon指数、Simpson指数与所测土壤理化性质之间无显著相关关系.各样地Jaccard相似性系数均0.4,样地间微型土壤动物群落结构差异明显.     

应用PCR技术检测病人血液标本中斑点热群立克次体DNA

本文以聚合酶链反应（PCR）,采用二次扩增法直接检测蜱传斑点热病人血液标本中斑点热群立克次体DNA,结果从7份标本中检出阳性1份,进一步的限制性片段多态性分析证明和斑点热群黑龙江立克次体基因型相同。实验证明：黑龙江立克次体对人具有致病性,同时也证明PCR技术快速、简单、敏感,用于斑点热群立克次体的早期诊断是可行的,并可作出分型鉴定。     

北方寒带地区透明颤菌理化特性的研究

目的为了研究透明颤菌在微生物发酵工业生产中的应用,对东北寒带地区透明颤菌的理化特性进行研究。方法透明颤菌的分离采用培养基(PYA)富集培养与形态观察的方法,采用分光光度计、光扫描与CO差示光谱确定透明颤菌的生理生化性质。结果研究分离的透明颤菌在蛋白胨0.4%,酵母0.6%,NaAc 0.02%,pH7.8,34℃,150 r/min时可获得较大生长速率,NaAc浓度为1%,pH7.5-8.0时菌体生长最快。透明颤菌在稳定期血红素含量约为每克湿菌中11 nmol,样品在5000 r/min离心后出现血红蛋白的吸收峰。结论分离培养出寒带地区生长的透明颤菌,并确定了其理化性质,为在发酵工业生产中应用透明颤菌奠定了参考依据。     

琅琊山国家森林公园蝶类多样性

报道了安徽滁州市琅琊山国家森林公园蝶类多样性的研究结果,共采集了蝴蝶4454只,隶属8科、40属、57种。应用Margalef物种丰富度模型及Shannon-Wiener生物多样性指数分析了该地蝶类物种的丰富度及多样性。蝴蝶物种丰富度由大到小为森林林地(7.2747)>山缘农田(5.3499)>裸岩(3.3008),物种多样性指数由大到小为森林林地(3.3081)>裸岩(2.4628)>山缘农田(2.0009);结果表明琅琊山蝶类物种较为丰富,多样性指数说明琅琊山的生态环境良好。     

甘薯链霉菌中潜在纤维素酶增效蛋白基因克隆、表达及产物活性检测

近些年来发现有些非纤维素酶组分的蛋白能协同纤维素酶系水解纤维素,大大提高纤维素酶的酶解效率,这些蛋白统称为增效蛋白。增效蛋白的发现为木质纤维素的水解提供了新的思路。本研究根据NCBI上甘薯链霉菌中潜在纤维素酶增效蛋白基因(登录号WP_009327266)设计相关引物,从甘薯链霉菌c DNA中扩增出潜在目的基因,命名为Sip1,并构建重组质粒Sip1-p ET-32a(+)转入大肠杆菌,得到重组菌Sip1-p ET32a(+)-E.coli BL21和Sip1-p ET32a(+)-E.coli Rosetta(DE3)。表达的粗蛋白产物具32.3%纤维素酶增效活性。     

C型利钠利尿肽（CNP）——一种新的心血管活性物质

新发现的Ｃ型利钠利尿肽（ＣＮＰ）是心房利钠利尿肽（ＡＮＰ）家族中的一员,由内皮细胞产生,和血管平滑肌细胞ＡＮＰＲ－Ｂ受体结合,使外周静脉扩张和回心血量减少,导致心脏充盈压和心输出量降低,这是降压的主要机理,该肽无利钠利尿作用。ＣＮＰ的作用机制与ｃＧＭＰ（第二信使）没有关系。心衰时,血管对ＣＮＰ的反应性不变。因此,ＣＮＰ在来源、作用部位、作用特点、作用机制及病理状态下的反应性等与熟知的ＡＮＰ均有显著不同。     

心室肌Cl~－通道电流的性质及其意义

近年来,在豚鼠、兔心室肌上发现了一种由β－肾上腺素能激活的Ｃｌ~－电流（Ｉ＿Ｃｌ）。此种Ｉ＿Ｃｌ的主要特点为：外向整流性质,时间不依赖性,对细胞外Ｎａ~＋变化敏感,Ｃｌ~－通道的活动受细胞内ｃＡＭＰ依赖性蛋白激酶Ａ的调节。Ｉ＿（Ｃｌ）的发现不仅证明心肌上有Ｃｌ~－通道,而且近来研究表明,Ｉ＿（Ｃｌ）在调节心肌动作电位时程和静息电位方面起主要作用。研究结果还提示Ｉ＿（Ｃｌ）可能与病理状态下某些心律失常的发生有关。     

黑龙江立克次体的血清学及分子生物学研究

本文应用血清学方法和分子生物学技术,从不同角度探讨与比较ＳＦＧ立克次体种间的差异,为黑龙江立克次体的分类鉴定提供依据。ｍｉｃｒｏ—ＩＦ、ＩＥ及ｍｉｃｒｏ－ＢＡＰＳ试验表明,黑龙江立克次体的血清反应模式和国际参考株及国内分离株不同,具有独特的抗原结构。进一步应用ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和免疫印迹分析,该立克次体结构多肽的数量与分子量和其它立克次体有明显差别,并具有两种特有的主要抗原多肽（２１５ＫＤ与６６ＫＤ）,提示在抗原结构上的差异性。ＤＮＡ限制片段分析证明该立克次体的酶切图谱有明显的特征性,易与己知斑点热毒株相鉴别。研究结果表明,黑龙江立克次体可能是ＳＦＧ立克次体一新的血清型式种。对人的致病力需进一步研究。     

选择压法分离鼠伤寒沙门氏菌抗萘啶酮酸突变株（NaA－R）

本实验采用选择压法以不同水平（１０－１２０μｇ／ｍｌ）的萘啶酮酸液体和固体培养基从鼠伤寒沙门氏菌野株中选择出一株抗萘啶酮酸的抗药菌株,并对其应用作了初步尝试。