中科院古脊椎动物与古人类研究所中心试验室

~~中科院古脊椎动物与古人类研究所中心试验室@张文定     

自然感染途径建立肺炎链球菌感染性肺炎小鼠模型

目的探索自然感染途径制备肺炎链球菌感染性肺炎小鼠模型的方法,为肺炎链球菌性肺炎的相关研究提供实验基础。方法肺炎链球菌标准菌株(CMCC 31203)经血平板培养18 h后配成2麦氏浊度。小鼠浅麻醉状态下,破损鼻黏膜,滴注一定量肺炎链球菌菌液。于3、7、14和21 d分别处死小鼠,取肺脏进行组织病理学观察,确定肺炎小鼠模型制备的最佳方式。结果鼻黏膜破损组小鼠3 d时肺泡间隔内毛细血管扩张,肺泡腔内以红细胞和纤维素渗出为主;7 d时病变以纤维素和中性粒细胞浸润为主;14 d时肺泡腔内渗出减少,炎症开始减轻;21 d时肺脏外观趋于正常,肺泡腔内渗出物质基本溶解吸收。结论以3×107CFU的肺炎链球菌菌液通过破损的鼻黏膜感染7 d时可以制备出比较典型、稳定的肺炎小鼠模型。     

透骨川椒汤在妇科慢性盆腔炎治疗中的临床疗效观察

目的：探讨透骨川椒汤在妇科炎症治疗中的应用价值。方法：收集妇科慢性盆腔炎病例508例,分为治疗组和对照组各254例,两组除相同的基础治疗外,治疗组加用透骨川椒汤治疗,并对比两组疗效。结果：治疗组治愈率为50.4%,明显高于对照组的28.3%（P〈0.05）。治疗组与对照组的治疗无效率比较无显著性差异（P〉0.05）。结论：透骨川椒汤在治疗妇科慢性盆腔炎效果可靠,有着较好的应用前景。     

用超微细胞化学定位技术揭示ATP酶 在紫茎泽兰高温适应性中的作用

【背景】外来入侵植物紫茎泽兰自然演化出耐高温种群,其适应机制与各种生理代谢有关。【方法】本文从超微细胞化学水平,对紫茎泽兰抗高温种群、敏感种群ATP酶活性定位,明确其在高温适应性中的作用,试图阐明该草的生态适应机制。【结果】正常情况下,紫茎泽兰ATP酶主要定位于细胞壁及细胞间隙周围的细胞壁表面;经40 ℃高温处理后,在不同的处理时间下,抗性、敏感种群之间ATP酶的活性表现出明显差异,其中以处理12 h时差异最大,具体表现为抗高温种群的ATP酶活性明显高于敏感种群,ATP酶的定位点除细胞壁外,在细胞膜上也呈现大量的分布,而敏感种群在处理12 h时的酶活性明显降低,只在细胞壁上有零星的分布。处理24 h时,敏感种群叶片已完全萎蔫,细胞结构毁坏,细胞膜破损;而抗高温种群叶片仍然完好,细胞膜上仍有ATP酶分布。【结论与意义】经40 ℃高温处理后,紫茎泽兰抗高温种群ATP酶活性明显高于敏感种群,初步认为紫茎泽兰对高温的适应性与ATP酶活性相关。本研究为进一步阐明与紫茎泽兰适应性相关的入侵机理提供了资料。     

培养方式对纤细裸藻脂肪酸与氨基酸含量的影响

以纤细裸藻(Euglena gracilis)为实验对象, 研究了培养方式对纤细裸藻生长、脂肪酸、氨基酸的影响, 并探讨了可能的作用机理。结果表明, 与其他培养方式相比, 光诱导可提高纤细裸藻总脂肪酸、单不饱和脂肪酸(MUFA)和多不饱和脂肪酸(PUFA)含量, 分别为2.69、0.52和1.475 g/100 g; 饱和脂肪酸(SFA)含量由高到低依次为异养组、光诱导组、自养组和兼养组, 其中异养组含量达1.008 g/100 g; 游离氨基酸含量由高到低依次为光诱导组、兼养组、异养组和自养组, 分别为381.57、358.1、330.17和231.1 mg/g; 兼养组必需氨基酸含量最高, 为134.37 mg/g。实验结果说明光诱导培养可显著提高纤细裸藻总脂肪酸、MUFA和PUFA含量(P<0.05); 异养培养可显著提高纤细裸藻饱和脂肪酸含量(P<0.05); 兼养培养可显著提高纤细裸藻必需氨基酸含量(P<0.05)。研究结果为阐明纤细裸藻对不同培养方式的响应提供了科学依据, 同时为其开发应用提供数据支持。     

