三酶级联催化L-苏氨酸生产L-2-氨基丁酸

L-2-氨基丁酸(L-ABA)是一种重要的化工原材料和手性医药中间体,为了实现L-ABA的高效生产,本研究在大肠杆菌EscherichiacoliBL21(DE3)中分别表达大肠杆菌来源的苏氨酸脱氨酶(Threonine deaminase,TD)、苏云金芽孢杆菌来源的亮氨酸脱氢酶(Leucine dehydrogenase,LDH)和博伊丁假丝酵母来源的甲酸脱氢酶(Formatedehydrogenase,FDH),构建体外级联酶催化反应实现L-苏氨酸向L-ABA的转化,体系中TD、LDH和FDH添加最适比例为1∶1∶0.2。为了简化生产工艺,将3种酶在一株菌E. coli 3FT+L中共表达并实现上述配比,在30 L发酵罐中用E. coli 3FT+L全细胞转化12 h,L-ABA的产量为68.5 g/L,底物L-苏氨酸的摩尔转化率达到99.0%。该工艺路线绿色高效,为未来大规模生产L-ABA提供借鉴。     

交联生长激素对家兔生长的影响

在猪、牛、羊和兔,每天注射30～200μg生长激素/kg体重,一般可促进动物生长约10～20%.然而,由于生长激素价格较高,在实际生产中也不可能每日注射,因此要通过生长内分泌调节途径来促进家畜生长,还需研究其它可在生产中应用的方法.     

湖北药用辛夷一新种

辛夷是辛温解表传统常用中药,有着两干多年的使用历史和大量文献记载。其商品来源于木兰科木兰属(Magnolia)多种植物的花蕾。其味辛性温,具散风寒、通鼻窍等功能,用于鼻炎、鼻窦炎、风寒头痛等症。作者在收集辛夷商品中,发现远安产辛夷不同于《中华人民共和国药典(1985年版)》及其他文献所载的辛夷商品。     

金丝猴生齿序和年龄关系的研究

灵长类中根据牙齿的萌出情况和换齿序来确定年龄的研究国内较少。曾中兴等1965在“猕猴精巢发育的研究”中顺带谈到换齿序和年龄的关系,1980年又在“猕猴乳齿的发育”文章中提到乳齿发育与年龄关系。国外研究较多,如赫尔曼(Hurme)、詹姆斯(James)等,对猕猴的出齿序和年龄关系均有论述。肯尼(Kenney),又将前几位学者的工作进行了综述并有所推进。金丝猴(Rhinopithecus roxellanae)的出齿序和年龄的关系,则尚未见有报道。本文目的就是根据我国珍稀动物金丝猴的资料(牙齿:     

兴安落叶松林火干扰后土壤有机碳含量变化

在大兴安岭兴安落叶松林区,选择不同恢复年限各种火烧强度(重度、中度、轻度)的火烧迹地进行调查并采集土壤样品,对火后有机层和矿质层有机碳含量变化进行研究,以期为进一步开展森林火灾对区域碳平衡影响的定量评估提供科学依据。研究结果表明:火干扰对土壤有机碳含量变化的影响包括火烧即时影响和火后生境条件变化带来的间接影响。火干扰样地有机层的积累与转化主要是通过火后林冠郁闭度的变化影响的,其有机碳总储量低于对照样地。对于矿质层土壤,重度和中度火干扰后,如果样地发生植被序列演替,即阔叶林植被入侵,样地郁闭度增加迅速,凋落物积累量增大,土壤有机碳含量将随着过火年限的增加而增加;如果样地发生自我更新,样地郁闭度增加缓慢,凋落物分解量大于积累量,土壤有机碳含量将会在一定时间内随着过火年限的增加而减少;但是,无论样地发生植被序列演替还是自我更新,土壤有机碳含量短时间内均无法恢复到火前水平。轻度火干扰后,土壤有机碳含量短期内先增加,随着植被更新情况的发展最终趋于平衡。     

献血员巨细胞病毒感染的研究

用ＰＣＲ法和ＤＮＡ杂交法检测同一献血员的白细胞及血清中的ＨＣＭＶ－ＤＮＡ,并用ＥＬＩＳＡ法检测血清中的ＨＣＭＶ－ＩｇＭ、ＩｇＧ（测四个不度）,连续两年共检测白细胞和血清样本各２００人份。ＰＣＲ法检测白细胞中的ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性率分别为６３％和７０％,ＤＮＡ杂交法检测的阳性率为４２％和５０％。ＰＣＲ法检测血清中的ＨＣＭＶ－ＤＮＡ的阳性率为４９％和５３％,ＤＮＡ杂交法检测的阳性率为３３％和３９％。Ｈ     

