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一种快速可靠的3’,5’-cAMP 磷酸二酯酶活力测定法 总被引:3,自引:0,他引:3
磷酸二酯酶(PDE; E.C.3.1.4.17.)催化cAMP分解为5′-AMP,它与质膜上催化cAMP生成的腺苷酸环化酶配合,共同控制细胞内cAMP含量.因此,观察PDE活力变化对于研究环腺苷酸在细胞代谢调控中的作用具有重要意义.PDE活力测定多采用放射性同位素标记的cAMP为底物.由于一般粗酶样品中同时存在多种5′-核苷酸酶,使5′-AMP分解而引起误差,因此常将经PDE作用后生成的5′-AMP转化为腺苷测定.基本反应如下.3′,5′-cAMP 5′-AMP 腺苷 Pi 相似文献
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用硫酸右旋糖酐沉淀法和超速离心法从正常人血浆制备高密度脂蛋白(HDL)。脱脂后经制备性等电聚焦和Sephacryl S-200层析分离纯化载脂蛋白A-Ⅱ(apolipoprotein A-Ⅱ,简称apoA-Ⅱ)。经鉴定SDS-PAGE呈一条谱带,其亚基分子量为8700±280(n=4),等电点为4.80—5.17,氨基酸组成分析不含组氨酸和精氨酸,与抗apoA-Ⅱ血清发生特异免疫反应。 相似文献
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胰岛素对大鼠载脂蛋白AⅠ,CⅡ和CⅢ基因表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
以sprague-Dawley大鼠为实验对象,研究胰岛素对大鼠肝脏及小肠apoAⅠ、CⅡ和CⅢ mRNA相对含量的影响。RNA斑点杂交技术分析表明,注射胰岛素后12h,大鼠肝脏和小肠apoAⅠ和CⅡ以及肝脏apoCⅢ mRNA相对含量均显著下降,小肠apoCⅢ mRNA相对含量无变化。 相似文献
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用纯化的嗜麦芽假单胞菌(以下简称细菌)hCG结合蛋白制备多克隆抗体。间接免疫沉淀实验证明,该抗体能识别细菌hCG结合蛋白-[(125)~Ⅰ]hCG复合物;配体印迹分析及免疫印迹分析发现,该蛋白能与[(125)~Ⅰ]hCG发生特异的结合,其结合位置与抗体识别位置一致,为70kD蛋白带;同时,该抗体不能特异地抑制细菌hCG结合蛋白、大鼠睾丸或卵巢组织细胞膜制剂与[(125)~Ⅰ]hCG结合。 相似文献