大鼠海马CA1区锥体细胞的急性分离和鉴定

目的：建立一种适用膜片钳技术的大鼠海马ＣＡ１区锥体细胞的急性分离方法,并对其进行鉴定。方法：采用酶加机械分离法制备７～１０ｄ鼠龄的大鼠海马ＣＡ１区锥体细胞,用免疫荧光技术鉴定神经元,其电生理学特性测定用全细胞膜片钳技术。结果：分离的锥体细胞是海马ＣＡ１区锥体细胞,且具有正常的电生理学特性,并保存了某些主要的电压依赖性和受体依赖性离子通道特性。结论：成功地建立了一种简单、快速、高产的适用于膜片钳技术的大鼠海马ＣＡ１区锥体细胞的急性分离方法。     

利用启动子缺陷型打靶载体敲除牛胎儿成纤维细胞中的Prnp

利用启动子捕获对中靶细胞进行富集是提高体细胞基因打靶效率常用的策略之一.敲除动物的Prnp可使其具有抵抗Prion病感染的能力.采用启动子捕获策略,构建了牛Prnp启动子缺陷型打靶载体BoPrneo,线性化后,再通过电穿孔转染牛胎儿成纤维细胞BFF,用250 μg/mLG418进行药物筛选,共得到99个药物抗性细胞克隆.对细胞克隆进行PCR、测序及Southern blotting鉴定,结果表明,其中的4个细胞克隆为中靶细胞,说明牛胎儿成纤维细胞中的Prnp一条等位基因被成功敲除.本研究为牛Prnp的敲除提供了一种简单、安全、有效的方法.     

塞来昔布联合survivin反义寡核苷酸对胰腺癌荷瘤裸鼠的治疗作用

目的:探讨环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布和survivin反义寡核苷酸(ASODN)联合作用对胰腺癌荷瘤裸鼠的治疗作用。方法:构建胰腺癌荷瘤裸鼠模型,将成瘤裸鼠随机分为4组:对照组、塞来昔布组(给予1000ppm的塞来昔布饮水)、survivin ASODN组(瘤内注射40μg/200μL的survivin ASODN)、联合组(给予1000ppm的塞来昔布饮水的同时瘤内注射40μg/200μL的survivin ASODN);观测裸鼠肿瘤生长情况并测量不同时间的体积变化,于接种肿瘤的35天处死裸鼠,测瘤体质量,应用cas- pase-3试剂盒检测caspase-3活性,免疫组织化学法检测肿瘤增殖指数(PI)和微血管密度(MVD)。结果:治疗组平均体积均明显低于对照组(491.97±4.62mm~3,427.34±14.62mm~3,300.39±6.59mm~3 vs 703.56±12.51 mm~3,P<0.01),其中联合治疗组体积明显低于塞来昔布组或survivin ASODN组(P<0.01);平均抑瘤率分别为32.26%、50.86%、62.07%。治疗组caspase-3相对活性明显高于对照组(0.026±0.003、0.040±0.018、0.059±0.005 vs 0.006±0.001,P<0.01),其中联合治疗组caspase-3相对活性明显高于塞来昔布组(P<0.01)或survivin ASODN组(P<0.05);治疗组平均PI和MVD均明显低于对照组(P<0.01,或P<0.05),其中联合治疗组平均PI和MVD明显低于塞来昔布组或survivin ASODN组(P<0.01,或P<0.05)。结论:COX-2抑制剂塞来昔布和survivin ASODN联合应用可显著抑制荷胰腺癌裸鼠的肿瘤生长,其作用机制可能是通过共同提高caspase-3活性来诱导细胞凋亡,通过抑制肿瘤细胞的增殖和新生血管的形成来发挥抗肿瘤效应,为胰腺癌的治疗提供了新的思路。     

基于CRISPR的快速灵敏便捷分子检测

快速灵敏检测技术对疾病防控必不可少。特别是新冠疫情暴发以来,人们深刻认识到快速灵敏检测技术的重要性。近年来,以CRISPR/Cas为代表的基因编辑技术带来了生物技术革命性的进步。CRISPR的核酸检测技术因其快速、准确、灵敏、经济等特点,正在引发分子诊断革新,并已被成功应用于传染病、遗传病、肿瘤基因突变诊断,以及食品安全等领域。本文归纳了基于CRISPR的多种核酸检测体系及应用,并对未来CRISPR核酸检测发展趋势及结合人工智能的智能化检测进行了展望。     

