我国17株绵羊肺炎支原体分子分型及其菌体蛋白免疫印迹

【目的】分别从基因和蛋白水平研究我国部分地区绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)分离株的分子特征,并了解其免疫原性蛋白的差异。【方法】对分离自8个地区的17株绵羊肺炎支原体进行扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)和十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium Dodecyl Sulphate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis,SDS-PAGE)分析,采用NTsys-2.10e软件对AFLP和SDS-PAGE结果进行聚类,并用绵羊肺炎支原体模式株Y98高免血清对部分分离株进行免疫印迹分析。【结果】当相似系数分别为0.78和0.85时,绵羊肺炎支原体分离株可根据8个来源地区分成8个AFLP群和8个SDS-PAGE群;用8株分离株进行免疫印迹共出现6条蛋白条带,分子质量分别为105 kDa、83 kDa、65 kDa、42 kDa、40 kDa或26 kDa,其中83 kDa和40 kDa蛋白为8个菌株保守的免疫原性蛋白。【结论】我国部分地区绵羊肺炎支原体分离株之间存在遗传差异,不同分离株的主要免疫原性蛋白也存在一定差异,但83 kDa和40 kDa蛋白为其保守的免疫原性蛋白。本研究首次对我国部分地区绵羊肺炎支原体分离株进行了分子分型与免疫印迹分析,结果将为绵羊肺炎支原体病的新型诊断技术开发和疫苗研制奠定理论基础。     

神经营养因子前体蛋白功能的研究进展

神经营养因子是一组在结构与功能上具有相关性的多肽性因子,它们通过前体蛋白的切割成为具有特定功能的成熟蛋白,为不同的神经细胞亚群提供营养支持,在中枢神经系统和周围神经系统的发育分化及病理生理中起着重要的作用.以前认为神经营养因子的前体不具有生理功能,最近的研究则表明,神经营养因子前体蛋白具有不同于神经营养因子的功能.研究发现,神经营养因子前体,至少神经生长因子和脑源性神经营养因子的前体大量存在于细胞外,它们通过与p75NTR和sortilin受体组成三聚体诱导神经细胞的凋亡.这一机制可能与神经发育时调节神经细胞的比例,神经损伤后神经细胞的死亡以及某些人类疾病的发生有密切联系.此外,神经营养因子前体还可能具有其他未知的新功能,对神经营养因子前体功能的深入研究将使人们对神经系统的发生、发育及神经系统疾病的发病机制有更加深入的了解,并有助于神经系统疾病新药物、新疗法的开发与研究.     

三个STR位点在哈萨克族中的遗传多态性

运用复合PCR扩增,6％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结合银染技术对我国新疆102位无关的哈萨克族个体进行D16S539,D7S820,D13S317的STR位点的调查,为建立新疆哈萨克族群体数据库提供资料。经统计学检验,3个位点的基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律,结果显示3个位点的期望杂合度为：0.9439、0.9356、0.9304,累积PIC＝0.9905,DP＝0.9998,PE=9572。紫外,比较新疆哈萨克族与其他4个人群的等位片段频率,发现除与北京汉族在D7S820位点上无统计学意义外（P＞0.05）,其他均可见显著性差异（P＜0.05）。同时,在8个家系42人的调查中无一突变发现且均按孟德尔遗传规律传递。3个STR位点的联合分析在法医学应用及群体遗传学中显示了较高的价值。     

医疗卫生统计在数字化医院环境下的应用与探讨

科学合理地开展医疗卫生统计工作,能为医院管理提供科学可靠的数据依据,医疗卫生统计工作从手工环境发展到数字化医院网络环境的过程中,为临床工作、医疗质量、医院管理提供了帮助,但也存在着统计方式落后、统计功能不全、缺少外部支持等不可回避的问题,随着市场经济的不断发展,在建立“以人为本”的新型医院管理模式中将不断凸显统计工作的重要意义。     

某三甲医院儿童和成年女性尿培养病原菌分布和耐药性分析

摘要 目的：了解尿路感染儿童和成年女性尿培养病原菌种类和耐药性的差异,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法：分别收集2018年1月~2019年12月期间在我院住院的尿路感染儿童的尿培养标本1618份和尿路感染成年女性的尿培养标本1044份,分析其病原菌的分布和耐药性。结果：1618份儿童尿培养标本中分离出267株病原菌,居首位的病原菌是屎肠球菌,占43.82%（117/267）;1044份成年女性尿培养标本中分离出139株病原菌,居首位的病原菌是粪肠球菌,占28.78%（40/139）。在两种人群尿培养病原菌中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌构成比均分别为第二位和第三位。儿童尿培养屎肠球菌对青霉素G、氨苄西林、环丙沙星等喹诺酮类药物的耐药率高于成年女性尿培养粪肠球菌,对克林霉素、奎奴普丁/达福普汀、四环素的耐药率低于成年女性尿培养粪肠球菌（P＜0.05）;未发现对高浓度庆大霉素、高浓度链霉素、利奈唑胺、万古霉素、替加环素耐药的肠球菌。儿童尿培养大肠埃希菌对氨苄西林/舒巴坦、头孢吡肟的耐药率均高于成年女性尿培养大肠埃希菌（P＜0.05）。儿童尿培养肺炎克雷伯菌对头孢哌酮/舒巴坦、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、氨曲南、厄他培南、亚胺培南、美洛培南、呋喃妥因、头孢唑啉等头孢菌素类药物的耐药率高于成年女性尿培养肺炎克雷伯菌（P＜0.05）。结论：尿路感染儿童和成年女性尿培养病原菌均以肠球菌为主,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌构成比分别为第二位和第三位,两种人群尿培养主要病原菌耐药性均有不同程度的差异,临床医生应根据尿培养和药敏结果合理用药。     

