利用环介导恒温扩增法快速检测溶组织梭菌

目的:利用环介导恒温扩增技术(LAMP),设计快速检测溶组织梭菌的方法,研究其反应特性,以期能应用于气性坏疽溶组织梭菌感染的临床现场检验.方法:通过基因比对与引物设计,设计针对溶组织梭菌的环介导恒温扩增检测方法.然后检测该方法对溶组织梭菌及其他干扰菌的扩增情况,对其特异性进行评价.检测该方法对不同浓度溶组织梭菌的扩增情况,对其灵敏度进行评价.最后与全自动细菌培养法进行比较,评价其与常规检测方法的可比性.结果:本LAMP检测方法只针对溶组织梭菌有扩增,对其他15种菌不扩增,显示出良好的特异性.对溶组织梭菌的最低检测限为1× 101CFU/ml,显示其灵敏度较高.与全自动细菌培养法相比,有良好的可比性(P＜0.05),很高的灵敏度(92.6％)、特异性(98.1％)及准确度(97.3％).结论:本试验设计出了针对溶组织梭菌的LAMP检测方法,该LAMP检测方法具有良好的特异性较高的灵敏度,能够用于溶组织梭菌的临床现场检验.     

六磨汤加减治疗老年中风后遗症患者便秘的疗效观察

目的观察六磨汤加减治疗老年中风后遗症患者便秘的临床疗效。方法对62例老年中风后遗症便秘患者采用六磨汤加减辨证论治,并分析其疗效。结果显效38例,有效22例,无效2例,总有效率96.8%。结论六磨汤加减治疗老年中风后遗症患者便秘的疗效好。     

吸入噻托溴铵治疗慢性阻塞性肺疾病的疗效研究

目的：观察噻托溴铵粉吸入剂治疗稳定期慢性阻塞性肺疾病的有效性及安全性。方法：对2010年1月一2010年12月在本院就诊的60例稳定期COPD患者随机分成两组,对照组接受口服茶碱缓释片治疗,治疗组接受噻托溴铵粉吸入剂治疗。结果：治疗组与对照组治疗后28天FEV1改善率相互比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;治疗组与对照组治疗后（d28）以及随访期（疗后第3个月、第6个月）圣·乔治呼吸疾病问卷调查比较,总评分差异均有统计学意义（P〈0．05）;治疗组与对照组治疗后（d28）的6MwT,差异有统计学意义（P〈0．05）;两组患者随访期AECOPD发病次数,有统计学差异（P〈0．05）;两组患者的不良反应相互比较,无统计学意义（P〉0．05）。结论：噻托溴铵粉吸入剂治疗慢性阻塞性肺疾病（COPD）疗效确切和可靠,值得临床推广。     

南沙群岛珊瑚礁浮游动物多样性与群落结构

珊瑚礁是地球上已知的海洋生物多样性最高的生态系统,为了深入分析珊瑚礁的浮游动物多样性和群落结构,2004年5月5-15日在南沙群岛渚碧礁布设10个大面站(漏湖、礁坪各5个)和1个连续站(位于礁坪),使用网目孔径分别为169 μm和505 μm的两种浮游生物网进行垂直拖网采样.结果表明:共鉴定浮游动物种类96种和幼虫17个类群(或类型),其中桡足类最多,达65种,其次是幼虫;浮游动物数量丰富-根据169 μm网具样品的数据,平均丰度高达926.0±1,155.8 inds./m3,优势类群依次是桡足类、被囊类和幼虫,优势种为奥氏胸刺水蚤(Centropages orsinii)、珍妮纺锤水蚤(Acartia shuzheni)、长尾住囊虫(Oikopleura longicauda)、梭形住囊虫(O.fusifornis)和腹足类面盘幼虫(Gastropoda veliger);渚碧礁浮游动物空间分布差异相当显著,漏湖区形成与礁坪区不同的群落,前者种类多、丰度高、优势种突出、均匀度低,而后者则完全相反,浮游动物群落的空间变化是由珊瑚礁礁盘的空间异质性所造成.浮游动物昼夜变化明显,夜间出现的种数和平均丰度分别是日间的4.6和46.2倍.浮游动物群落以终生浮游生物的种类和数量占多数,它们来源于礁外海水,有的也属于礁栖类型.在珊瑚礁中,中小型浮游动物无论在种类还是丰度方面都占有非常重要的位置.     

