利用两种不相容质粒在大肠杆菌中共表达DFF45和DFF40

DNA断裂因子（DNA fragmentation factor,DFF）是细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白质之一,它由分子量为45kD和40kD的两个亚基构成,分别称为DFF45和DFF40。利用RT－PCR技术从人宫颈癌细胞系HeLa的总RNA中扩增了DFF45和DFF40的cDNA,分别克隆到到卡那霉素抗性表达载体pET-28a( )中,构建了pET28a-DFF45和pET28a-DFF40。用它们单独转化大肠杆菌BL21（DE3）后,经IPTG诱导都可获得高效表达。表达的重组蛋白质各自约占菌体总蛋白质的56％和22％。再将DFF45的cDNA克隆到氨苄青霉素抗性表达载体pET-21a( )中,得到了pET21a-DFF45。利用二者的不同抗性,将pET28a-DFF40和pET21a-DFF45共同转化大肠杆菌BL21（DE3）,工程菌经IPTG诱导后实现了DFF45和DFF40的共表达,表达产物各约占菌体总蛋白质的30％和17％。为了研究这两种不相容质粒在细菌中共存的稳定性,我们将共转化子在同时含有卡那霉素和氨苄青霉素的液体培养基中连续培养14h,发现此时仍有75％以上的细菌可同时耐受两种抗生素,即同时含有pET28a-DFF45和pET28a-DFF40,说明利用两个具有不同抗性的不相容载体进行蛋白质共表达的方法是可行的。     

昆虫界的“四不象”——一新建“螳Xiu目”昆虫简介

该文对2002年5月建立的昆虫新目－螳Xiu目Mantophasmatodea作了简单介绍,并建议了该目之中名。该目是昆虫纲中最小的目,目前已知2属3种,分布于非洲。     

雷公藤倍半萜生物碱的研究（Ⅳ）

从雷公藤（Tripterygium uilfordii Hook.f.）的根皮中分离到两个倍半萜生物碱Ⅰ和Ⅱ,根据理化性质和波谱数据特别是2D－NMR技术(^1H-^1H COSY、^1H－^13C COSY、NOESY、COLOC）数据分析,鉴定Ⅰ为wilforine,Ⅱ为一新的生物碱－－雷公藤植碱(wilfordsuine）。     

固氮酶铬铁蛋白的晶体生长

在合适的结晶条件下 ,从含Cr无氨培养基中生长的固氮菌 (AzotobactervinelandiiLipmann)突变种UW3 中纯化出的CrFe蛋白可从溶液中析出深棕色斜四棱柱晶体 ,晶体最大的两条对角线长度分别可达 0 .2 5mm和 0 .12mm。PEG 80 0 0、MgCl2 、NaCl、Tris和Hepes缓冲液的浓度及结晶方法等对该蛋白的出晶率、晶核数目、晶体大小和质量都有明显影响。CrFe蛋白结晶所需的上述化合物的最适浓度与在Mn中生长的固氮菌突变种UW3 的MnFe蛋白和缺失nifZ固氮菌突变种的ΔnifZMoFe蛋白结晶所需的最适浓度有所不同。结果表明 ,该蛋白晶体可能为CrFe蛋白的晶体     

微孢子虫核糖体小亚单位RNA（ssurRNA）基因

微孢子虫是广泛分布于自然界的细胞内原虫类寄生虫,它们可寄生于整个生物界。微孢子虫是真核生物,但其核糖体及核糖体RNA（rRNA）为原核生物型。为探讨9种家蚕病原性微孢子虫的种地位及亲缘关系,对已广泛用于生物进化分类的核糖体小亚单位RNA（ssurRNA)基因进行了研究。由微孢子虫ssurRNA基因序列同源笥分析所构建的系统进货发育树及Southern杂交分析表明,这9种微孢子虫同为Nosema属,为同属不同种。     

上海市医院预约诊疗服务实施效果分析

?????? 目的 对上海市医院预约诊疗服务的实施效果进行分析,为今后预约诊疗服务工作的推进提供参考依据。方法 通过现场问卷、专家小组访谈、数据采集等方式,了解预约诊疗服务实施效果。结果 预约诊疗服务的信息系统、服务系统、管理系统和评价系统逐渐完善,并在预约诊疗服务的实施过程中发挥出巨大作用。结论 预约就医模式已经逐步被患者所接受,其能有效减少患者就医中的无效等候时间,缓解目前存在“看病难”、医疗资源分配不合理等问题,但无法从根本上解决医疗资源稀缺、供求关系不均等的问题。     

上海市老年慢性病患者住院问题研究

随着上海市老龄化的加剧,老年慢性病患者的住院问题日益引起社会关注。在对上海市几家典型二、三级医院慢性病患者住院情况调查的基础上,分析了老年慢性病患者住院的主要特点,并对上海市慢性病患者床位需求量进行了初步估算,为上海医改和医疗资源整合提供决策依据。     

综合医院变频工作制实施的条件和策略

实施变频工作制管理模式,就可以根据就诊病人的规律合理安排医疗资源。但变频工作制的实施仍然需要相应的配套条件,采取合适的策略,才能真正发挥作用。对综合医院变频工作制管理模式实施的条件和策略进行了探讨,提出了变频工作制实施的能力、动力、压力“三力”条件和若干策略。     

社会工作理念与医患冲突调解机制的建立

社会工作作为一种综合性专业性的助人活动,其理念应用于医疗实践能以专业的价值观和科学的方法,通过提供各种辅导和服务,协助患者及其家属与医方进行有效的沟通,促使医疗技术和服务更人性化地满足患者的需要,从而构建和谐的医患关系。在此过程中,社会工作者针对医患关系发展的不同阶段,分别拓展出不同的工作策略,扮演不同的服务角色。     

医师定期考核制度操作流程的再设计

针对目前医师定期考核制度操作流程中的8种缺陷,提出制度操作流程改造的策略,并明确流程改造后应该建立《执业医师专业守则》,接轨继续医学教育制度,完善医师重新注册制度。