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ATHKl基因调节拟南芥渗透胁迫信号转导过程 总被引:3,自引:0,他引:3
以拟南芥ATHKl基因T-DNA插入所产生的缺失突变体和野生型ws(wassilewskija)生态型为材料,分析了它们在生理和基因表达方面的差异.结果表明突变体的离体叶片失水率明显大于野生型;在30%PEG-6000胁迫后,野生型和ATHKJ突变体的细胞膜离子外渗率比胁迫前分别增加了50%和80%.PEG胁迫48 h时突变体的萎蔫程度明显大于野生型ws.以上结果说明ATHKl突变体的抗渗透胁迫能力低于野生型,即ATHKl基因参与了拟南芥适应逆境的调节反应.利用DDRT-PCR技术研究二者在PEG胁迫36h后的基因表达差异,分离到9个在野生型中被PEG诱导表达而在突变体中未被诱导的参与逆境应答的基因片段,其中包括MAPKKKl8和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因,即ATHKJ基因失活引起下游基因响应渗透胁迫的能力减弱,进一步说明ATHKJ基因参与拟南芥适应逆境的调节反应,并且ATHKl可能在逆境信号转导组分MAPK的上游起作用,很可能是植物体中的渗透感受器. 相似文献
92.
日本扁柏核基因组微卫星的分离与鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
以日本扁柏4个种源的DNA样品为材料,经NdeⅡ酶切并电泳后回收300~1000bp DNA片段,与含有生物素标记的(CT)15探针杂交,再用磁珠(Dynabeads M280 streptavitin beads)固定杂交产物,成功地实现了日本扁柏核基因组微卫星的高效分离。以pUC118 BamH Ⅰ/BAP为载体,E.coli如为寄主,构建了日本扁柏2个富含微卫星的基因组文库,共获得2200多个阳性克隆。从构建的基因组文库中,随机挑选480个阳性克隆进行测序,发现含有微卫星的克隆比例高达65.6%,其中215个非同源性克隆共含有380个微卫星位点,平均每个克隆含1.7个。微卫星种类以与探针(CT)15互补的(GA/CT)。为主,占86.1%,同时还存在(TG/AC)。和3~4个碱基为单元构成的微卫星,如(ATAG)n、(CAGA)n、(TGA)n、(ACG)n、(TCA)n、(TCT)n等。利用Oligo5.1软件为114个含有微卫星的克隆共128个微卫星位点设计出了PCR扩增引物。 相似文献
93.
黑曲霉N14植酸酶基因在巴斯德毕赤酵母中的高效表达 总被引:10,自引:0,他引:10
从黑曲霉N14基因组DNA中扩增出植酸酶phyA基因表达片段 ,并将其克隆到pMD18-T载体中。以此片段构建了pPIC9K-phyA重组表达载体 ,目的片段以正确的阅读框架插入到pPIC9K的多克隆位点EcoRⅠ和NotⅠ之间。重组表达载体经XbaⅠ线性化处理 ,电击转化毕赤酵母 ,经G418抗性筛选、酶活性测定、PCR鉴定和SDS-PAGE分析 ,获得了两株产酶活性分别为 14 39583u mL发酵液 (PP N1422 )和14 89083u/mL发酵液 (PP-N1444)的高产工程菌 ,其酶活性分别是出发菌株酶活性 (422u/mL)的 34113倍和 35286倍 ,重组酵母具有很好的遗传稳定性。重组植酸酶在pH值 2.5~3.0和 5.0~5.5时酶活性最高 ,且在pH4.5~6.5之间均有相当高的酶活性 ,最适作用温度为55℃。 相似文献
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目的 为了经济快速分离眼镜王蛇(Ophiophagushannah,Oh)蛇毒中的毒素成分。 方法 用普通离子交换剂于高效液相色谱柱 (HPLC) TSKgel SP-Toyopearl 65 0 SF (4× 1 5 0 mm)层析法 ,实验取得最佳分离条件后 ,将蛇毒样品上柱后进行梯度洗脱 ,各洗脱峰收集后在 Cosmosil 5 C4-AR-3 0 0柱 (4 .6× 1 5 0 mm)上进行逆相 HPLC分析。非单峰组分再进行 HPLC凝胶过滤柱TSKgel Toyopearl HW-40 Fine(4× 2 5 0 mm)层析 ,层析峰组分再进行 HPLC逆相分析。 结果 眼镜王蛇毒经HPLC离子交换柱层析获得了 1 6个蛋白组分 ,其中有 5个组分经逆相 HPLC分析单一组分 ;另外的复合性组分再进行 HPLC凝胶过滤柱层析后又得到 5个单峰蛋白组分。 结论 HPLC离子交换柱层析对分离蛇毒蛋白很有实用价值 ,特别是蛇毒样品量少的情况下 (1 0 ug)也能较好分离。还具有分离时间短 (1 h左右 ) ,无须低温条件等优点。HPLC凝胶过滤柱层析可进一步使蛋白组分得到提纯 相似文献
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在新世纪的曙光里 ,国家初中生物新课程标准已经问世。在新课程标准中 ,提出了许多新的课程理念 ,构建了新的课程体系 ,安排了新的学习内容。为了推进生物学的课程改革 ,我们按照《生物课程标准》的要求 ,编写了以学生生活中遇到的生物学问题为主线的、全新的《生物学》教科书和配套教材。目前该套教科书已经全国中小学教材审定委员会 2 0 0 2年初审通过 ,将于 2 0 0 3年秋季在实验区进行实验。下面就本套教科书的指导思想、主要特色和体系结构做简要的介绍 ,以便大家更好地了解编写意图 ,使用好本套教科书。1 编写指导思想1 .1 贯彻“基… 相似文献
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100.
欧洲专利局(EPO)撤销了英国AstraZeneca公司的支气管哮喘治疗药富马酸福莫特罗(Formoterol Fumarate)和布地奈德(Budesonide)合剂Symbicort的重要专利之一。 相似文献