青稞胆碱单加氧酶基因cDNA全长开放阅读框克隆及序列分析

甜菜碱是一种存在于多种生物体内的季胺类高效渗透调节剂,是由甜菜碱合成酶系催化的。为了研究甜菜碱合成酶系基因的表达和青稞高抗逆性之间的关系,我们以经200mmol/L NaCl预处理72h的青稞幼苗叶片及根中提取的总RNA为模板,采用RT-PCR技术,扩增得到全长1224bp,推测编码407个氨基酸残基的青稞胆碱单加氧酶(choline monooxygenase,cmo)基因cDNA全长开放阅读框(open reading frame,ORF),将其命名为hvcmo1并在GenBank中注册,获得登录号为GU810840。生物信息学分析表明,推定的氨基酸序列中含有与已报道高等植物胆碱单加氧酶氨基酸序列中的Rieske型铁硫簇结合区和单核铁结合基序等特征性结构域具有高度保守性的特征性结构域。与多种高等植物cmo基因进行序列同源性比对分析结果显示:hvcmo1的核苷酸序列与甜菜、盐角草、菠菜、辽宁碱蓬、拟南芥、玉米、水稻、高粱、羊草和大麦等植物的cmo mRNA编码区相似性分别为55.3%、55.4%、55.6%、5.9%、61.3%、82.6%、83.3%、83.4%、95.5%和99.5%。实验过程中,我们发现,青稞hvcmo1基因的表达必须被一定浓度的NaCl所诱导,说明hvcmo1可能在调节环境胁迫下青稞细胞内甘氨酸甜菜碱合成方面起着关键的作用,同时它可以作为研究环境胁迫下甘氨酸甜菜碱合成调节的模型。本结果为研究青稞甘氨酸甜菜碱合成酶系基因的诱导表达及其与青稞强抗逆性之间的关系奠定了基础。     

人凝血因子Ⅶ cDNA基因的克隆与鉴定

目的:克隆并鉴定人凝血因子ⅦcDNA基因。方法:采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法,从人胎肝总RNA中扩增人凝血因子ⅦcDNA基因,将其克隆入pGEM-T载体,对阳性克隆进行序列测定和分析。结果:经RT-PCR扩增和克隆,获得了人凝血因子ⅦcDNA基因,经序列分析表明,所克隆的基因序列正确。结论:本试验成功克隆了人凝血因子ⅦcDNA基因,为重组人凝血因子Ⅶ的研究奠定了基础。     

缩唇腹式呼吸训练联合弹力带抗阻运动对慢性心力衰竭患者运动耐力、心肺功能及生活质量的影响

摘要 目的：观察缩唇腹式呼吸训练对联合弹力带抗阻运动对慢性心力衰竭（CHF）患者运动耐力、心肺功能及生活质量的影响。方法：选取2020年4月~2021年7月期间我院收治的CHF患者83例。按照双色球法将患者分为对照组（n=41）和观察组（n=42）,对照组接受弹力带抗阻运动,观察组接受缩唇腹式呼吸训练联合弹力带抗阻运动。观察两组运动耐力、心肺功能、生活质量及1年内再住院率和1年内死亡率情况。结果：两组干预4周后躯体领域评分、情绪领域评分、其他领域评分和总分均下降,且观察组低于对照组（P<0.05）。两组干预4周后用力肺活量（FVC）、第1秒用力呼气容积（FEV₁）、最大自主分钟通气量（MVV）、左室射血分数（LVEF）升高,且观察组高于对照组（P<0.05）,而左室舒张末期内径（LVEDD）、左室收缩末期内径（LVESD）下降,且观察组低于对照组（P<0.05）。两组干预4周后6 min步行距离试验（6MWT）、峰值摄氧量（VO_2peak ）及无氧阈值（AT）升高,且观察组高于对照组（P<0.05）。观察组的1年内再住院率、1年内死亡率均低于对照组（P<0.05）。结论：弹力带抗阻运动联合缩唇腹式呼吸训练可促进CHF患者心肺功能改善,提高运动耐力,促进生活质量提升,同时还可降低1年内再住院率、1年内死亡率,疗效较好。     

