果蝇心脏发育标记基因Hand多克隆抗体的制备

制备果蝇心脏标记基因Hand抗体对研究果蝇心脏发育具有重要意义。从果蝇体内提取出总RNA,反转录得到果蝇的cDNA,将其作为模板PCR得到Hand基因部分片段,将片段连接到pET-28a上,构建重组质粒pET一28a—Hand,将重组质粒转化rosetta受体菌,IPTG诱导表达,表达产物经镍柱纯化,SDS—PAGE电泳分析,结果表明Hand基因在大肠杆菌中成功表达,表达的Hand融合蛋白分子量大约为24kD,经镍柱纯化后获得了高纯度可溶性的Hand蛋白。     

重叠PCR 法构建XLRS1 三种不同类型突变体

目的:构建X连锁视网膜劈裂(XLRS)三种不同类型突变体(点突变、缺失突变、插入突变),以便进一步构建不同类型的突变细胞模型。方法:根据NCBI gene数据库中XLRS1基因的CDS设计三对不同类型的引物,使用重叠PCR法获得突变片段,然后克隆入载体pLJM1-EGFP。结果:经测序验证,成功构建了三种不同类型突变体。结论:使用重叠PCR法构建三种不同类型突变体,为进一步研究XLRS1不同类型突变的致病机制奠定了基础。     

通过同源重组构建酿酒酵母新型表达质粒

利用同源重组的方法, 构建了具有高拷贝数和高稳定性的新型酿酒酵母表达质粒. 对酵母附加体型载体pHC11进行一系列改造, 得到质粒pHC11R, 并用适当的酶切线性化; 利用PCR反应得到人IFNα2b表达单元片段, 它的两端和线性化的pHC11R的两端具有50 bp左右的同源区段. 上述两个片段共转化酿酒酵母, 在酵母体内经同源重组后得到表达质粒pHC11R-IFNα2b, 该表达质粒与 pHC11-IFNα2b相比去除了质粒上用于在大肠杆菌中复制和筛选所需的序列, 在宿主菌中的稳定性和拷贝数均有明显提高, 同时外源基因的表达量也获得了一定程度的提高. 在此基础上, 进一步构建了带有不同表达元件的pHR系列载体, 使得外源基因能够通过同源重组在酿酒酵母中快速、方便地克隆和表达.     

乳杆菌生态消毒剂杀菌效果的试验观察

目的:在实验室对以乳杆菌发酵液为主要成分的乳杆菌生态消毒剂进行杀灭微生物效果观察.方法:采用定量杀菌法试验、稳定性试验、皮肤刺激性试验和阴道黏膜刺激性试验方法进行.结果:以该剂原液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌作用10 min,杀灭率均达91.67%以上;对德氏乳杆菌和干酪乳杆菌作用10 min,杀灭率分别是25.15%和55.77%.本消毒剂于54℃条件下放置14 d,杀菌效果无明显变化,对皮肤无刺激性,对阴道为轻度刺激性.结论:伊清爽乳杆菌阴道生态消毒剂具有杀灭和抑制有害菌,扶植乳酸菌的作用,是新一代保健型阴道卫生用品.     

在水产养殖中作为生物防治因素的益生菌制剂（节译）

水产养殖 (鱼、甲壳动物、软体动物、藻类植物 )是发展最为迅速的行业之一 ,其产量在 1984～ 1995年间 ,每年以近10 %的速度增长 ,与之相比 ,畜牧业和捕捞业的产量每年仅以 3%和 1.6 %的速度增长 (Rana,K.J.1997)。疾病的爆发抑制了水产养殖产量的增长和水产贸易的发展 ,甚至影响了一些国家水产行业的发展。如在虾类养殖业中 ,疾病已成为产量增加的限制因素。到目前为止 ,应用常规办法 ,如使用消毒剂和抗菌剂对预防和治疗水产疾病的效果并不理想 ,并且在水产养殖业中也存在着类似在人类用药和农业中抗菌剂过量使用问题 ,这已经引起人们的…     