粉红粘帚霉化学成分的研究

粉红粘帚霉对名贵药用植物金线莲有明显的促进作用,为了从物质角度探讨其可能的促生机理,对该菌的化学成分进行了初步研究,从该菌的菌丝体中共分离到5个化合物,通过结构解析,确定它们是：化合物1,6,22－二烯－3－羟基－5,8－过氧麦角甾,2,麦角甾醇;3,阿拉伯糖醇;4,甘露醇,另外一个化俣物的结构正在鉴定中。     

不同利用方式对红壤坡地微生物多样性和硝化势的影响

采集了中国科学院桃源农业生态试验站红壤坡地农田、自然恢复林和茶园土壤样品,采用末端限制性酶切片段长度多态性分析(T.RFLP)技术分析土壤细菌、古菌、氨氧化细菌(AOB)和氨氧化古菌(AOA)的多样性,采用好气培养法测定不同土壤的硝化势,研究不同土地利用方式对微生物多样性和硝化势的影响.结果表明:土壤AOB和AOA多样性指数差异不显著,且在3种不同土地利用方式中呈现相同的趋势,均为农田=茶园>自然恢复林;通过RDA分析发现,不同利用方式造成土壤理化性状的改变是影响土壤AOA和AOB群落结构的主要原因;好气培养法测得不同土壤硝化势农田最高,茶园次之而自然恢复林最低;相关性分析显示,硝化势与细菌16S rRNA、AOA和AOB amoA基因多样性指数呈显著正相关,其中与AOA amoA基因关系最为密切;总体来说,红壤坡地不同利用方式改变了土壤细菌、古菌、AOA和AOB的多样性,土壤AOB和AOA积极参与了土壤的硝化过程,且AOA在氨氧化微生物群落生态功能中占有重要地位,AOA比AOB与硝化势的关系更为密切.     

抗人P185^erbB2的scFv—Fc融合蛋白的表达及免疫功能分析

为提高鼠源单抗用于体内治疗的效应功能及降低人抗鼠抗体反应 ,将编码抗人P185 erbB2 单抗轻、重链可变区 (VL、VH)融合构建的单链抗体 (scFv)基因片段与人IgG1的Fc区基因片段融合构建了scFv Fc融合基因 ,并将其克隆到哺乳动物细胞表达载体pCIDN中。用重组载体转染CHO细胞 ,通过G4 18筛选获得稳定高表达克隆。更换无血清培养基培养 ,经重组蛋白质A亲和层析柱纯化scFv Fc融合蛋白。融合蛋白质在还原SDS PAGE中表现为5 2kD的条带 ;与SK BR 3细胞裂解液共培育可特异性地沉淀出P185 erbB2 蛋白 ;FACS分析表明融合蛋白质识别P185 erbB2 蛋白的胞外段 ;ELISA测定融合蛋白质对细胞表面抗原P185 erbB2 的亲和常数为 7.5× 10 -10 (mol/L) -1。构建scFv Fc融合基因 ,将其克隆到表达载体 ,进一步稳定表达抗P185 erbB2 的scFv Fc融合蛋白 ,为进一步的体外、体内研究鼠源单抗治疗效果创造了条件。     

全髋关节置换术中直接前入路与后外侧入路的疗效比较及对假体位置和血清疼痛介质的影响

摘要 目的：对比全髋关节置换术（THA）中直接前入路（DAA）与后外侧入路（PLA）的疗效,并分析两种入路方式对假体位置和血清疼痛介质的影响。方法：选取2019年3月-2021年7月我院收治的80例THA患者,据入路方式的不同将患者分为PLA组37例和DAA组43例,对比两组手术相关指标、髋关节功能评分、疼痛评分、影像学指标、步态参数、血清疼痛介质水平、并发症发生率。结果：DAA组的切口长度、术后下地时间短于PLA组,手术时间长于PLA组,术后引流量、术中出血量少于PLA组（P<0.05）。两组术后3个月、术后6个月Harris髋关节功能评分均升高,视觉疼痛模拟评分法（VAS）评分均下降（P<0.05）;DAA组术后3个月、术后6个月Harris 髋关节功能评分高于PLA组,VAS评分低于PLA组（P<0.05）。DAA组臼杯位于安全区的比例高于PLA组（P<0.05）;两组髋臼外展角、髋臼前倾角、股骨假体居中率组间对比无差异（P>0.05）。DAA组的单腿支撑时间长于PLA组,步频大于PLA组,Foot off高于PLA组（P<0.05）。两组术后7 d 5-羟色胺（5-HT）、一氧化氮（NO）、前列腺素E₂（PGE₂）水平均较术前升高（P<0.05）;DAA组术后7 d的5-HT、PGE₂、NO水平低于PLA组（P<0.05）。两组术后并发症发生率对比无差异（P>0.05）。结论：THA患者采用DAA的入路方式,除手术时间较长外,其在手术切口、术中损伤、髋关节功能恢复、步态参数、减轻术后疼痛、臼杯位于安全区的比例等方面均优于PLA,且不会增加并发症发生率。