空间诱变创造高粱新种质研究

1996年,利用我国发射的返回式科学实验卫星搭载高粱恢复系唐恢28(TR28)干种子,回收后田间种植,对诱变后代的遗传变异进行相关研究,并进行生物化学和分子生物学技术验证,探索灰色理论对变异后代选择的有效性.结果表明:高粱空间诱变处理可获得丰富的变异类型,变异向有利和不利两个方向发展,通过选择可获得符合需要的各种变异类型.除黄化苗、不结实、结实后不出苗外,其他变异类型是可遗传的,并且其变异后代的稳定时间比常规杂交后代可提早2～3个世代.生物化学和分子生物学证实诱变选系之间及其与对照之间存在着遗传差异.获得了优质、高产、抗病性表现突出的高粱新种质.灰色理论应用于变异后代选择可提高育种效率.     

他克莫司软膏联合氯雷他定片治疗特应性皮炎的临床疗效及机制研究

目的:研究他克莫司软膏联合氯雷他定片治疗特应性皮炎患者的临床疗效及可能机制。方法:选取2014年9月至2016年7月于我院就诊的特应性皮炎患者共计82例纳入研究,所有患者随机分成观察组(n=41)和对照组(n=41)。对照组患者采取氯雷他定片治疗,观察组患者在此基础上应用他克莫司软膏治疗。观察并比较两组患者的临床治疗效果、SCORAD评分情况、复发情况以及血清白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-3(IL-13)、干扰素(IFN-γ)及白细胞介素-7(IL-17)水平的变化和不良反应的发生情况。结果:观察组患者治疗后的临床总有效率明显高于对照组(P0.05)。两组患者皮损严重程度、皮肤病变范围、瘙痒和睡眠程度的评分以及总积分较治疗前明显下降,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后血清IL-4、IL-13以及IL-17水平均较治疗前显著下降,且观察组低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);两组患者治疗后血清IFN-γ较治疗前明显升高,且观察组高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。观察组复发率显著低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:他克莫司软膏联合氯雷他定片治疗特应性皮炎能够有效提高其临床疗效,可能与其降低血清IL-4、IL-13、IL-17水平及提高IFN-γ水平,进而改善患者的免疫功能有。     

应用CRISPR/Cas9系统构建MTHFD1基因敲除的HEK-293细胞系

目的:利用成簇的、规律间隔的短回文重复序列/Cas9核酸酶(CRISPR/Cas9)基因编辑技术构建亚甲基四氢叶酸脱氢酶1(methylenetetrahydrofolate dehydrogenase 1, MTHFD1))基因敲除人胚肾(HEK-293)稳定细胞系。方法:利用在线软件筛选出评分最高的3条针对MTHFD1基因的单向导RNA (sg RNA),然后合成sg RNA序列并将其插入到含有GFP标签的质粒中;重组质粒转染HEK-293细胞后通过流式细胞仪分选出已被转入sg RNA的单细胞,通过测序确认单克隆细胞系中MTHFD1的DNA序列突变状态;最后应用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(real-time quantitative Polymerase Chain Reaction, RT-q PCR)和蛋白质印迹(Western blot)方法检测单克隆细胞中MTHFD1的m RNA和蛋白表达水平。结果:重组载体中含有正确的sg RNA序列;测序结果显示该细胞系中MTHFD1基因发生了单个碱基插入突变和6个碱基的缺失突变;RT-qPCR结果显示单克隆细胞系中MTHFD1在m RNA水平显著降低;Western blot检测成功构建MTHFD1蛋白缺失的HEK-293细胞。结论:本研究利用CRISPR/Cas9技术成功构建的MTHFD1敲除HEK-293细胞系。     

西藏三种苔藓栖生纤毛虫的形态和系统发育分析

本研究利用活体观察和蛋白银染色方法对采自西藏日喀则和那曲的3种苔藓栖生纤毛虫,鬃异源棘尾虫(Tetmemena pustulata)、棘毛虫未定种(Sterkiella sp.)和殖口虫未定种(Gonostomum sp.)进行了形态学研究,描述了活体、核器以及纤毛图式等形态学特征.同时,测定了这3种纤毛虫的SSU r...     

