饮食诱发Ⅱ型糖尿病动物模型的研究

摄入过多的营养和过度肥胖是诱发Ⅱ型糖尿病的重要因素。大量流行病学资料显示Ⅱ型糖尿病的发生、发展与营养过剩有关。我们用高脂高蔗糖饲料喂养贵州小香猪 3个月 ,并对其空腹血糖、胰岛素和脂质水平进行检测 ,发现这种饲料可以引起猪体重的增加 ,且出现严重的高血糖症和高脂血症。1　材料和方法贵州小香猪 15头 (雄∶雌 =8∶7) ,3～ 4月龄 ,购自第三军医大学实验动物学部。按体重分为 2组 ,正常对照组 5头 ,喂以普通猪饲料 ;实验组 10头 ,喂以高脂高蔗糖 (含 37%蔗糖 ,10 %猪油 )饲料 ,共喂养 3个月。每月末称体重 ,并从禁食过夜的小香猪…     

脂滴膜转运蛋白Rab18与脂质代谢的关系研究

脂滴是动物细胞内储存脂质的一种亚细胞器。脂滴表面存在多种脂滴周围相关蛋白,参与脂质动态平衡的调节,防止脂质代谢异常的发生。其中,Rab18作为脂滴周围相关蛋白中的一种,在脂质代谢的调节、信号的转导、膜运输等多种生理功能中发挥重要作用。对于Rab18与脂质代谢之间关系的研究,为动脉粥样硬化、糖尿病、非酒精性脂肪肝及肥胖等多种代谢性疾病的防治发挥重要作用,本文就Rab18与细胞脂质代谢之间的关系研究作一综述。     

氧化低密度脂蛋白诱导主动脉平滑肌细胞胆固醇酯聚集和凋亡(英)

细胞内胆固醇代谢的失衡和细胞凋亡都与动脉粥样硬化的发生有关.为了研究两者之间的关系,我们把猪的主动脉平滑肌细胞与15 mg／L氧化低密度脂蛋白共同孵育72 h,发现细胞内胆固醇酯与总胆固醇的比值由26.2%增加到64.1%,并且细胞内胆固醇酯的积聚有剂量依赖关系,表明细胞已经转化为平滑肌源性的泡沫细胞.另外,使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜和流式细胞仪分别发现,与氧化低密度脂蛋白共孵育的细胞有典型的凋亡形态改变.从实验可以推测,由氧化低密度脂蛋白诱导的平滑肌细胞凋亡,除了低密度脂蛋白氧化的因素外,也可能与细胞内胆固醇酯与总胆固醇的比值升高有关.     

一个新的脂质蓄积标记物--亲脂蛋白

亲脂蛋白是真核细胞胞内脂滴的一个不完全包被蛋白,其表达异常与动脉粥样硬化、糖尿病和肥胖等脂质蓄积性疾病的发生与发展密切相关,是脂质蓄积的一个敏感标记物.参与的功能主要是中性脂质的蓄积与脂滴的形成、长链脂肪酸的转运、乳脂的分泌以及对肺表面活性剂磷脂合成的促进等.     

Plin2通过NF-κB通路参与oxLDL诱导巨噬细胞LOX1的表达

目的 oxLDL可上调Plin2的表达,进而促进泡沫细胞的形成,LOX1是oxLDL的受体。本文探讨Plin2与LOX1在动脉粥样硬化发生发展过程中的关系。方法 从GEO数据库中下载GSE43292,分析Plin2、LOX1的表达及Plin2、LOX1与NF-κB信号通路的相关性。采用oxLDL处理的RAW264.7细胞作为动脉粥样硬化的细胞模型进行研究,蛋白质免疫印迹法检测细胞中Plin2、LOX1和p-p65的表达,荧光中性脂质染料BODIPY 493/503染色法检测细胞内脂滴。结果 通过分析GSE43292数据发现,Plin2、LOX1在颈动脉粥样硬化斑块中的表达显著高于颈动脉邻近组织。oxLDL处理RAW264.7细胞24 h后,Plin2与LOX1的表达、细胞内脂滴明显增加。过表达Plin2的细胞中LOX1表达升高;当用oxLDL孵育过表达Plin2的细胞后,LOX1的水平升高更为显著;但在没有oxLDL处理的情况下,敲减Plin2对细胞内LOX1的表达没有影响。基因集富集分析（gene set enrichment analysis,GSEA）结果显示,在动脉粥样硬化中,Plin2和LOX1的表达与NF-κB的活化呈正相关。此外,尽管采用oxLDL处理细胞,NF-κB抑制剂JSH-23预处理仍可显著降低Plin2与LOX1的表达、细胞内的脂质积聚,过表达Plin2后,JSH-23亦能显著抑制oxLDL孵育的细胞中Plin2和LOX1的表达。结论 Plin2可通过上调LOX1的表达促进细胞内脂质积聚,参与动脉粥样硬化,这一过程至少部分是通过激活NF-κB通路实现的。     

