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目的:FGF2是肿瘤血管新生过程中最重要的因子之一,因此通过制备抗FGF2人鼠嵌合抗体中和其发挥作用,以达到抑制肿瘤生长的目的。方法:利用分泌抗FGF2抗体的杂交瘤细胞株IgG9B9和人B淋巴细胞,分别克隆抗体轻链可变区VL、重链可变区VH和人重链恒定区CH基因,从pComb3λ载体中扩增出人λ 链恒定区CL基因,通过重叠PCR,将VL,VH和CL,CH片段分别连接形成嵌合抗体的轻链L和重链H,将L/H链以单独构建或串联于同一载体的方式,构建抗FGF2嵌合抗体表达载体,并通过调控元件WPRE优化载体、共转染促生长因子aFGF以及调整表达温度等方式提高嵌合抗体在真核细胞中的表达。结果:成功构建了优化表达载体PLexm-WPRE、PLexm-aFGF;L、H链基因也成功构建,并以L、H或L-F2A-H(2A连接肽将L和H连接起来)的方式分别成功连接到PLexm,PLexm-WPRE载体中。转染细胞上清的ELISA鉴定结果表明,L/H链单独构建要比串联构建的方式具有更高的表达水平,WPRE能有效促进抗体的表达而aFGF并不能促进其表达,与31、37℃相比,33℃时抗体的表达量最高,同时嵌合抗体表现出了很好的结合活性及中和活性,竞争IC50=6.25μg/ml。通过亲和层析获得了高纯度的抗FGF2嵌合抗体。结论:在33℃下,人鼠嵌合抗体基因在WPRE存在下表达量最高,且与抗原FGF2有很好的结合活性及中和活性,为临床应用奠定了基础。 相似文献
33.
石榴合心皮雌蕊和花序发生的研究蔡永立,房丽艳(安徽农业大学基础部,合肥230036)(合肥经济技术学院,合肥230057)石榴(Punicagranatum)原产于中亚、地中海沿岸,为石榴科的单属、单种植物。由于栽培已久,不同品种的花序类型和花部结构... 相似文献
34.
金属硫蛋白的研究进展及应用前景 总被引:8,自引:0,他引:8
金属硫蛋白(Mctallotheonein,简称MT)是一类广泛存在于生物体内的低分子量、富含CyS、能被金属诱导的金属结合蛋白.自从1957年hooshes等人t‘]在马肾脏中首次发现MT以来,人们对不同来源的MT进行了较系统的研究.鉴于MT具有广泛的应用前景,现将有关MT的研究进展作简要综述.!MT的分类和命名1.IMT的分类根据MT的结构差异,一般将其分成3类I’]第1类:MT的氨基酸序列中的半就氨酸位置与最先从马肾中分离的MT的氨基酸序列中的半脱氨酸位置紧密相关的多肽.所有哺乳动物的MT… 相似文献
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论述了如何改进腺病毒载体以提高其有效性和安全性.腺病毒载体是将基因转移到体内多种不同细胞的有效运载工具.第一代腺病毒载体已证明在基因治疗中有很好的前途, 虽然它在有效性和安全性方面还存在不足之处,但这些局限正在被逐步克服. 相似文献
36.
目的:探讨序贯血液净化(SBP)对严重创伤合并多器官功能障碍综合征(MODS)患者血清炎性因子及血流动力学的影响。方法:选取2015年7月-2017年5月第三军医大学新桥医院收治的严重创伤合并MODS患者48例,根据患者的治疗方式分为对照组21例以及观察组27例,其中对照组接受常规内科治疗,观察组在对照组的基础上进行SBP治疗,在治疗前后对两组患者的肝肾功能、血清炎性因子水平、血流动力学指标进行检测,并对比两组患者ICU住院时间、病死率、机械通气时间。结果:治疗后两组患者的总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平均较治疗前降低,且治疗后观察组患者各指标低于对照组(P0.05);治疗后两组患者血清C反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均较治疗前显著降低,且治疗后观察组患者各炎性因子水平显著低于对照组(P0.05);治疗后两组患者的心率(HR)、中心静脉压(CVP)较治疗前降低,平均动脉压(MAP)、心脏指数(CI)较治疗前升高,且治疗后观察组患者的HR、CVP显著低于对照组,MAP、CI显著高于对照组(P0.05);观察组患者的ICU住院时间、机械通气时间均较对照组缩短,病死率较对照组明显降低(P0.05)。结论:SBP应用于严重创伤合并MODS患者的治疗可以有效减轻患者的炎性反应,并可以显著改善患者血流动力学以及预后。 相似文献
37.
