牛巴氏杆菌病多重PCR检测技术的建立与应用

【背景】牛巴氏杆菌病是由血清型(A、B、E)多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)引起的一种严重危害养牛业的重要传染病,病原学聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)方法是诊断并防控该病的有效手段。【目的】建立检测血清型(A、B、E)多杀性巴氏杆菌的多重PCR方法,为临床诊断牛巴氏杆菌病和病原分型提供技术支撑。【方法】参考多杀性巴氏杆菌hyaD-hyaC基因、bcbD基因和ecbJ基因特异区域,设计3对特异性引物,以温度梯度PCR法确定适宜退火温度(T_m);采用棋盘试验优化引物浓度并初步建立多重PCR方法;采用重组质粒标准品及阳性菌株菌液确定其敏感性(最小检测量);以8种常见牛感染病原体[溶血性曼氏杆菌(Mannheimia hemolytica)C1655、大肠埃希氏菌(Escherichia coli)C237、产单核细胞李氏杆菌(Listeria monocytogenes)C1597、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)C3053、都柏林沙门氏菌(Salmonella dublin)C79351、副结核分枝杆菌(Mycobacterium paratuberculosis)C1625、牛传染性鼻气管炎病毒(bovine infectious rhinotracheitis virus)CAV1546和牛支原体分离株(Mycoplasma bovis)C65-1]核酸样本确定其特异性;制备3批诊断试剂,对敏感性和特异性样品进行批间和批内试验,确定其重复性;运用建立的方法使用3种不同型号的PCR仪检测敏感性和特异性样品,确定其适用性;通过检测临床样本及人工模拟感染样本评价临床应用效果。【结果】在T_m为55℃时,3对引物浓度分别为0.25、0.30和0.20μmol/L条件下建立多重PCR方法较优,可以同时检测多杀性巴氏杆菌血清A型(821bp)、血清B型(203bp)和血清E型(363bp);该方法敏感性高,对重组质粒标准品pMD-A、pMD-B和pMD-E检测限分别为43.080、3.710和4.350copies/μL,对阳性菌液最低检出限均为10²CFU细菌;其特异性强,仅对血清型(A、B、E)多杀性巴氏杆菌有特异性扩增条带,同时对其他病原体均无扩增条带;该方法重复性良好,批间与批内试验均一致;临床样本及人工模拟感染样本检测结果显示与病原分离鉴定符合率为100%。【结论】成功建立了一种可鉴定不同血清型的牛多杀性巴氏杆菌多重PCR检测方法。     

观赏植物种质资源的超低温保存

概述了观赏植物种质资源超低温保存的研究进展。     

长白山高山苔原带雪斑地段牛皮杜鹃群落的土壤氮矿化与净初级生产力

采用土壤温度连续观测和土壤原位培养,研究了长白山高山苔原带雪斑地段牛皮杜鹃群落的土壤温度、土壤氮矿化及净初级生产力.结果表明: 在非生长季的积雪期(10月下旬-5月上旬),土壤养分呈上升趋势,土壤以氮矿化为主,为翌年植物的生长提供了充足的氮素.其中雪斑地段土壤(平均温度-3.0 ℃)的氮矿化能力更强,速效氮增加量为3.88 g·m^-2,非雪斑地段(平均温度-7.5 ℃)为1.21 g·m^-2. 在生长季节(5月中旬-8月下旬),土壤氮素含量下降,以固持为主;秋季植物停止生长后,土壤速效氮又呈上升趋势;到冬季,由于积雪的作用,雪斑地段土壤温度维持在0 ℃左右或略低,促进了土壤氮的矿化,而非雪斑地段土壤温度则处于冻结状态.氮素矿化能力的差异是雪斑地段牛皮杜鹃群落净初级生产力高于非雪斑地段群落的主要原因,也是植被空间分异的重要驱动因子.     

内蒙古西部地区蒙古族、汉族4项人类群体遗传学特征的研究

从1998~2001年调查了内蒙古自治区鄂尔多斯市、锡林郭勒盟、巴彦淖尔盟的蒙古族、汉族6个群体的拇指类型、环食指长、指甲类型、足趾长等4项人类群体遗传学指标,共获有效资料2760例。研究表明：（1）6个群体的直型拇指出现率均在60％以上,且均无性别间明显差异;（2）6个群体环指长率均远高于食指长率,有4个群体存在性别间显著差异;（3）各群体均表现出长型指甲最多、方型次之、扁型最少;（4）6个群体均多为拇趾长型,且各群体均无性别间显著差异;（5）4项指标之间无明显相关关系。 Abstract:From 1998 to 2001,a sample of 2760 Mongol and Han individuals was investigated in 3 areas (Eerduosi city,Xilinguole and Bayannaoer leagues) from Inner Mongolia.Each individual was studied on 4 genetic characters (thumb type,palmar digital formular,fingernail type and plantar digital formular).The result is as follows:(1) The frequencies of the straight thumb were over 60%,and there were no significant sexual differences in all of 6 groups.(2) The frequencies of the ring-finger-longer were much higher in 6 groups,and there were significant sexual differences in 4 groups.(3) The frequencies of the long-shaped fingernail were the highest in all groups,the squat-shaped were the lowest.(4) The big toes were longer than the second toes in most people of 6 groups,but without significant sexual differences in each groups.(5) There were no significant correlations between 4 characters.     