减毒沙门氏菌为载体在Vero细胞中表达传染性法氏囊病病毒多聚蛋白基因

用长距离RT-PCR扩增了传染性法氏囊病病毒（infectious bursal disease virus, IBDV）ZJ2000株多聚蛋白基因,定向克隆入真核表达载体Pci,电转化dam^-和phoP^－双突变的减毒鼠伤寒沙门氏菌ZJ111株,并直接转染Vero细胞。RT-PCR和间接免疫荧光试验可从Vero细胞中检测到阳性信号,SDS-PAGE和West blotting均可检测到41kD的蛋白条带。结果表明减毒沙门氏菌可将外源基因导入Vero细胞,并进行转录和表达,具有免疫反应性,为进一步研制减毒沙门氏菌为载体的IBDV口服DNA疫苗打下基础。     

OMgp LRR281～228：OMgp神经突起生长抑制功能的主要结构域

OMgp(oligodendrocyte-myelin glycoprotein)可以通过与MAG、nogo-66等神经再生抑制因子竞争结合同一受体NgR而诱使生长锥溃变和抑制神经突起的生长。以前的研究表明,在OMgp与NgR结合抑制神经突起生长的过程中,OMgp的亮氨酸富含重复序列(LRR)是必需的。为进一步了解OMgp LRR在神经突起生长中的作用及其结构与功能之间的关系,采用PCR-定点突变法对OMgp LRR结构域分段删除,表达了删除不同基因片段后的OMgp LRR蛋白,通过对表达有NgR的CHO细胞(NgR-CHO)的黏附实验和对原代培养神经细胞的抑制实验对其功能进行了研究。结果显示,分别删除了OMgp 25～56、57～133、134～180位氨基酸的OMgp LRR蛋白仍具有结合NgR-CHO和抑制原代培养的神经元突起生长的作用;而删除了第181～228位氨基酸的OMgp LRR蛋白则失去了对原代培养神经元的生长抑制作用,但仍然具有结合NgR的能力。表明OMgp181～228在OMgp的功能中具有重要的意义。删除了第181～228位氨基酸的OMgp LRR蛋白可望作为OMgp的竞争性抑制剂,用于中枢神经系统损伤后神经再生的治疗。     

苦豆子胰蛋白酶抑制剂的分离纯化及性质研究

通过胰蛋白酶偶联的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和柱,从苦豆子种子中分离纯化一种胰蛋白酶抑制剂（ＳＡＴＩ）。该抑制剂在１２％的ＳＤＳ－内烯酰胺胶电泳中显示单一蛋白带,是由一条Ｎ端为丙氨酸的多肽链组成,分子量为１８ｋＤ,等电点为９．３。结果还显示,抑制剂对胰蛋白酶的摩尔抑制比为１：２,用氨基酸修饰法,进一步证明其两个活性中心分别是精氨酸和赖氨酸的残基。抗棉蚜的饲喂试验结果表明,该抑制剂对棉蚜有较强的抗性,     

辅酶Ⅰ及其类似物的质子核磁共振研究

在5mM浓度下,测定了NAD~ 、εNAD~ 、NMN~ 、εAMP和(εAMP RMN~ )混合物的化学位移与pH依赖关系。根据环流各向异性屏蔽效应,通过比较εNAD~ 与等量混合物(εAMP NMN~ )的对应碱基质子化学位移,以及比较εNAD~ 与NAD~ 的烟酰胺质子化学位移,发现在水溶液中的游离NAD~ 以pK_a3.88为转折,处于不同构象:在pH3.88以下,NAD处于伸展构象;在此值以上,NAD~ 处于折迭构象。     

简易压力注射装置

管道灌注是研究形态学制作标本常用方法之一,通常都使用注射器注射。一般使用的注射器赖手力推进,其压力大小全凭注射者的经验而定,无客观标准可循,一些要求较高的注射常感困难;且注射量较大时,有多次抽取药液的麻烦。近年来进行研究、大量注射时,常利用压缩气体在一定压力下进行,但这种装置较复杂,材料购置不易。为了解决这一问题,我们曾设计了一种利用自来水压力的简易压力注射装置,用来注射肝脏标本,使用尚称便利。现介绍于后。