目的 构建能在大肠埃希菌(E.coli)和铜绿假单胞菌(PA)间高效接合转移的质粒.方法 通过NCBI blastn程序分析质粒pCVD442接合反应起始序列oriT,PCR扩增oriT后插入pMD18-T,再将pMD1 8-oriT转化E.coli DH5α,经酶切、测序验证后用SmaI和HindIIII双酶切亚克隆至质粒pUCP24,获得质粒pUCP24T,将pUCP24T转化E.coli后研究pUCP24T从E.coli到PA的接合效率和质粒稳定性等.结果 成功构建pUCP24T重组质粒,在E.coli和PA的接合实验中,E.coli(pUCP24T)-PA共培养2h的接合效率平均为3.588×10-2,按12 h一代连续9代继代培养108 h,抗生素压力下质粒保存率为98.29%,无抗生素的培养基中质粒保存率为21.76%.结论 成功构建高接合效率的接合转移质粒pUCP24T. 相似文献
38.
三峡水库及香溪河库湾理化特征的比较研究 总被引:6,自引:0,他引:6
根据2003年6月三峡水库初期蓄水后对香溪河库湾的常规监测,对该水域的理化特征及其动态进行了分析,并与三峡水库库首的数据进行了比较研究。结果显示库湾TN、NO3-N浓度要显著低于库首,前者两周年平均值为1.29mg/L,0.88mg/L,后者两周年平均值为1.62mg/L,1.22mg/L。而PO4-P则是库湾显著高于库首,并且在7—9月库首的TP/PO4-P有显著提高。结果同时表明库首的水土流失较严重,而库湾则有较好的水土保持。最后对TSIM的计算结果表明,由于TP、TN都处于高水平,库首呈现中营养化(TSIM>37),而库湾则呈现严重富营养化(TSIM>53)。 相似文献
39.
目的:为人工促进三亚退化山地植被的恢复提供树种选择依据。方法:通过土壤分析方法比较研究三亚退化山地7个乡土树种早期的土壤肥力状况。结果:造林树种区域的土壤含水率、土壤容重、土壤电导率均显著高于非造林地。7个乡土树种的土壤有机质(12.85~20.89 g·kg-1)、全氮(0.10~0.15 g·kg-1)、微生物生物量碳(176.94~429.36 mg·kg-1)和氮含量(22.61~38.47 mg·kg-1)均高于非造林地,反映造林树种可有效改良土壤肥力,但不同树种对土壤养分的吸收存在差异。海南菜豆树(Radermachera hainanensis)和五月茶(Antidesma bunius)土壤碱解氮含量显著高于其它树种,且微生物碳和氮含量均较高。PCA分析结果表明,土壤有机质、碱解氮、速效磷和土壤微生物生物量氮为主要影响因子。海南菜豆树最有利于土壤肥力的改善,红花天料木(Homalium ceylanicum)次之,岭南山竹子(Garcinia oblongifolia)最小。结论:该... 相似文献
40.
浙江省植被,在全国植被区划中属“中亚热带常绿阔叶林地带”。据《中国植被》一书的划分,浙江省有三个“植被区(Province)”通过,即(1)浙皖山丘、青冈苦槠林栽培植被区;(2)浙闽山丘、甜槠,木荷林区;(3)浙南、闽中山丘,栲类、细柄蕈树林区。我们对这三区,研究了其中植被与生态条件的特点,区划为五个植被片(District)(图1)。关于“植被区”的划分,我们以为主要应依据其优势植物群系及其组合的特点;而植被片的划分,主要应依据其优势植物或群丛及其组合的特点,并结合它的生态条件来考虑。 相似文献