多模态磁共振成像结合前列腺健康指数对前列腺癌Gleason分级的鉴别诊断价值

摘要 目的：探讨多模态磁共振成像（MRI）结合前列腺健康指数（PHI）对前列腺癌（PCa）Gleason分级的鉴别诊断价值。方法：选择2020年5月-2023年1月在我院经手术或穿刺活检证实为PCa的150例患者作为研究对象,根据患者病理结果并参照2019年国际泌尿病理学会（ISUP）PCa分级共识会议,将纳入研究病例分为低级别PCa组81例（Gleason 评分≤3+4）和高级别PCa组69例（Gleason 评分≥4+3）。另选取同时期内经病理学证实为前列腺良性增生的80例患者作为对照组。所有患者均完善多模态MRI、前列腺特异性抗原（PSA）等检查,并计算出前列腺健康指数（PHI）。采用Spearman秩相关分析多模态MRI参数和PHI水平与PCa患者Gleason分级的相关性。采用ROC曲线分析多模态MRI参数及PHI水平鉴别PCa患者Gleason分级的诊断效能。结果：对照组、低级别PCa组和高级别PCa组的ADC值和Tmax逐渐减小,而SImax和Rmax逐渐升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）。对照组、低级别PCa组和高级别PCa组PHI水平逐渐升高,差异有统计学意义（P＜0.05）。多模态MRI参数ADC值和Tmax与PCa患者Gleason分级呈负相关（r＝0.536、0.540,均P＜0.001）;多模态MRI参数SImax和Rmax与PCa患者Gleason分级呈正相关（r＝0.495、0.507,均P＜0.001）。PHI水平与PCa患者Gleason分级呈正相关（r＝0.514,P＜0.001）。以PCa患者Gleason分级作为状态变量,将多模态MRI参数和PHI水平联合分别作为检验变量,进行ROC曲线分析;结果显示,多模态MRI参数（ADC值、Tmax、SImax、Rmax）和PHI水平联合鉴别低级别PCa组和高级别PCa组的AUC为0.875（95%CI：0.775-0.976,P＜0.001）,敏感度和特异度分别为81.0%和83.7%,优于多模态MRI参数或PHI水平的单独应用。结论：多模态MRI参数联合PHI水平可作为区分低级别和高级别PCa的重要诊断依据,在术前Gleason分级的临床应用中具有一定参考价值。     

基于杨木（Populus sp.）的二代燃料乙醇技术研究进展

木质纤维素类生物质作为一种廉价且储量丰富的可再生原料，可通过预处理、酶解和微生物发酵等过程转化为纤维素燃料乙醇，近几十年来受到世界各国的广泛关注。杨木是一种人工广泛种植的速生硬木，主要用于造纸工业，而伴随产生大量枝桠等废弃物。因其富含纤维素和半纤维素组分，被认为是纤维素乙醇生产的优良木质纤维素原料。聚焦于杨木在纤维素乙醇生产中的应用，介绍了杨木的组成及结构特点，重点综述了杨木在预处理技术、预处理原料的酶解、微生物发酵等方面的研究进展。最后，归纳总结了限制杨木在纤维素乙醇应用中的技术障碍及困难，进而分析提出了相应解决对策并展望了其应用前景。     

Nodal基因5''末端侧翼序列增强子的分析

Ｎｏｄａｌ基因属于ＴＧＦ－β超家族，它在小鼠胚胎早期发育的中胚层形成过程中起着重要的作用。Ｎｏｄａｌ基因缺失的小鼠由于没有中胚层的形成导致死亡。分析了Ｎｏｄａｌ基因的侧翼序列。利用荧光素酶为报告基因，构建了一系列含有侧翼序列亚克隆及基缺失体报告基因质粒，并转化了Ｆ９细胞。分析这些亚克隆及其缺失体对报告基因活性的影响。在Ｎｏｄａｌ基因上约－２ｋｂ处有一个增强子元件存在并鉴定了它的发细胞种类特异性。     

全生命周期视角下清洁能源碳中和贡献及区域差异

清洁能源建设是全球碳中和的重要策略，在清洁能源系统的全生命周期产业链中，从原材料生产到报废处理阶段都会直接或间接消耗化石能源。各清洁能源在不同区域建设所消耗的能源存在差异，导致各地清洁能源碳中和贡献值也存在不同。本文运用文献计量的方法，针对光伏发电、风电、水电等清洁能源，整理各地区清洁能源建设能耗，同时考虑到清洁能源运营期间对于土地碳库的损耗，分析当前研究热点、发展现状及趋势、碳排放差异等，归纳不同区域的碳中和贡献。目前，中国各清洁能源碳排放强度显著低于世界平均水平；在陆上风电、海上风电、水力发电以及光伏发电四大领域，中国的平均碳排放强度比世界平均水平分别低28.8%、18.2%、10.1%、16.7%。针对后续清洁能源碳中和研究，建立统一的全生命周期评价体系、依据自然背景差异提出针对性建设策略、开展清洁能源生态效益评价、建立清洁能源传输网络体系十分重要。     

高寒草地燕麦根际解植酸磷促生菌鉴定及其优势菌假单胞菌属菌株功能特性

旨为从高寒草地燕麦根际定向筛选解植酸磷微生物资源，筛选促生潜力菌株，分析植酸酶编码基因。采用国际植物研究所磷酸盐生长培养基（NBRIP）分离及筛选菌株，16S rRNA基因鉴定其分类地位，并测定菌株植酸酶活性及促生特性，结合简并PCR和高效热不对称交错PCR(hiTAIL-PCR)扩增植酸酶基因完整序列，并进行生物信息学分析及异源表达。共获得107株菌株，其中51株能在NBRIP培养基上形成清晰溶磷圈，鉴定为2门10科11属，以假单胞菌（Pseudomonas）为优势菌。14株不同种假单胞菌均检测出植酸酶活性，具有溶解有机/无机磷、分泌IAA(3-indoleacetic acid)、固氮及拮抗植物病原菌的促生活性。获得了3株菌株的植酸酶（PHY65、PHY101和PHY131）序列，预测为β-螺旋植酸酶（β-propeller phytases,BPPhy）家族蛋白，其中重组PHY65的比活性为28.2 U/mg。研究结果可为解磷生物菌剂的研发与利用提供优良菌株资源，为植酸酶的生产应用提供理论基础。