类卟啉稀土配合物对于小鼠腹水肝癌细胞光敏损伤的研究

研究了类卟啉稀土配合物（以下简称ＰＬＭ—Ｇｄ—Ａ）对小鼠腹水肝癌细胞（ＡＨ）的光敏作用及ＡＨ细胞对ＰＬＭ一Ｇｄ—Ａ的摄取表明：ＰＬＭ－Ｇｄ－Ａ被ＡＨ细胞摄取的速度快（大约１０ｍｉｎ可达到平衡）,用ＭＴＴ方法测定了细胞光敏存活曲线,杀伤细胞的能力与光照时间和光照强度以及ＰＬＭ—Ｇｄ的浓度密切相关,用ＦＡＤＵ方法和电镜观察结果证明：该光敏损伤细胞的靶主要是在细胞核;对于不同稀土离子配合物光敏能力比较表明：Ｇｄ＞Ｅｕ＞Ｓｍ;造成细胞死亡的原因包括１Ｏ２、在内的活性氧。     

二棱大麦和杂种的β-淀粉酶同工酶研究

用水和木瓜蛋白酶提取的两种大麦β-淀粉酶同工酶在薄层等电聚焦电泳中能分辨出30条酶带,它们的pI在4.4—6.5之间,可以分成3个区(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区)。水提取的游离态β-淀粉酶同工酶主要集中在Ⅰ区。而用木瓜蛋白酶提取的总β-淀粉酶同工酶主要分布在Ⅱ、Ⅲ区,Ⅰ区较少,它的分布区域与游离态酶的活性有关。37个二棱大麦品种的β-淀粉酶活性差异较大,但根据同工酶的电泳图谱可以分成两种类型,即Ⅰ型和Ⅱ型,两者在酶带数和分布上都有差异。 同一类型的不同品种之间杂交后,酶活性出现明显的杂种优势,但其同工酶的电泳图谱不发生改变。 对β-淀粉酶同工酶电泳类型的多型性及高β-淀粉酶活性在育种上的应用作了简要讨论。     

肺炎链球菌ΔA146Ply蛋白抵抗鼻咽部感染的研究

本研究旨在研究无佐剂添加的肺炎链球菌ΔA146Ply蛋白的免疫保护作用。利用大肠杆菌原核表达系统成功表达ΔA146Ply后用Ni2+柱纯化并去除内毒素。将ΔA146Ply蛋白刺激小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDCs)24 h后收集细胞上清,检测得细胞因子IL-6、TNF-α、IL-12p70分泌显著增加。以无佐剂添加的ΔA146Ply、加Al佐剂的ΔA146Ply及PBS分别免疫小鼠后,采用ELISA试剂盒检测血清特异性抗体效价,结果显示含ΔA146Ply的免疫组小鼠的抗体效价较PBS组显著升高,而加Al佐剂组与无Al佐剂组之间无显著差异;取脾细胞再刺激后收集细胞上清,测得含ΔA146Ply的免疫组小鼠的细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17A分泌量较PBS免疫组显著增高,加Al佐剂的ΔA146Ply免疫组的IFN-γ和IL-17A分泌量较无Al佐剂的ΔA146Ply免疫组显著增高,但IL-4的分泌二者无显著差异。末次免疫后鼻腔攻毒肺炎链球菌CMCC31693(19F),3 d后铺板计细菌载量,结果显示无佐剂ΔA146Ply免疫组小鼠的鼻咽部及肺部定植细菌较PBS组显著减少,而加Al佐剂组只有肺部定植细菌的减少且与无佐剂ΔA146Ply免疫组无差异。HE染色和炎症细胞因子检测结果显示,含ΔA146Ply免疫组的小鼠肺部炎症反应都较PBS组显著减轻。这些结果显示ΔA146Ply无需Al佐剂辅助即可诱导小鼠产生较强的免疫效应,有效抵抗肺炎链球菌的鼻咽部感染。     

二硫键稳定的抗肝癌人源化Fv-突变体人TNFα融合基因的构建与表达

利用引物PCR和重叠延伸PCR法,将抗肝癌人源化抗体hscFv25重链可变区和轻链可变区各定点突变出一个半胱氨酸,将hTNFα改造成高抗肿瘤活性的突变体,分别原核表达重链可变区突变体、轻链可变区突变体-突变体hTNFα融合基因,然后将两种表达的产物混合进行复性,目的获得具有高稳定性和高抗肿瘤活性的抗肝癌靶向细胞因子.结果重链可变区突变体和轻链可变区突变体-突变体hTNFα融合基因在大肠杆菌中均获得高效表达.表达产物以包涵体形式存在,混合复性结果未获得活性产物.     

我国动物学核心期刊的确定──文摘法的运用

我国动物学核心期刊的确定──文摘法的运用国外昆虫学核心期刊，美国尤金·加菲尔德博士于１９８４年通过对１９８２年《科学引文索引》第１４卷《期刊报告》的引证统计，定出５０种国外昆虫学西文核心期刊。上海昆虫研究所乐文俊、金松亦于１９９１年确定我国昆虫学核心...     

