减数分裂实验关键技术的探讨

减数分裂实验是生物学最基本和最重要的实验之一,是大学生物、医、农等专业必做的实验。近年来,我们结合教学,对多种实验材料进行研究,获得较理想的效果,实验步骤可参考一般实验指导,下面对该实验的关键技术介绍如下。１取材方法对植物和动物而言,减数分裂只发生在...     

一种改进的乳酸脱氢酶同工酶染色法

以N-甲基吩嗪甲基硫酸盐（PMS）为介体,使乳酸脱氢酶（LDH）同工酶催化反应产生的NADH将铁氰化钾还原为亚铁氰化钾,利用亚铁氰化钾与三氯化铁反应生成普鲁士蓝的性质,实现对乳酸脱氢酶同工酶进行染色的目的.     

圆叶洋苋红色素稳定性研究

研究了温度、光照(可见光、紫外光)、酸碱溶液、维生素C、氧化剂(过氧化氢)、还原剂(亚硫酸钠)、防腐剂(苯甲酸钠)等对圆叶洋苋红色素稳定性的影响。结果表明,此色素是抗氧化还原、耐酸碱、耐糖、耐光热的天然色素,具有良好的开发价值。     

桉树LH22、U6无性系茎提取液对绿豆插条发根和种子萌发的影响

研究表明,难生根的尾叶桉×赤桉LH₂₂无性系茎的粗提液对绿豆插条发根率、不定根长度有极明显的抑制作用,而易生根的尾叶桉U₆无性系茎的粗提液却没有抑制作用。对这些茎粗提液进一步用有机溶剂萃取分离,各萃取相进行白菜种子萌发的生物测验,表明LH₂₂中的水相、乙醚相含有抑制种子萌发的物质,经Duncan's新复极差法分析抑制作用显著,而易生根的U₆中却无影响。水相、乙醚相分别再经硅胶柱层析技术分离纯化得到多种不同的成分,进行白菜种子萌发生物测验后,有数种成分有明显的抑制作用。因此说明,难生根的LH₂₂无性系茎内含有成分不同的生根抑制物质,而易生根的U₆无性系茎内几乎没有或含有少量这些生根抑制物质。     

2型糖尿病患者肝损伤标志物与下肢动脉病变的相关性分析

目的：探讨2型糖尿病患者肝损伤标志物水平与其下肢动脉病变的相关性,为2型糖尿病并发症的防治提供参考依据。方法：选取我院收治的2型糖尿病患者946例,根据下肢动脉内膜中层厚度分为以下3组,即无动脉硬化组（276例）、单纯性动脉硬化组（598例）和动脉硬化伴管腔狭窄或闭塞组（72例）。分析和比较三组之间肝损伤标志物谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、γ-谷氨酰转肽酶（GGT）水平的差异,及其与2型糖尿病患者下肢动脉硬化程度的相关性。结果：随着动脉硬化程度的加重,2型糖尿病患者的ALT水平逐渐升高,三组之间两两比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。动脉硬化伴管腔狭窄或闭塞组AST水平显著高于非动脉硬化组和单纯性下肢动脉硬化组,而动脉硬化组和非动脉硬化组之间AsT水平比较无显著差异（P〉0．05）。三组之间γ-谷氨酰转肽酶水平比较无显著性差异（P〉0．05）。Spearman等级相关分析显示ALT与糖尿病下肢动脉硬化的相关系数为0．30484。结论：2型糖尿病患者ALT水平与其下肢动脉硬化程度显著相关。     