激光诱导杨树单性生殖的研究Ⅵ．子房愈伤组织的无性繁殖系及其分化培养

试验已获得用Ｈｅ－Ｎｅ激光诱导美洲黑杨“Ｉ６９”杨子房愈伤组织的无性繁殖系“ｃｌｏｎｅ１４”,经细胞学分析,证明它是起源于雌配子体的母系单倍体。经过两年来的继代培养,其愈伤组织的品质已越来越趋于纯化,用它的次生愈伤组织,在适合的分化培养基上,芽分化率由原来的２０％提高到５５％以上,而且切取分化根,进行芽分化培养,也能长芽。     

最长的飞翼

一对巨翼展开了,滑翔而去。这对翅膀扩展时(连同躯体)竟长达十五米半! 人们惊奇地问:这是什么动物的飞翼? 原来,这是在美国得克萨斯州大湾公园内晚白垩世(距今约七千万年)地层中采集到的翼龙的翅膀。从1971—1974年陆续发现了三个个体。最初发现这些化石的时候,发现者劳森以为它们是一些陆生动物的遗骸。把它们修理复原之后才认出它们是一种翼龙。这是迄今为止世界上最大的飞行动物:它张开翅膀可以跨越两辆大卡车,而且还绰绰有余,许多飞机的     

我国淡水水母的分布

淡水水母为W.Sowerby于1880年6月9日在英国伦敦Regent公园皇家植物园一温室内种植王莲(Victoria regia)的水池中首次发现,标本经E.R.Lankester研究,订名为Craspedacusta sowerbyi,于同年发表。自此以后,淡水水母才在世界一些国家陆续发现,主要是在欧洲、亚洲及美洲等温带地区,大洋洲也有发现。1907年日本川井正方在我国湖北宜昌附近长江沿岸采得淡水水母标本,为日本学者丘浅次郎研究,当时误订为一新种Limnocodium kawaii,于1922年改为一变种L.sowerbyi var.kawaii,后被订正为Craspedacusta sowerbyi var.kawaii。这是我国淡水水母的首…     

河蚌的晶杆

背角无齿蚌(Anodonta woodiana)一般称河蚌或菜蚌.生活在湖泊、池塘、河流、沟渠的水底淤泥内.在我国分布很广泛,是一种习见的淡水蚌类. 背角无齿蚌的消化道内有一晶杆(crystallioe style)构造.有人认为在幽门盲囊(晶杆     

噬菌体展示的豆蔻酰转移酶抑制肽序列结构和功能研究

对一个具有很强的抑制豆蔻酰转移酶活性的抑制肽噬菌体所展示的随机区１５肽序列ＴＷＰＶＶＨＧＡＣＲＡＨＧＨＣ进行关键氨基酸残基的单点,双点和缺失等一系列突变研究,以确定其功能区段。结果显示;Ｗ２Ａ,Ｈ６Ｎ和Ｈ６Ｒ突变抑制活性明显下降,Ｐ３Ａ,Ｖ４Ｖ５→Ｖ４Ａ５双点突变对活性也有一定的影响,而Ｖ４Ｖ５→Ｗ４Ｗ５,Ｈ１２Ｎ,Ｈ１４Ｎ,Ｃ９Ｓ,Ｃ１５Ｓ,ΔＣ１５,ΔＨ１４Ｃ１５和Δ９－Ｃ１５等突变对则基本上     

发菜膜脂及其脂肪酸组成

对野生发菜(Nostocflagelliforme Bom.et Flab)的膜脂(主要成分为类囊体膜脂)及其脂肪酸组成进行了测定分析.发菜的膜脂由单半乳糖甘油二酯(MGDG)、双半乳糖甘油二酯(DGDG)、磷酯酰甘油(PG)和硫代异鼠李糖甘油二酯(SQDG)组成,其酯酰基连接有棕榈酸(16:0)、十六碳烯酸(16:1)、硬脂酸(18:0)、油酸(18:1)、亚油酸(18:2)和亚麻酸(18:3)6种脂肪酸.发菜的不饱和脂肪酸含量可达总脂的73%,特别是16:1和18:3分别高达29%和34%,远远高于已报道的其他蓝藻,说明了发菜类囊体膜具有较强的抗逆性特点.同时还对复水30 min和复水后生长24 h的发菜膜脂及其脂肪酸组成进行了分析.结果表明,复水对野生发菜的膜脂及其脂肪酸组成没有显著影响,说明发菜的膜脂和脂肪酸组成在干燥-吸水过程中能保持很高的稳定性.