细菌性阴道的病因与治疗的研究进展

细菌性阴道病 ( Bacterial Vaginosis,BV)是妇科的常见病、多发病。它是由于阴道内微生态平衡失调 ,厌氧菌和阴道加德菌过盛生长 ,兼性厌氧性乳杆菌受抑制所引起的一种无阴道粘膜炎症性表现的综合征。患细菌性阴道病时 ,阴道内乳杆菌的数量比用药前低 1 0 0 0倍以上或完全消失。应用抗生素治疗 ,虽然可使 BV的症状得到暂时缓解 ,但也进一步地杀死本已少得可怜的乳杆菌 ,加重阴道微生态失调的程度 ,从而使 BV反复复发。由于 BV的主要病理生理改变是阴道菌群失调 ,因此恢复患者阴道微生态平衡 ,保持阴道的正常微生态环境的生态制剂 ,成为…     

土壤侵蚀预报模型中的植被覆盖与管理因子研究进展

植被覆盖和土地管理措施是土支离破碎中侵蚀的主要抑制因素之一,通用土壤流失方程（USLE）中的植被覆盖与田间管理因子（C）是评价这种抑制作用的有效指标,并被广泛采用和深入研究。我国在这方面的研究还不能满足土壤侵蚀预报和水土保持规划的要求,在系统回顾该因子的研究历史的基础上,介绍了USLE和RUSLE中C因子估计方法及其不断改进和完善的过程,并概述了中国的覆盖与田间管理因子的研究进展。此外,总结国内在（C）因子估计值以及植被覆盖度,地面覆盖物和植被根系对土壤侵蚀的影响等方面研究成果,分析了目前我国覆盖与田间管理因子研究中存在的3个方面问题,并提出了前景展望。     

水稻种子萌发期间谷氨酰胺合成酶和NADH-谷氨酸合酶的变化

测定了水稻种子不同萌发时期胚乳、胚芽鞘和幼根的谷氨酰胺合成酶（GS）和依赖于NADH的谷氨酸合酶（NADH－GOGAT）活性变化。胚乳和胚芽鞘的GS活性在萌发过程中升高,幼根的GS活性则有所降低。NADH－GOGAT的活性变化趋势与GS相同。Native-PAGE活性染色表明,在萌发阶段的水稻种子胚乳和幼根里,始终只观察到一种GS活性带。但是,在水稻种子萌发3d后,在胚芽鞘中除继续检测到GS1的活性外,还可以观察到GS2的活性。蛋白质印迹显示,水稻种子胚乳中的GS（GSe)和GS1和GSra一样是一种胞质型GS。实验结果提示,这些不同组织中的GS与NADH－GOGAT构成的循环途径也许是水稻种子萌发时氨同化的主要途径。     

幽门螺杆菌感染的微生态治疗

幽门螺杆菌 (H elicobacter pylori,H.pylori)是慢性胃炎、消化性溃疡的主要致病因素 ,也是胃癌的主要诱发因子 ,世界卫生组织已将其列为 类致癌物质 [1 ] 。有效地治疗和根除 H.pylori感染已成为人们关注的焦点。治疗 H.pylori的方案很多 ,目前多采用抗生素多联疗法 ,但细菌抗药性的出现导致 H.pylori根除率降低 ,并可能造成菌失调、霉菌感染 ,甚至发生肝功能异常性改变。 Adamasson等 [2 ] 报道了几例使用抗生素治疗 H.pylori导致的菌群失调 :口腔内出现抗药性链球菌和葡萄球菌 ;胃粘膜中细菌数增加 ,且出现抗药性共生菌 ;肠道内微生…     

大肠埃希菌性阴道感染小鼠模型的建立

目的 :建立大肠埃希菌定植的阴道感染小鼠模型。方法 :在阿莫西林溶液 (12 5mg/ml)冲洗小鼠阴道冲洗处理下 ,将致病性大肠埃希菌接种到小鼠阴道内。结果 :各组小鼠阴道冲洗液检出的平均对数值比较 ,经过阿莫西林溶液小鼠阴道冲洗处理后再接种大肠埃希菌的阿莫西林 +大肠埃希菌组 ,阴道内定植的大肠埃希菌数量 (8 18± 1 0 9)较经过生理盐水小鼠阴道冲洗处理后再接种大肠埃希菌组 (5 72± 0 6 8)明显增多 (P <0 0 5 ) ,而且小鼠阴道感染的症状明显 (P <0 0 5 )。结论 :通过抗生素处理后 ,再在小鼠阴道内接种大肠埃希菌 ,大肠埃希菌能够在小鼠阴道内得到定植 ,即建立起大肠埃希菌性阴道感染的小鼠模型。