苍术素对大鼠心脏正性肌力的作用及其机制*

目的: 研究中药苍术的有效成分苍术素(Atractylodin)的正性肌力作用及其机理。方法: 随机选取6只雄性SD大鼠进行在体压力-容积环 (P-V loop)实验,加药前为Control组,经腹腔注射苍术素(3 mg/kg)后为苍术素组(自身对照),分析6只雄性大鼠加药后对大鼠左心室心输出量、容积及动脉压的作用;大鼠离体心脏灌流实验中,依次灌流给药:第一部分为Control→ 0.1→1→10 μmol/L苍术素浓度梯度灌流,第二部分为Control→200 nmol/L H89 (PKA抑制剂)→200 nmol/L H89+10 μmol/L 苍术素,第三部分为Control→500 nmol/L KN-93 (CaMKII抑制剂)→500 nmol/L KN-93+10 μmol/L 苍术素,第四部分为Control→10 nmol/L Calyculin A (PP1, PP2A抑制剂)→10 nmol/L Calyculin A+10 μmol/L 苍术素,加药前的正常空白组为Control组,分析每部分各6只雄性大鼠的组间左心室发展压的变化;在大鼠心肌细胞钙释放实验中,分组、给药的方法和浓度同离体心脏实验,分析来源于6个雄性大鼠6个左心室心肌细胞组间钙释放幅值的变化。结果: ①P-V loop实验表明:与Control组相比,苍术素组(3 mg/kg)腹腔注射30 min后,显著增加大鼠心输出量、搏出功及心率(P＜0.05),降低动脉舒张压(P＜0.05),而对收缩压无明显影响;②离体心脏实验表明:与Control组相比,苍术素组(0.1, 1, 10 μmol/L)灌流10 min后,能显著增加大鼠离体心脏左心室发展压(LVDP) (P＜0.05),其作用能被H89组(200 nmol/L)所阻断;③心肌细胞钙释放实验表明:与Control组相比,苍术素组(10 μmol/L)灌流10 min后,基于肌浆网钙泵(SERCA2a)显著增加大鼠心肌细胞钙释放幅值(P＜0.05),其作用能被H89组(200 nmol/L)所阻断。结论: 苍术素具有正性肌力作用,其血流动力学特点表现为降低在体大鼠动脉舒张压而不增加收缩压,苍术素的正性肌力作用机制是通过PKA-SERCA2a通路发挥的。     

秦岭中段野生动物多样性的红外相机监测数据库平台介绍

秦岭地处我国中西部, 生物地理位置重要, 拥有丰富的生物多样性, 有大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)、秦岭羚牛(Budorcas bedfordi)、金丝猴(Rhinopithecus roxellana)和朱鹮(Nipponia nippon)等4个秦岭森林旗舰物种, 被称为“秦岭四宝”。利用红外相机技术开展秦岭野生动物的非损伤性监测不仅可以为秦岭山系提供物种名录信息, 还可以为了解秦岭野生动物的行为和活动格局提供科学数据。清华大学环境学院生态团队自2009-2020年在秦岭中段南坡先后实施了7个项目, 对秦岭南坡的4个保护区进行了野生动物监测, 面积达1,113 km ²(26.5 km × 42 km), 红外相机位点数267个, 相机日数152,160天, 共获取红外相机照片855,260张。共鉴定出27种野生兽类和63种野生鸟类, 并应用这些照片数据开展了信息挖掘工作, 对野生动物行为、稀有物种、与生境的关系, 以及人为活动对野生动物的影响等领域进行了研究, 已取得部分成果。在此基础上建立了“秦岭中段野生动物多样性的红外相机监测数据库平台”, 供团队内部及合作者使用。通过10年的监测, 我们提出未来研究建议: (1)对于非常偶见的物种, 还需要更长的时间并在更多样化的生境布设相机, 以获取更多影像数据评估其现状; (2)数据库需要在更大程度和深度上进行信息挖掘, 尤其在种间关系、物种-生境关系、种群动态等方面; (3)对典型大种群数量的物种(如秦岭羚牛和野猪Sus scrofa)及食物链顶端大型捕食动物(如金钱豹Panthera pardus)进行种群动态研究, 为整个秦岭生态系统的健康持续提供科学支撑; (4)利用数据库的数据及今后红外相机监测数据进行野生动物疾病的发生发展监测研究。     

胞外三磷酸腺苷通过一氧化氮调节镉诱导的氧化压力和细胞死亡

采用液体悬浮培养方法,研究胞外三磷酸腺苷(ATP)通过一氧化碳(NO)调节镉诱导对烟草(Nicotiana tabacum L.)悬浮细胞氧化压力和死亡水平的影响。结果显示,镉离子(Cd^2+)可以以剂量依赖的模式引起烟草悬浮细胞氧化压力和死亡水平的上升,而施加外源ATP可有效缓解Cd^2+诱导的氧化压力和细胞死亡。进一步研究发现,和外源ATP的缓解作用相似,NO的供体硝普钠(SNP)同样可以缓解Cd^2+诱导的氧化压力和细胞死亡水平的上升;且NO合成抑制剂(L-NAME)可部分解除外源ATP的缓解作用。研究结果表明外源ATP可通过NO调节镉诱导的氧化压力和细胞死亡。