雪被和土壤水分对典型半干旱草原土壤冻融过程中CO_2和N_2O排放的影响

土壤冻融期间的温室气体排放量会显著增加,并在全年总排放量中占有重要的份额。但目前开展的土壤冻融循环模拟实验大多是在土壤冻结之前调节土壤水分含量,而忽视了雪被在整个土壤冻融过程中的作用,因此导致室内模拟研究的结果与野外原位观测的结果差异较大。为探索开展室内模拟土壤冻融实验的优化方案,采用人工浇水和覆雪两种方式调节土壤水分含量,研究了雪被和土壤水分对内蒙古典型半干旱草原土壤冻融过程中CO2和N2O排放的影响。结果表明,浇水和覆雪两种处理对冻融循环过程中土壤CO2排放影响的差异不显著,CO2排放量在消融期都会明显增加并随着冻融循环次数的增加而逐渐减小。当土壤孔隙含水率达50%左右时,浇水处理中的N2O排放量在第1次土壤冻融循环中最高并随冻融循环次数增加而降低,但在覆雪处理中,N2O在第1次冻融循环中的排放较小,而在后两次冻融循环中的排放量更为显著。造成两种处理N2O排放规律出现显著不同的原因可能是土壤剖面水分动态变化过程和微生物性状等方面的差异。土壤冻融过程中CO2和N2O排放量随土壤含水量升高而增加,但N2O在土壤含水量较低时排放不明显,这表明可能只有当土壤含水量达到一定阈值时,冻融作用才会对N2O的排放产生显著影响。这些结果显示,雪被和土壤水分显著影响土壤冻融过程中的CO2和N2O排放,室内模拟土壤冻融实验应进一步优化。     

海南北部普通野生稻育性相关性状调查与分析

调查和分析了海南北部普通野生稻40个居群的柱头颜色、柱头外露率、花粉育性、自交结实率和自然结实率。结果发现,海南北部普通野生稻柱头颜色分为褐色、紫色、白色、紫白双色、褐白双色5类。柱头总外露率均在60%以上,平均总外露率82.4%,其中有28个居群总外露率在80%以上,最高总外露率达96.7%。花粉可育率平均为25.6%,可育率在40%以上的居群占总居群的22.5%,可育率最高达91.4%。自然结实率在3.0%~53.1%之间;自交结实率在0~46.8%之间,有4个居群的花粉可育率和自交结实率均为0;自然结实率最高的单株达98.6%。这些结果对海南野生稻进一步研究和利用提供了重要依据。     

藏羊肖氏隐孢子虫的分离鉴定

为了解隐孢子虫在藏羊中的感染情况,采用饱和蔗糖漂浮法检查34份藏羊新鲜粪便。通过巢式PCR扩增阳性分离株的18S rRNA、HSP70和CpA135位点基因,并采用限制性内切酶Ssp I和Vsp I对18S rRNA产物进行酶切分析。同时构建系统发育树,分析藏羊感染隐孢子虫类别。结果显示仅1只藏羊感染隐孢子虫,18S rRNA与Cryptosporidium xiaoi山羊分离株(GU553016)相似率为99.9%;HSP70与C.xiaoi绵羊分离株(FJ896041)相似率为98.7%;CpA135与C.ubiquitum人源分离株(HM358023)相似率为99.3%。18S rRNA产物经Ssp I酶切后获得3条条带493 bp、262 bp和103 bp,经Vsp I酶切后获得3条条带508 bp、181 bp和104 bp,与C.bovis酶切条带相似。基于18S rRNA和HSP70的系统发育分析显示,该分离株与C.xiaoi亲缘性最近。这是首次在藏羊体内发现肖氏隐孢子虫。     