脂酰辅酶A长链合成酶3及其相关疾病

脂滴(lipid droplets)是细胞内脂质贮存和调节细胞脂质稳态的重要细胞器,其表面具有多种脂滴相关蛋白质。长链酰基辅酶A合成酶家族的成员脂酰辅酶A长链合成酶3(acyl CoA long chain synthetase 3,ACSL3)即脂滴相关蛋白质的一种,也是生物合成过程中必需的酶之一。ACSL3广泛分布于大多数细胞中的脂滴表面,其在脂滴的合成、自噬的调节和细胞铁死亡等多种病理生理过程中发挥着不同的作用。此外,多项研究表明,ACSL3还广泛参与到多种疾病的发生发展,包括动脉粥样硬化、非酒精性脂肪肝病、糖尿病和肿瘤等。当前,国内对ACSL3的研究相对集中于ACSL3与动物育种和生长的关系,而对ACSL3在脂质代谢中的作用机制及其与疾病的关系鲜有报道。本文基于国内外对ACSL3的研究,对该基因的结构、在细胞脂代谢中的作用机制及其相关疾病进行归纳,进一步探究ACSL3在脂滴的合成、自噬、铁死亡过程中的作用,为防治动脉粥样硬化、非酒精性脂肪肝病、糖尿病(glucose)等多种ACSL3相关疾病提供新的理论依据。     

Adipophilin在不同组织和器官中的功能

Adipophilin（ADFP）是一种脂滴周围主要的相关蛋白,它大量分布在脂质蓄积正常或不正常的细胞中,是脂质蓄积的一个特异性标记物。它在脂肪细胞分化早期就有很高的表达,但当脂肪细胞成熟后,它的表达就明显减少。ADFP在很多组织器官中都发挥重要作用,它不仅参与脂肪细胞的脂质代谢、脂滴的形成及肝内三酰甘油（TO）的合成与代谢,还能促进巨噬细胞、平滑肌细胞的泡沫化,长链脂肪酸的摄取,乳汁的分泌等。ADFP的表达异常与动脉粥样硬化、胰岛素抵抗和肿瘤等病理过程密切相关。     

反义adipophilin寡核苷酸降低ACAT活性(英)

已经发现,随着细胞内胆固醇酯的积聚,adipophilin的表达明显增加.在此基础上,为了寻找adipophilin在细胞内胆固醇代谢的作用点.小鼠腹腔巨噬细胞与80 mg/L OxLDL或80 mg/L OxLDL加1 mmol/L adipophilin反义寡核苷酸共孵育,在不同的时间点取样,使用免疫荧光染色,流式细胞仪分析和细胞内胆固醇测定.结果显示,72 h后,反义寡核苷酸处理组细胞内胆固醇酯显著下降到（19.9±1.9）mg/g,油红O染色显示,该组细胞质内红色脂滴明显减少.96 h的观察期间内,两组细胞adipophilin蛋白的表达量都增加.从12 h开始,未用反义寡核苷酸处理组adipophilin蛋白的表达量开始大于反义寡核苷酸处理组.在96 h时间点,统计学处理,未用反义寡核苷酸处理组明显高于反义寡核苷酸处理组,差别有显著性.使用Ox-r［CL-³H］LDL观察两组细胞摄入OxLDL的量,实验发现,两组细胞摄入Ox-r［CL-³H］LDL的量逐渐增加.但是,反义寡核苷酸处理组摄入Ox-r［CL-³H］LDL的量从24 h后明显低于未用反义寡核苷酸处理组,在48 h和96 h时间点,统计学处理,两组差别有显著性.观察ACAT的活性发现,ACAT相对活性从6 h到48 h表现为增加,但从48 h到96 h,ACAT相对活性趋于稳定.在48 h时间点,两组比较差别有显著性,反义寡核苷酸处理组的活性明显低于未用反义寡核苷酸处理组.相关分析发现,ACAT的活性与adipophilin蛋白的表达量有一定的联系,但不是直线相关.结果表明,adipophilin表达的高低与细胞摄入外源性脂蛋白,与ACAT的活性有一定的联系.提示adipophilin与脂滴的代谢功能密切相关,且ACAT有可能是其潜在的位点.     

干扰素-γ对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出和ABCA1表达的影响

以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象,观察干扰素-γ(IFN-γ)对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的影响.以便探讨IFN-γ在动脉粥样硬化发生发展中的作用.采用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出, 高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量.运用逆转录-多聚酶链反应和蛋白质印迹分别检测ABCA1 mRNA与ABCA1蛋白质的表达, 采用流式细胞术检测细胞平均ABCA1荧光强度.发现IFN-γ引起THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞总胆固醇、游离胆固醇与胆固醇酯呈时间依赖性增加, 而ABCA1 mRNA和蛋白质表达、细胞平均ABCA1荧光强度以及apoA-1介导的胆固醇流出呈时间依赖性减少, 细胞内胆固醇增多.结果表明IFN-γ抑制THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达及细胞内胆固醇流出,同时增加细胞内胆固醇聚积.