毕赤酵母基因操作技术的改进及其在水蛭素表达中的应用

毕赤酵母是日益受到重视的基因工程受体菌,但是目前尚没有一种简便、高效的转化方法,也没有一种稳定、可靠的菌落PCR方法。本文通过在通常筛选重组子的MD培养基中增添1mol/L山梨糖醇使毕赤酵母电穿孔转化效率提高10倍以上。并比较系统地分析了其他影响电穿孔转化效率的因素,如毕赤酵母生长状况即OD600,不同的整合位点(BglⅡ,SacⅠ,SalⅠ,StuⅠ),及不同的毕赤酵母受体菌(GS115和KM71)等。本文描述的转化方法所能达到的转化效率比目前大多数文献报道的效率要高,可使每微克质粒DNA产生的整合到受体菌染色体上的转化子述2800个;另外,我们经过一种冷热处理毕赤酵母菌落的方法使其细胞壁裂解,并改变通常PCR缓冲液的组成成分后,毕赤酵母菌落PCR方法几乎和大肠杆菌的操作一样简便可靠。借助本文所描述的电穿孔转化方法和菌落PCR方法,成功实现了水蛭素在毕赤酵母中的分泌表达,表达量为每毫升培养上清20μg,其生物活性达每毫升培养上清82个国际单位。     

蒙古冰草表型数量性状的变异与生境间的相关性

采用多因变量线性模型方差、变异系数、主成分分析及UPGMA聚类分析的数量统计方法,对来自内蒙古中东部地区的6个天然居群和2个栽培品种(品系)的花序10个数量性状进行了分析。结果表明,蒙古冰草在花序各部的表型性状上存在有居群内及居群间的差异,同时,天然居群的变异程度大于栽培品种,而且居群间的分化与生态环境因子有着密切的相关。     

微生物共培养在新活性化合物挖掘中的研究进展

微生物次级代谢产物结构新颖、活性多样,一直以来都是药物及其先导化合物的重要来源。但近年来在普通微生物纯培养中发现的新活性物质不断减少,重复发现逐渐增加;而微生物共培养因更加接近微生物生长的自然环境,在药物及其先导物挖掘方面发挥着越来越重要的作用。本文分析了近5年来利用真菌vs真菌、真菌vs细菌共培养挖掘新活性化合物的研究现状,以及研究中存在的问题。     

西藏色季拉山急尖长苞冷杉种群点格局分析

基于4 hm2色季拉山长期监测样地调查资料,采用成对相关函数点格局方法,分析西藏色季拉山冷杉林群落优势种急尖长苞冷杉种群活立木不同生长阶段和不同大小死亡木的空间格局及它们之间的空间关联性.结果表明:急尖长苞冷杉种群活立木径级分布连续,呈倒“J”型,为增长型种群.小树在小尺度(0～7 m)上呈显著聚集分布,随着龄级和研究尺度的增加,冷杉种群聚集强度逐渐减弱,最终趋向于均匀或随机分布格局.小树与大树、中树与大树在小尺度(0～35和0～30 m)上呈负关联,在大尺度(45～100和80～100 m)上呈正关联,且个体间龄级相差越大,其关联性越强.冷杉死亡所释放的空间不足以影响大树对小树的距离制约,大径级死亡木与小树在小尺度(0～34和5～27 m)上具有负关联性,在大尺度(49～100和73～100 m)上具有正关联性.自疏作用和Janzen-Connell假说中的距离制约效应可能是色季拉山急尖长苞冷杉种群空间格局形成的重要原因.     

幽门螺杆菌感染Beagle犬动物模型的建立

人白细胞介素 10 (IL 10 )是一种免疫调节细胞因子 ,生物学活性广泛 ,包括免疫抑制、抗炎及免疫调节特性。动物试验及临床试验表明 :重组人IL 10 (Tenovil)在治疗自身免疫疾病如炎性肠炎、类风湿性关节炎、克隆病、银屑病、器官移植以及治疗丙型肝炎患者的肝纤维化方面有一定的疗效。我们将hIL 10基因重组到酵母表达载体pPIC9K中 ,酶切鉴定和测序正确后通过电穿孔转化毕赤酵母 ,涂布MD选择性平板 ,挑取生长快速的大菌落进一步用G4 18筛选多拷贝表达盒的酵母转化子。抗高浓度G4 18的酵母转化子用甲醇诱导表达 ,酵母培养上清液经SDS P…     

多年生能源禾草的产能和生态效益

多年生禾草作为能源植物具有许多优良特性,特别是具有很高的生物质产量和多方面的生态功能,可以通过燃烧、气化和液化等方式进行能源生产.自从20世纪80年代中期以来,欧美等国对多年生能源禾草的兴趣就不断增加,并从中选取了柳枝稷(Panicum virgatum L.)、芒(Miscanthus spp.)、草(Phalaris arundinacea L.)和芦竹(Arundo donax L.)等4类根茎型禾草加以重点突破,以求达到快速应用和示范的目的.综述了这4类能源禾草在欧美国家的研发现状,介绍了它们的一般生物学和生态学特征及产能效益,重点强调了其在土壤和水体污染治理、土壤理化特性改良、CO2气体减排和促进生物多样性改善等方面的生态效益.进而认为,只有根据中国的土地资源国情,在非农业用土地上发展非粮能源植物,才是我国生物质能产业的真正出路.