基于PCR检测探究人乳头状瘤病毒在NIP发病中的作用及其与预后关系

基于PCR检测法探究人乳头状瘤病毒在鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤（NIP）发病中的作用及其与预后关系。选取2010年9月至2016年9月期间本院病理科存档的110例石蜡包埋块NIP病理标本作为NIP标本组,临床分期分为T1期4例,T2期12例,T3期38例,T4期56例,病理分化分为低分化20例,中分化56例,高分化34例。选取30例健康志愿者粘膜组织作为对照组,观察NIP和对照组标本的HPV感染率、HPV分型、不同临床分期和病理分化下NIP中的HPV感染率、影响NIP复发的影响因素以及NIP复发情况与HPV阳性、临床分期及病理分化程度的相关性。NIP标本中总检出阳性率为70.91%,对照组标本检测阳性率为0.00%(P<0.05);高危亚型有62.82%(49/78)例,低危亚型有44.87%(35/78)例,高危型例数显著高于低危型（P<0.05）;对不同临床分期和病例分化与HPV阳性进行卡方线性趋势检验,结果显示：不同临床分期和病理分化与HPV阳性有相关性（P<0.05）,进一步分解出线性回归分量有统计学意义（P<0.05）;Logistic单因素分析3年内NI...     

饥饿及复投喂对金钱鱼肠型脂肪酸结合蛋白基因表达的影响

为阐明肠型脂肪酸结合蛋白基因(ifabp)在金钱鱼(Scatophagus argus)脂肪代谢中的作用, 从金钱鱼肝脏转录组中得到ifabp的unigene片段, 设计特异引物克隆了金钱鱼2种亚型ifabp基因(ssifabp2a和ssifabp2b), 并分析了这2种基因在雌、雄鱼中的组织分布以及饥饿及复投喂后肝脏和肠道中的表达变化。聚类结果表明, ssifabp2a与其他硬骨鱼类Ifabp2a、Ifabp或IfabpX1聚为一类, ssifabp2b则与其他鱼类的Ifabp2b或Ifabp-like聚为一类。同源性比较发现, ssifabp2a与其他硬骨鱼类Ifabp2a、Ifabp或IfabpX1的同源性为78.8%—87.9%; ssifabp2b与其他硬骨鱼类Ifabp2b或Ifabp-like的同源性为79.5%—87.9%; ssifabp2a与ssifabp2b的同源性为73.5%。RT-PCR发现: 在雄鱼中, ssifabp2a在小肠中表达最强, 在肾和肝脏等表达较弱; ssifabp2b也在小肠中表达最强, 在肝脏、胃和下丘脑等较弱。在雌鱼中, ssifabp2a在胃中表达最强, 在肾、肝脏和下丘脑组织表达较弱, 在其他组织中有微弱表达, 脑垂体中没有检测到表达。与ssifabp2a表达情况不同, ssifabp2b在下丘脑、卵巢、心脏、肠中表达较强, 其他组织中有微弱表达, 鳃中没有检测到表达。饥饿及复投喂结果表明: 在肠中, 饥饿2d后, ssifabp2a表达量显著降低, ssifabp2b无显著性变化; 饥饿7d后, ssifabp2a表达量显著下降, 但ssifabp2b无显著性变化; 在复投喂后, 与7d饥饿相比较, ssifabp2a和ssifabp2b的表达量均显著升高。在肝脏中, 饥饿2d后, ssifabp2a表达量无显著变化, 而ssifabp2b的表达量显著升高; 饥饿7d后, ssifabp2a和ssifabp2b的表达量均显著升高; 在复投喂后, ssifabp2a和ssifabp2b表达均显著下降, 恢复到正常水平。结果表明, 饥饿及复投喂对金钱鱼肝脏和肠道中的ssifabp2a和ssifabp2b的表达具有显著影响, 表明两者都参与了金钱鱼的脂肪代谢调节。     

刮痧配合双黄连口服液治疗小儿早期感冒发热的临床疗效观察

目的探讨刮痧油刮痧配合双黄连口服液治疗小儿早期感冒发热的临床疗效。方法选择门急诊小儿早期感冒发热患儿50例,按就诊先后顺序随机分为观察组和对照组各25例,对照组采用橄榄油做介质刮痧配合双黄连口服液治疗,观察组采用刮痧油做介质刮痧配合双黄连口服液治疗,比较两组治疗效果、起效时间。结果观察组总有效率为96%,平均起效时间(1.68±0.54)天;对照组总有效率为64%,平均起效时间(2.72±0.83)天,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论应用刮痧油做介质刮痧配合双黄连口服液治疗小儿早期感冒发热的起效时间快,临床疗效满意,无明显不良反应,值得临床推广应用。