中蜂囊状幼虫病毒结构蛋白VP2的密码子优化表达及其免疫原性研究

利用生物信息学软件对编码中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)VP2结构蛋白的密码子进行优化来提高VP2蛋白表达量,并进行免疫原性研究确定VP2蛋白的免疫原性。通过对17株囊状幼虫病毒(SBV)和7株中蜂囊状幼虫病毒(CSBV)的VP2基因序列进行比对,选取代表毒株(GenBank:HM237361.1)CSBV-LN株VP2基因作为参考序列,并用在CSBV所有毒株中保守性相对较强的氨基酸替换CSBV-LN株VP2对应位置的氨基酸,通过在线软件(http://www.jcat.de/和http://genomes.urv.es/OPTIMIZER/)对其密码子进行优化,构建原核表达质粒pET-28a-optiVP2,并转化入BL21(DE3)中,进行诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Westren blot鉴定正确后,将表达蛋白纯化并免疫至白来杭母鸡,对免疫鸡的抗体水平和淋巴细胞增值指数进行检测,研究CSBV VP2蛋白的免疫原性。同时,收集免疫后鸡蛋制备卵黄抗体,经纯化再与CSBV相互作用后,接种于3日龄蜜蜂幼虫,观察接种后幼虫死亡率,研究卵黄抗体中和CSBV病毒能力。结果显示,优化后的optiVP2能够在大肠杆菌中高效表达,其表达产物具有良好免疫原性,表达产物接种白来杭母鸡可诱导产生抗体,制备的卵黄抗体具有中和CSBV的作用。本实验实现了CSBV结构基因VP2在原核系统的高效表达,鸡免疫实验表明其具有良好免疫原性,并且可诱导鸡产生保护作用中和抗体,为进一步开发防治CSBV的生物制剂提供了帮助。     

bcl-2和bax及NF-kB在白藜芦醇诱导肝癌细胞凋亡中的作用

目的探讨白藜芦醇诱导肝癌细胞凋亡的途径。方法白藜芦醇体外处理HepG2肝癌细胞24h后,以免疫组化检测凋亡调控基因bc1-2和bax及NF-kB的表达。结果白藜芦醇处理组HepG2细胞bc1-2的阳性积分和NF-kB的阳性细胞密度均明显低于对照组(P<0.01);而bax阳性积分明显高于对照组(P<0.01)。结论白藜芦醇能下调HepG2细胞bc1-2基因的表达,上调bax的表达,同时抑制NF-kB的活化,这可能是其诱导HepG2细胞凋亡的途径之一。     

汽车尾气对四种北方阔叶树叶绿素荧光特性的影响

采用开顶式熏气室研究了汽车尾气对五角槭、山荆子、山梨和茶条槭 4树种叶绿素荧光参数的影响。采用了相同浓度不同处理时间和相同处理时间不同浓度两种方法进行熏气处理。结果表明 ,随着熏气时间的延长和熏气浓度的增加 ,4树种的荧光参数Fv/Fm、Fv/F0 、ΦPSII、qP均逐渐降低 ,qN则逐渐上升。 4树种荧光参数的变化幅度不同 ,其中山荆子变化幅度最大 ,茶条槭的变化幅度最小 ,五角槭和山梨介于两者之间。以叶绿素荧光参数评价 4树种抗污染胁迫能力 ,茶条槭最强 ,五角槭和山梨次之 ,山荆子最弱。     

