培养介质pH和EGTA对水霉(Saprolegnia ferax)菌丝细胞肌动蛋白的分布与结构的影响

菌丝在pH 5.0—8.0介质中维持顶端生长,Rhodamin-phalloidin荧光探针显示在菌丝顶端都存在F-actin的“帽子”结构;加入EGTA到培养介质中不影响菌丝的顶端生长和actin的“帽子”结构。值得注意的是:菌丝的Rhodamin-phalloidin荧光强度大小与菌丝顶端生长速率成正比;在含有或不含有EGTA的pH5.0培养条件下,菌丝的生长速率均很低,且后部颗粒状的荧光斑点消失;在pH 3.0-4.0培养介质中菌丝生长停止,不但F-actin“帽子”结构消失,整个菌丝荧光也变得非常微弱无法观察,提示酸性pH可引起F-actin的解聚,从而导致生长速率下降甚至生长停止。     

水霉（Saprolegnia ferax）生长菌丝顶端细胞内游离Ca^2＋和膜结合…

本文比较和研究了水霉（Ｓａｐｒｏｌｅｇｎｉａ ｆｅｒａｘ）生长菌丝顶端胞内Ｆｌｕｏ－３游离Ｃａ＾２＋和ＣＴＣ－膜结合Ｃａ＾２＋的荧光分布影像。激光共焦扫描显微镜下观察可见：Ｆｌｕｏ－３荧光有房室化现象,Ｆｌｕｏ－３荧光反映的是细胞质游离Ｃａ＾２＋与细胞器游离Ｃａ＾２＋总的分布状况,Ｆｌｕｏ－３游离Ｃａ＾２＋的最大荧光强度出现在菌丝顶端２－１０ｕｍ区域,１０ｕｍ以后荧光强度逐渐下降,约４０ｕｍ以后荧     

高等真核细胞蛋白质磷酸化与细胞周期G1向S期过渡的调控

真核生物细胞周期运行涉及三个时期过渡(Phase transitions)的调控;1.G_0向G_1期过渡,2.G_1向S期过渡,3.G_2向M期过渡等的调控。近年来,对调控G_1向S期过渡的生化事件的研究结果表明,转录和转录后水平上的调控机制在其中起重要作用。通过磷酸化与去磷酸化而参与G_1向S期过渡调节的蛋白主要有:pRB(retinoblastoma gene product,视网膜母细胞瘤基因蛋白),p107(pRB related pro-tein,pRB相关蛋白),p53,RPA(replicati一     

哺乳类有丝分裂期细胞染色体凝集因子

在细胞周期中细胞内部进行着活跃的生理生化活动,在各个周期时相表现出不同的特点。最显著的是 S 期内进行着 DNA 的合成;M 期内细胞核中的染色质凝集成染色体,并伴有核被膜破裂、染色体分离等现象,最终形成两个子细胞。染色质是经过怎样的机制而凝集成染色体?由于细胞融合技术的发展,使我们有可能探讨这个问题。     

支原体污染防治研究的新进展

几乎对每一个用培养细胞为材料的工作者来说,支原体的污染都是一个极常见而又最棘手的问题,并日益得到普遍的关注。直至不久前为止,对支原体污染中的一些重要问题,特别是血清净化和污染细胞的救治问题都还没     

三种蛋白磷酸酶抑制剂对A_（23187）诱导的HL－60细胞程序性死亡的影响

钙离子载体Ａ２３１８７可以引起细胞内Ｃａ２＋浓度升高,并可诱导某些细胞程序死亡。本文发现１ｇ／ｍｌＡ２３１８７作用于ＨＬ－６０细胞４小时即可诱导程序死亡,以无毒性浓度的蛋白磷酸酶２Ｂ（ＰＰ２Ｂ）的抑制剂环抱菌素Ａ（ＣｓＡ）（０．５－３ｇ／ｍ１）预处理可以抑制Ａ２３１８７诱导的ＨＬ－６０细胞程序死亡,磷酸酶１、２Ａ、２Ｃ的抑制剂ｏｋａｄａｉｃａｃｉｄ（ＯＡ）和酪氨酸磷酸酶的抑制剂钒酸钠（ｓｏｄｉｕｍｏｒｔｈｏｖａｎａｄａｔｅ,ＳｏＶ）则无此效应。流式细胞术测定群体细胞内总Ｃａ２＋变化发现,ＣｓＡ不抑制Ａ２３１８７诱导的胞内Ｃａ２＋浓度升高,表明ＣｓＡ作用于Ｃａ２＋升高后的下游事件。     

