新冠疫情下外科学网络教学评价体系的构建及思考

突发的新冠疫情改变了传统的课堂教学,借助现代网络信息技术的线上教学广泛开展,如何客观评价网络教学效果成为迫切需要解决的问题.本研究从学生评教、教师评学、教学督导三个纬度,借鉴传统课堂教学成熟的评价体系,尝试构建新冠疫情下外科学网络教学评价体系并探讨其不足之处.     

三种典型赤潮藻产生与消耗二甲基硫化物的速率估算

采用抑制剂加入法估算了中肋骨条藻、棕囊藻和东海原甲藻在不同生长期内二甲基硫化物的产生与消耗速率.结果表明:颗粒态二甲基巯基丙酸(DMSPp)和颗粒态二甲亚砜(DMSOp)在3种藻类的不同生长期内均为净消耗,溶解态二甲基巯基丙酸(DMSPd)和溶解态二甲亚砜(DMSOd)的含量受藻类产生与细菌病毒消耗控制,在藻类不同生长期内存在不同的产生与消耗速率,而二甲基硫(DMS)在3种藻不同生长期内均为净产生.同一种藻在不同生长期内以及不同藻在相同生长期内二甲基硫化物的产生与消耗速率均存在较大差异,表明藻类的生理状态和种间差异均对二甲基硫化物的产生与消耗速率产生影响.     

双歧杆菌DM9227和乳酸杆菌DM8121质粒的检测及药敏试验

应用分子克隆常规质粒提取方法（略作修改）,对一株Ｂｉｆ．ｉｎｆａｎｔｉｓＤＭ９２２７及另一株Ｌａｃｔｏ．ｃａｓｉｅ．ＤＭ８１２１进行质粒提取及分析,并用固体培养基药敏纸片法测定此两株菌对１７种常用抗生素的敏感性。结果发现,ＤＭ８１２１及ＤＭ９２２７中无质粒的存在。药敏结果显示,ＤＭ８１２１对强力霉素、链霉素、庆大霉素较敏感,而对头孢菌素、氨苄青霉素、青霉素耐药。ＤＭ９２２７对头孢菌素、先锋霉素、庆大霉素、卡那霉素较敏感,对氨苄青霉素、羧苄青霉素、青霉素、强力霉素等耐药。     

来源于泗阳鞘氨醇杆菌的聚磷酸激酶的克隆表达及在ATP再生系统中的应用

聚磷酸激酶(polyphosphate kinase,PPK)在体外催化合成ATP的反应中有着重要作用。为寻找能利用短链聚磷酸盐(polyphosphate,polyP)为底物高效合成ATP的聚磷酸激酶,本文以来源于泗阳鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium siyangensis)的聚磷酸激酶(PPK2)为研究目标,利用pET-29a构建重组质粒,在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达,并将其作为ATP再生系统的关键酶与l-氨基酸连接酶(YwfE)联用生产丙谷二肽(Ala-Gln)。ppk2长度为810bp,编码270个氨基酸;SDS-PAGE结果表明PPK2为可溶性表达,分子量为29.7kDa。对PPK2的最适反应条件进行了优化,结果发现其在22–42℃、pH7–10的范围内均可以保持较好活性,且在37℃、pH为7、镁离子(Mg²⁺)浓度为30mmol/L、底物ADP与六偏磷酸钠浓度分别为5mmol/L和10mmol/L时酶活最大,在0.5h时ATP产率可以达到理论值的60%以上。作为模式反应体系,当PPK2与YwfE联用生产Ala-Gln时,达到与直接添加ATP相同的效果。此聚磷酸激酶作为ATP再生系统具有较好的适用性,适用的温度和pH范围广,且能以廉价易得的短链polyP为底物高效合成ATP,为依赖ATP的催化反应体系的能量再生提供了新酶的来源。     

小泡巨鼠对森林种子选择和贮藏的观察

小泡巨鼠是四川省都江堰林区一种占优势的鼠种,取食多种林木种子和果实,可能影响这些树种的更新。于2001年秋季,调查了小泡巨鼠对栓皮栎、袍树、栲树、石栎、青冈和油茶等6种重要林木种子的选择和贮藏,并初步探讨了其对森林更新的影响。结果表明,小泡巨鼠对上述6种林木种子有很强的选择性,种子的营养价值和单宁含量是影响其选择和贮藏的主要因素。小泡巨鼠喜好取食和贮藏单宁含量较低的栲树、油茶和石栎种子,而不喜好取食和贮藏单宁含量较高的袍树、青冈和栓皮栎种子。小泡巨鼠在围栏内分散贮藏了部分种子(特别是石栎和油茶种子),且绝大部分贮藏点仅有1粒种子。小泡巨鼠对种子的选择和贮藏可能对有关林木的更新产生积极影响。     