红外光谱结合化学计量学快速检测熊胆粉真伪及掺伪问题CSCD

利用红外光谱技术对熊胆粉正品、伪品及掺伪品进行快速鉴别并预测掺伪比例,建立熊胆粉的快速质量评价方法。采集94批熊胆粉正品、70批伪品(猪胆粉、牛胆粉、羊胆粉、兔胆粉、鸡胆粉、鸭胆粉、鹅胆粉)及180批掺伪品(掺伪猪胆粉、掺伪牛胆粉)的红外光谱图,利用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)及偏最小二乘回归(PLSR)分别建立熊胆粉正品、伪品和掺伪品的定性校正模型及不同类别掺伪品掺伪比例的定量校正模型。熊胆粉正品、伪品及掺伪品的定性校正模型对样本的判别准确率分别为99.64%(校正集)和95.65%(验证集);通过进一步判别分析,可鉴别熊胆粉伪品及掺伪品种类,准确率均大于95%;在2个不同类别掺伪品定量校正模型中,验证集相关系数(R_(V)^(2))和预测均方根误差(RMSEP)分别为0.9874、2.6300%(熊胆粉掺伪猪胆粉)和0.9826、3.1887%(熊胆粉掺伪牛胆粉);3个定性模型及2个定量模型均表现出优秀的预测能力。本研究建立的红外光谱结合化学计量学方法可实现对熊胆粉正品、伪品和掺伪品的快速鉴别及掺伪比例确定,为熊胆粉的质量控制及评价提供参考。     

抗生素单剂与联合治疗社区获得性肺炎的临床疗效观察

目的:观察β内酰胺类联合大环内酯类与β内酰胺类单剂治疗社区获得性肺炎的临床疗效。方法:收集我院呼吸内科住院的社区获得性肺炎患者262例,随机分为单剂治疗组和联合治疗组。两组患者均给予抗感染、对症支持治疗,其中单剂治疗组抗生素采用β内酰胺酶类单剂治疗,联合治疗组采用β内酰胺酶类和大环内酯类联合治疗。所有患者统计年龄、性别、基础疾病、病情严重程度,并记录治疗前与治疗后不同住院天数的血常规、C反应蛋白的变化,统计住院天数。结果:联合治疗患者一般基本情况(年龄、性别、基础疾病、病情严重程度)与单剂治疗组相比,P0.05,差异均无统计学意义。治疗前及治疗后首日C反应蛋白和白细胞计数二者相比,P0.05,差异均无统计学意义;联合治疗组与单剂治疗组相比,C反应蛋白在住院第2、4、6、9天,白细胞计数在住院第2、4、6天,均明显下降,住院天数缩短,P0.05,差异均有统计学意义。对于中、重度CAP(CRB65≥2),联合治疗组与单剂治疗组相比,治疗后C反应蛋白以及白细胞计数明显减少,P均0.05,差异有统计学意义;对于轻度CAP(CRB65=0~1),两组治疗后CRB和白细胞计数相比,P均0.05,差异无统计学意义。结论:β内酰胺类联合大环内酯类治疗治疗社区获得性肺炎临床疗效优于β内酰胺类单剂治疗。     

欧洲绣球的快速繁殖

植物名称:欧洲绣球(Viburnum opulus)。材料类别:成年植株早春(北京4月)的萌动腋芽。培养条件:外植体按常规消毒。在MS培养基上诱导芽萌发和生长。苗生长和腋芽再萌动的基本培养基为WPM木本植物培养基和1/2MS培养基,加入的激素等为8种组合(表1)。WPM 蔗糖2％,     

论丁香属植物引种的现状与前景

丁香属(Syringa)植物是中外驰名的观花灌木。由于它习性强健、叶茂花繁、花色清丽淡雅而受到人们的重视。尤其是欧、美各国对它更感兴趣,早在17世纪初,以原产我国的花叶丁香(S.persica)通过丝绸之路经伊朗传入欧洲为起始,在不到300年的时间里,     

黄鳝活体内制备SCD法和SCE频率的测定

哺乳类活体内制备姊妹染色单体分化染色(Sister Chromatid Differentiation,SCD)法国内外已有不少的报道,至于鱼类,曾有学者报道采用肾细胞培养制备 SCD。本实验对黄鳝活体内制备 SCD 法进行了探索,并对其姊妹染色单体交换(Sister Chromatid Exchange,SCE)频率作了测定。