用pLNCX2携带人MCPH1基因shRNA重组逆转录病毒载体的构建及鉴定

目的建立逆转录病毒介导的MCPH1基因RNA干扰表达体系并观察其在宫颈癌Caski细胞中对MCPH1表达的影响。方法将人MCPH1基因RNA干扰双链DNA片段重组到逆转录病毒质粒pLNCX2中,构建携带人MCPHI基因RNA干扰的逆转录病毒载体pLNCX2-shRNA—MCPH1,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染宫颈癌细胞株Caski细胞,并用G418筛选产生稳定的细胞克隆,用RT—PCR和Western印迹检测细胞中MCPH1mRNA和蛋白表达的变化。结果重组逆转录病毒质粒经测序鉴定正确,逆转录病毒感染Caski细胞后用G418筛选出稳定的细胞克隆,RT—PCR和Western印迹检测人MCPH1mRNA和蛋白表达水平明显低于阴性对照组和未干扰组。结论携带人MCPHI基因RNA干扰双链DNA片段的逆转录病毒感染Caski细胞后能明显抑制MCPHImRNA和蛋白表达,为进一步研究MCPH1在宫颈癌中的作用奠定了基础。     

蛋白激酶的生化活性检测方法研究进展

蛋白激酶在真核细胞信号转导中起重要作用,影响了生长、发育、迁移以及凋亡等各个细胞过程。其表达水平或活性异常时,就有可能导致癌症、心血管疾病以及其他各种疾病,因此蛋白激酶是治疗这些疾病很好的分子靶点。迄今为止,美国食品药品监督管理局已经批准了28个蛋白激酶的抑制剂作为上市药物,用于相应的临床治疗。目前存在着各种检测激酶活性的方法,激酶生化检测方法尤为众多,比较经典的有放射性同位素的方法,也有一些非均相非放射性同位素的方法,诸如酶联免疫法、反相高效液相色谱法、核磁共振分析法等等。而各种均相非放射性同位素的检测方法,由于其污染小、操作便捷,逐渐成为激酶抑制剂筛选的首选。本文综述了各种激酶生化检测方法及其发展历史,并介绍了一些新的趋势,如激酶酶谱筛选。     

滨海盐沼湿地有机碳的沉积与埋藏研究进展

滨海盐沼湿地有着较高的碳沉积速率和固碳能力,在缓解全球变暖方面发挥着重要作用,而盐渍土壤是滨海盐沼湿地碳收支研究中最大的有机碳库,研究其碳沉积与埋藏对于理解滨海湿地碳收支有着重要的意义.本文从滨海盐沼湿地土壤有机碳的来源、土壤有机碳库与沉积速率、盐沼湿地有机碳的埋藏机制、全球变化与滨海盐沼湿地碳封存等几方面对滨海盐沼湿地有机碳沉积与埋藏的相关研究进行综述.今后研究应侧重:1)加强对控制滨海盐沼湿地碳储存变异的基本因素的迸一步研究;2)对测量滨海盐沼湿地沉积物碳储量和沉积碳埋藏速率的方法进行标准化;3)对潮汐影响下滨海盐沼湿地碳与邻近生态系统之间的横向交换通量进行量化;4)探明全球变暖的影响和生产力的提高是否可以抵消因呼吸增强而造成的有机碳降解速率的升高.确定固碳速率变化驱动因子,理解气候变化和人类活动对碳埋藏的影响机制,有助于提升我国滨海盐沼湿地的固碳能力.     

广西龙门岛群桐花树天然林生物量的初步研究

 本研究测定了广西龙门岛群桐花树天然林地上部分的生物量。按径阶标准木法分别调查了3种不同年龄阶段天然林的群落生物量,根据18株不同径阶标准木的测定数据,建立了估测群落单株林木地上部各器官生物量的回归方程,方程的相关系数均达极显著水平,估测精度较高,具有实用价值。研究的结果表明,5年、l7年和20年生的桐花树群落地上部生物量分别为3743.5g／m2、7279.0g／m2和8817.1g／m2,年均生产量分别为748.7g／m2·a、428.2g／m2·a和440.9g／m2·a。     

胰岛素对β细胞胰岛素分泌的反馈影响

目的：探讨不同浓度外源性胰岛素在不同浓度葡萄糖情况下对β TC-3细胞胰岛素分泌的影响。方法：取对数生长期的13TC3细胞分三组,即低糖组、中糖组、高糖组（葡萄糖浓度分别取1．0mmol／L、3．Ommoi／L、20．Ommol／L）。每组分0、5、10、15、100、500、5000和50000μU／ml胰岛素八个亚组（其中0μU／ml作为对照组）。刺激10分钟后取上清液测C肽。结果：在高糖组中,C肽分泌量无明显差异;在中糖组中,10μU／ml和15μU／ml两组相对对照组C肽分泌量显著增加,50000μU／ml组C肽分泌量则相对对照组出现减少,其余3个亚组无明显改变;在低糖组中,c肽分泌量除5000μU／ml组减少外。其它亚组C肽分泌量无明显差畀。结论：胞外胰岛素在适宜葡萄糖浓度时,对BTC3细胞胰岛素分泌的反馈影响呈剂量依赖关系。