菊粉酶基因的异源表达、分离纯化及酶学性质

为进一步提高菊粉酶在生物技术领域的应用,研究了来源于马克斯克鲁维酵母Kluyveromyces marxianus YX01的菊粉酶性质。通过在毕赤酵母GS115宿主细胞中异源表达该菊粉酶基因(inu),获得了一种外切型菊粉酶,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)验证其分子量为86.0 k Da。进一步在该菊粉酶上增加6个His标签,采用聚乙二醇(PEG)20 000透析浓缩和Ni-NTA Agarose静态亲和吸附作用的方法,完成菊粉酶的分离纯化,纯化倍数和酶回收率分别为3.6和33.1%。比较发现粗酶液与纯酶的酶学性质相似,且菊粉酶的最适反应温度为60℃,最适p H值为4.62,并测得该酶的Km和Vmax值,以菊粉为底物时,Km和Vmax值分别为80.53 g/L和4.49 g/(L·min);以蔗糖底物时,Km和Vmax值分别为183.10 g/L和20.20 g/(L·min)。金属离子Mn2+、Ca2+、Cu2+、Zn2+和Fe2+对酶活力具有不同程度的抑制作用,其中Cu2+、Zn2+和Fe2+的抑制作用最为显著。这些研究为进一步提高菊粉酶在工业化的应用奠定了基础。     

褐家鼠种群生态的

1984年3月至1985年10月,我们到福建省古田、周宁二县,对农村和城镇褐家鼠的种群生态进行了初步研究,现把资料整理如下。     

哒嗪类化合物9403诱导小麦雄性不育的初步研究

9403是国内新合成的一种哒嗪类化合物,经初步研究证明,9403具有诱导小麦雄性不育的作用。试验以GENESIS化学杂交剂为对照,对9403诱导小麦雄性不育的作用进行了研究。结果表明;9403对试验的两个品种西农6419与BAU95在其花药发育的药隔期,用剂量0.75kg/hm^2进行一次叶面喷施,诱导雄性不育率可达到96%以上,人工饱和授粉证明9403对雌蕊的育性没有影响,平均人工饱和授粉结实率为88.6%,与GENESIS相比,9403的杀雄效果较不彻底且具有一定的药害。     

鹫峰山脉中段农业区的鼠类调查

鹫峰山脉北起福建省寿宁县,经周宁、屏南,南端达古田县,为福建省的主要山脉之一。鹫峰山区的鼠类以往仅有一些零星的记载。我们遂于1982年11月到鹫峰山脉中段的周宁县进行鼠类调查。 周宁约位于北纬27°15′,东经119°20′,系鹫峰山脉的主体部分。所调查的城关、浦源、七步等地,主要地形为山间盆地和中山河谷。城关盆地底部海拔895米,四周高山环抱。年均     

计算自花传粉后代相对性状比数的公式

当我们用黄粒豌豆与绿粒豌豆杂交,得到F_1,全部为黄粒豌豆。F_1自交,F_2中黄粒豌豆与绿粒豌豆比数为3:1。若再进一步白花传粉到F_3、F_4、F_5代。那么F_5代个体中与F_1相同基因型的应占百分之几?纯合体个体应占百分之几? (理论上) 这是一对相对性状的遗传实验。黄色为显性,绿色为隐性。从F_1全部为黄粒豌豆,可以判断两个亲本均为纯合体。现以“Y”表示黄色,“y”表示绿色,F_1的基因型为     

不同方法测定根管长度的比较

临床上根管充地都要首先测得根管操作长度。本文应用离体牙模拟口腔环境模型,按旨感法、电测法、Ｘ光片法,分别在５０个单根管离体牙上测出其根管操作长度,来与其解剖度作研究比较,并求出它们的平均差,分析它们的准确度、优缺点及其相互关系,以便更好地指导临床实际工作。     

对于人猿划分问题的一点意见

对于人和猿的划分,恩格斯在著名的《劳动在从猿到人转变过程中的作用》一文里,已作了圆满的科学回答。为了进一步加深对马克思主义人类起源理论的正确理解,目前我国人类学家和关心人类起源研究的同志,对人猿划分问题进行的讨论,我认为是十分必要的;它对于人类学研究工作的进展也是有好处的。周作云在《人猿分野辨》一文中,单纯地以“使用原则”将人和猿绝对划分开。我认为这种划分法不符合人类起源的实际情况;也不符合恩格斯对人猿之间存在过渡阶段和“劳动是从制造工具开始的”科学论断。(见《自然辩证法》) 吴汝康在《人和猿的界限问题》中,提出“从猿到人的转变过程中有一个过渡阶段”,“这个过渡阶段是人的新质和猿的或动物的旧质不断斗争的过程,是新质不断克服旧质的     

乳杆菌DM8909菌种产生H_2O_2及乳酸含量的测定

乳杆菌ＤＭ８９０９是阴道正常菌群之一,可以拮抗阴道内多种致病菌的生长,其拮抗机理之一是产生Ｈ２Ｏ２和乳酸。实验分析乳杆菌ＤＭ８９０９产生Ｈ２Ｏ２和乳酸在不同生长时间的含量,可为生产菌株在检定方面做为鉴定依据。１材料与方法１１菌种和培养基乳杆菌ＤＭ８...     

一种核不均一核糖核蛋白M4缺失突变体的克隆

利用减法杂交技术筛选人树突状细胞(DC)经抗原刺激后特异表达的基因, 成功地获得了十多个特异表达基因, 其中包括一种核不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein, hnRNP)M4第159～197位氨基酸缺失的新基因. 对部分肿瘤细胞系及原代培养细胞进行RT-PCR检测发现, 它的表达与hnRNP M4基因是一致的, 同时证实了该基因表达于经KLH刺激后的DC而非正常的DC. 组织分布分析显示, 该基因高表达于脾脏、外周血淋巴细胞、肺和肝脏. 另外, 通过多种细胞因子刺激的骨髓基质细胞(bone marrow-derived stromal cells, BMSC)也表达这两种分子, 但TNF-a 处理后mRNA的表达消失. 这一发现增加了对DC在抗原提呈过程中基因表达变化的认识, 为hnRNP家族增添了新成员.