一种新的DyP-type过氧化物酶在大肠杆菌中的重组表达、纯化及鉴定

染料脱色过氧化物酶(DyP-type过氧化物酶)是含有亚铁血红素,能降解各种有毒染料的一类蛋白.为了研究运动发酵单胞菌Zymomonas mobilis ZM4 (ATCC 31821)中一种新的DyP-type过氧化物酶的特点和功能,以Z.mobilis基因组DNA为模板,通过PCR扩增目的基因,克隆到大肠杆菌表达载体pET-21b(+)中.通过ZmDyP与其他DyP-type过氧化物酶的比对,发现它们存在着共同保守氨基酸D149、R239、T254、F256和GXXDG结构基序,说明ZmDyP是Dyp-type过氧化物酶家族的一个新成员.经IPTG诱导大肠杆菌中pET21 b(+)-ZmDyP表达,并将表达的酶进行金属螯合层析纯化.SDS-PAGE分析表明,纯酶分子量为36 kDa,而活性染色显示分子量为108 kDa,表明该酶在活性状态下可能是一个三聚体.光谱扫描显示ZmDyP有一个典型的亚铁血红素吸收峰,说明它是含有亚铁血红素的蛋白.对ZmDyP性质进行了研究,发现以2,2-二氨-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)ABTS为底物,ZmDyP表现出更高的转化效率.这些研究结果丰富了DyP-type 过氧化物酶家族信息,并且为ZmDyP的结构功能和反应机制研究奠定了基础.     

乳酸菌对高脂小鼠降胆固醇作用的研究

目的探讨乳酸菌对高脂小鼠降胆固醇的作用。方法对昆明小鼠饲喂高脂饲料14 d建立高脂小鼠模型,确定模型建立成功后用1株经体外实验证实具有降胆固醇效果的乳酸菌对小鼠灌胃,测定小鼠经灌胃14、28 d的脏器指数、血清胆固醇含量和肝脏胆固醇含量。结果灌胃组小鼠脏器指数明显低于高脂组小鼠,且对于血清和肝脏胆固醇含量具有明显的降低作用。结论该菌株具有降低血清胆固醇,抑制肝脏胆固醇堆积的功能,为将来利用该菌株制作出降胆固醇功能的食品或药品提供实验基础。     

链霉菌A048产几丁质酶最佳发酵工艺研究

将链霉菌A048在完全培养基中培养至对数生长末期,离心洗涤收集菌丝体,然后接种入发酵产酶培养基中,进行二步发酵工艺牛产几丁质酶,几丁质酶活力比一步发酵工艺提高1．1倍,发酵周期共54h,比一步发酵工艺缩短66h;把菌丝体与几丁质粉共固定化,接入发酵产酶培养基中培养36h,几丁质酶活力比一步发酵工艺提高1．8倍,发酵周期缩短54h;在二步发酵工岂中另添加0．4％纤维素,几丁质酶活力可提高4倍,比一步发酵工艺提高10倍,酶活力达18．52U／mL。采用几丁质和纤维索双因子诱导二步发酵工艺可能是链霉菌A048生产几丁质酶的最佳工艺。     

DGMI对缺血再灌注大鼠脑内神经递质的影响

为了探讨银杏二萜内酯葡胺注射液(DGMI)对缺血再灌注大鼠脑内神经递质的影响。本研究将SPF级SD雄性大鼠60只,随机分为6组,造模与给药结束后,使用高效液相-电化学的方法检测实验大鼠的氨基酸类与单胺类神经递质含量。大鼠脑组织的ImageJ图像分析发现,高剂量组大鼠的梗死体积与水肿面积显著低于模型组,并与空白组水平接近。高剂量组大鼠的Asp、Glu、GABA水平最接近空白组,认为高剂量组调节氨基酸类神经递质平衡的效果最佳。高剂量组大鼠的DA、E、NE与空白组比较无差异,认为高剂量组的治疗效果显著优于阳性对照药物。本研究表明,银杏二萜内酯葡胺注射液可以有效抑制兴奋性神经递质与单胺类神经递质的释放,增加脑内抑制性神经递质的含量,推测DGMI可以通过调节氨基酸类神经递质的平衡,从而对脑组织神经元进行保护。     

水杨酸诱导湖北海棠全长cDNA文库的构建及应用

以'湖北海棠'为材料,经水杨酸处理后,用改良CTAB法提取总RNA,纯化后构建全长cDNA文库,并进行PGIP基因的克隆.结果表明:(1)提取的总RNA无降解,无污染;mRNA弥散带主要集中在500～2 000 bp左右,没有rRNA 残留.(2)ds cDNA弥散带主要分布于300～2 000 bp之间,PCR验证后片段大小分布于200～2 000 bp之间,说明合成ds cDNA质量较好,成功地构建了全长cDNA文库.(3)通过PCR从该cDNA文库中克隆了PGIP基因,命名为MhPGIP,GenBank登录号为FJ449708;其核苷酸序列及推导氨基酸序列与苹果的一致性分别为98%和97%,该序列含有两个串联的亮氨酸重复序列.综上所述,构建的全长cDNA文库质量很好,该文库的建成可以用于今后抗病新基因的挖掘、克隆和利用,为苹果抗病机理的研究奠定基础.