经桡动脉心导管术诊断和治疗冠状动脉疾病的临床研究

目的:观察经桡动脉介入诊治冠心病的安全性和有效性。方法:对1503例患者进行了经桡动脉途径介入诊治,其中包括心绞痛患者1218例,心梗患者268例,二尖瓣和/或动脉瓣手术前对冠状动脉进行解剖学评估17例,观察患者手术安全性、成功率以及与经桡动脉手术相关的并发症发病率。结果:介入治疗成功率为93.1%(1400/1503),手术失败的主要原因为桡动脉穿刺失败(39例),严重桡动脉痉挛(42例),右锁骨下动脉不同程度的弯曲(18例),近端严重狭窄(14例)。术后有14例患者出现严重并发症(瞬时缺血性病变),60例出现有症状的窦性心动过缓,43例出现静脉血栓,77例出现血肿,88例出现桡动脉梗阻。结论:经桡动脉途径是一种安全、有效、患者更容易接受的冠心病介入诊治方法。     

6种北京常见草本植物燃烧性分析与评价

地表层植被是影响绿地火灾蔓延的关键因子之一。为探究北京常用地表层草本植物的燃烧性,助力绿地生态防护功能的提升建设与管理,本研究以涝峪薹草、青绿薹草、山麦冬、马蔺、鸢尾、野牛草为对象,在重点防火期对叶片燃点、燃烧时间、热释放速率等燃烧特性指标,叶片含水率和粗脂肪含量等理化指标,叶片厚度、单位载量等生物学特性指标进行测定,采用基于主成分分析法的熵权法和K-mean聚类分析对其燃烧性进行综合评价。结果表明：叶片厚度和燃点所占权重最高,对综合燃烧性的影响最大;热释放速率峰值和点燃时间权重最低,对综合燃烧性的影响最小。6种草本植物的燃烧性由强至弱依次为：野牛草>青绿薹草>山麦冬>涝峪薹草>马蔺>鸢尾。燃烧性聚类分析表明,野牛草、青绿薹草和山麦冬的燃烧性为Ⅰ级,燃烧性最强;涝峪薹草的燃烧性为Ⅱ级;马蔺和鸢尾的燃烧性为Ⅲ级,燃烧性最差。作为用量极大的野牛草、青绿薹草和山麦冬,在冬春季的防火需要引起重视。     

不同土壤水分条件下丹参耗水特征与水分利用率的研究

~~不同土壤水分条件下丹参耗水特征与水分利用率的研究@高扬$中国科学院、水利部水土保持研究所!陕西杨陵712100 @梁宗锁$中国科学院、水利部水土保持研究所!陕西杨陵712100;西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨陵712100 @刘燕$陕西省药品监督管理局!西安710061~~~~[1] LIN J (林佳),XU L ZH(徐丽珍),LI Y(李琰), YANG SH L(杨世林). Comparison of tanshinone Ⅱ A content in the radix of Salvia miltiorrhiza Bge. from different producing area[J]. China Journal of Chinese Materia Medica(中国中药杂志), 2002.…     

丹皮酚对马铃薯块茎蛾雌虫产卵选择及幼虫的忌避作用研究

为探讨丹皮酚对马铃薯块茎蛾Phthorimaea operculella(Zeller)行为的影响,采用室内生物测定法,研究了丹皮酚对马铃薯块茎蛾雌虫产卵选择及初孵幼虫、老熟幼虫的忌避作用.结果表明,丹皮酚对马铃薯块茎蛾雌虫产卵、初孵幼虫、老熟幼虫均有显著忌避作用:选择性产卵实验中,5 mg/mL丹皮酚溶液的忌避指数为...     

长白山主要针叶树种胸径和树高变异系数与竞争因子的关系

选取长白山地区8个皆伐标准地的1139株标准木,利用变异系数(CV)分析了云杉、冷杉和红松3个主要针叶树种的胸径和树高随龄阶、树高随径阶的变化.结果表明：在研究地区,3个主要针叶树种树高随径阶的变异相对较小,胸径和树高随龄阶的变异较大,胸径随龄阶的变异系数最大.在天然林中,传统的以径阶为自变量的树高曲线能较好地反映实际生长,以龄阶为自变量的胸径和树高生长模型对实际生长程度的反映较差.竞争是引起树高和胸径变动的主要因子.若将竞争因子添加到传统的生长方程和树高曲线中,可以大幅度提高模型的精度.