Staurosporine引起正常和肿瘤细胞内Ca~(2 )和CaM水平发生变化

低剂量Staurosporine可以使正常细胞可逆地阻断于G1期,但对肿瘤细胞的周期运行不发生任何影响。本文利用显微光度术,测定了单个细胞内Ca~(2 )、活化钙调素和总钙调素的含量,结果表明:5ng/mL staurosporine作用于细胞18h,使正常细胞2BS G1和S期总CaM含量降低;而BGC-823细胞各周期时相总钙调素含量不发生改变;钙活化钙调素增加。Staurosporine阻断2BS细胞于G1期而不影响BGC-823的周期运行可能与Stauro-Sporine使2BS G1期细胞的钙调素降低以及抑制了2BS细胞的P~(107)磷酸化有关。     

三尖杉酯碱诱导HL-60细胞程序性死亡过程中的细胞质和细胞核出泡与染色质凝集

本文利用视频显微影像反差增强技术(VideoEnhancement Contrast,VEC)对三尖杉酯碱诱导的单个HL-60活细胞程序死亡(Apo-ptosis,Apo)全过程进行了观察,结果表明每个Apo细胞在染色质凝集前都要发生细胞核的出泡,而每一个核出泡又都是由相应的质出泡所诱导的,但并不是每个质出泡都能诱导核出泡,质出泡的次数远远高于核出泡,提示核、质出泡可能与染色质凝集有关,并且核、质出泡是程序死亡细胞形成Apo小体所必需的。进一步研究则说明核、质出泡与微丝解聚和重组有关。核、质出泡虽可加速细胞程序死亡过程中的染色质凝集,但并不是程序死亡细胞染色质凝集所必需的,提示HL-60细胞程序死亡过程中的核变化和质变化可能是相对独立的。     

培养介质pH和EGTA对水霉（Saprolegnia ferax）菌丝细胞肌动蛋白…

菌丝在ＰＨ５．０－８．０介南中维持顶端生长,ｈｏｄａｍｉｎ－Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ荧光探针显示在菌枯端都存在Ｆ－ａｃｔｉｎ的“帽子”结构,中入ＥＧＴＡ到培养介质中不影响线的顶端生长和ａｃｔｉｎ的“帽子”结构。值得注意的是：菌丝的Ｒｈｏｄａｍｉｎ－ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ荧光强度大小与菌丝顶端生长速率成正比;在含有或不含有ＥＧＴＡ的ＰＨ５．０培养条件下,菌丝的生长速率均很低,且后部颗粒状的荧光斑点消失;在     

平阳霉素(争光霉素A_5)对艾氏腹水癌细胞核酸代谢及其作用机制之探讨

艾氏腹水癌小鼠腹腔内注入平阳霉素1/6半致死剂量,腹水癌细胞DNA合成受到抑制。随注入药物时间之延长,DNA合成呈直线下降。但在同一剂量和时间条件下,对腹水癌细胞RNA合成率没有影响。通过放射自显影和MPV Ⅱ显微分光光度计,测定了S期细胞百分数和单个S期细胞中~3H-TdR放射自显影银粒,说明DNA合成率之抑制不是由于S期细胞百分数之降低,而是由于单个S期细胞中DNA合成强度之下降。进一步用MPV Ⅱ显微分光光度计对同一S期细胞中放射自显影银粒和孚尔根萤光定量测定,发现平阳霉素能引起早S期细胞积累;同时早S期细胞DNA合成抑制也较为明显。说明早S期细胞对平阳霉素较为敏感。其机制可能与早S期细胞合成之DNA富含GC组分有关。这与博莱霉素优先和富含GC组分的多聚核苷酸结合的结果是一致的。