丙烯酸酯-PEG400复合薄膜对胰岛素的体外控释研究

目的：在胰岛索非注射给药研究中,经皮给药系统凭借其独特的优势,已成为近年来医药领域的研发重点。控释膜的研究是经皮给药系统中一个重要组成部分,然而涉及胰岛素通过控释膜释放的研究报道不多。本实验室通过紫外光催化技术合成出一种丙烯酸酯-PEG复合薄膜作为胰岛素控释膜。本实验目的在于考察该复合薄膜在24小时内对胰岛素的体外控释作用,从而为胰岛素经皮给药制剂的基础研究作出贡献。方法：通过紫外光固化方法合成丙烯酸酯-PEG400复合薄膜,通过HPLC的方法考察丙烯酸酯-PEG400复合薄膜对不同浓度胰岛素溶液的控释作用,通过比较薄膜对不同浓度胰岛素溶液的累积渗透量及渗透速率等参数,研究薄膜对胰岛索的控释规律。结果：实验数据显示：丙烯酸酯-PEG复合薄膜对3．0mg／mL,6．0mg／mL,9．0mg／mL这三种不同浓度胰岛素控释曲线的相关因子分别为：0．9921,0．9950,0．9964。相关因子均大于0．99,表明该薄膜能很好的控制胰岛素溶液实现线性释放。经计算,薄膜对3．0mg／mL,6．0mg／mL,9．0mg／mL这三种浓度胰岛素的累积渗透量分别为：266．69μg／cm-2,343．65μg／cm-2,460．10μg／cm2。渗透速率分别为：9．24μg／cm-2·h-1,13．40μg／cm-2·h-1,19．04μg／cm-2·h-1。以上两组数据表明,薄膜对胰岛素的累积渗透量及渗透速率随胰岛素浓度的增加而增大。结论：通过实验结果我们可以看出,丙烯酸酯一PEG复合薄膜能控制不同浓度的胰岛素溶液以恒定速率释放,通过对比薄膜对各浓度胰岛素的累积渗透量及渗透速率等参数,发现该薄膜对胰岛素的释放速率受胰岛素浓度调节,具体表现为随胰岛素浓度的增加而增加。因此该薄膜不仅可以稳定控制胰岛素实现零级释放,而且可以通过调节胰岛素浓度实现调节胰岛素释放速率的目的。由此可以看出,该薄膜是一种理想的胰岛素控释膜。同时本实验作为胰岛素控释膜的基础研究,也为日后以该薄膜为控释膜的胰岛素经皮给药制剂的研发打下了坚实的基础。     

烟田中静电喷雾和电动喷雾下噻虫嗪的防效及对昆虫群落的影响

【目的】探明静电喷雾与电动喷雾对噻虫嗪防治害虫效果及烟田昆虫群落的影响,为静电喷雾在烟草上的推广应用提供理论依据。【方法】利用静电喷雾与电动喷雾法喷施0.66 g·L~(-1)25%噻虫嗪水分散粒剂,施药1、3、7 d后,测定2种方法对烟蚜与斜纹夜蛾的防治效果、在烟株与土壤中的沉积以及对昆虫群落的影响。【结果】喷施25%噻虫嗪水分散粒剂1、3、7 d后,静电喷雾对烟蚜和斜纹夜蛾的防治效果均显著高于电动喷雾的防治效果,且防治效果均随时间的推移而升高。噻虫嗪在静电喷雾处理区烟叶上的沉积量高于电动喷雾处理区烟叶上的沉积量,而在静电喷雾处理区土壤中的沉积量低于电动喷雾处理区土壤中的沉积量,且都随时间的推移而降低。静电喷雾与电动喷雾均引起烟田昆虫群落的变化,静电喷雾引起的害虫和中性昆虫的数量变化大于电动喷雾,但天敌昆虫的数量变化小于电动喷雾,且静电喷雾区烟田的物种丰富度明显高于电动喷雾区,可见静电喷雾施药对烟田昆虫群落的影响小于电动喷雾施药。静电喷雾的S_t/S_i与S_n/S_p比值明显高于电动喷雾,说明静电喷雾烟田中昆虫群落稳定性高于电动喷雾烟田中昆虫群落的稳定性。【结论】相比电动喷雾,静电喷雾能够提高噻虫嗪在烟叶上的沉积量,从而提高噻虫嗪对害虫的防治效果,同时减少噻虫嗪在土壤中的沉积量,提高噻虫嗪的生态安全性,因此,静电喷雾在烟草病虫害防治上具有较好的应用前景。     

α-烯醇化酶基因干扰表达对籽鹅卵泡颗粒细胞增殖及凋亡的影响*

目的: 研究α-烯醇化酶(ENO1)基因干扰表达对籽鹅卵泡颗粒细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法: 原代培养籽鹅F1级卵泡颗粒细胞(复合培养),将ENO1基因干扰表达重组质粒转染至籽鹅卵泡颗粒细胞。实验分为四组:ENO1干扰表达组(RNAi)、无关序列干扰组(NC)、培养液组(Control)、转染试剂组(Lip)。流式细胞术检测干扰组和对照各组的凋亡率、细胞周期时相性。结果: ENO1基因干扰表达使籽鹅卵泡颗粒细胞增殖速度变慢,凋亡率增加,G2/M期颗粒细胞比例增高。结论: ENO1基因干扰表达可使籽鹅卵泡颗粒细胞周期发生G2/M期阻滞,诱导细胞发生凋亡,抑制细胞增殖。     

超声波对猪胰脂肪酶催化活性影响的机理研究

猪胰脂肪酶(porcine pancreas Lipase,PPL)反应系统经适宜参数的超声波处理,催化活性提高了11.22%～24.42%。PPL经超声波处理后,其动力学参数Km和Vmax都变小,酶分子的紫外吸收光谱不变,荧光发射光谱不变。而酶分子经超声波处理后,其紫外差示光谱出现了明显的正峰或负峰。探讨了超声波影响PPL活性的作用机理。