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目的探讨均匀设计在候选内参基因RT—qPCR实验条件优化中的应用,有助于后期实验筛选不同状态下THP~1细胞的稳定内参基因。方法以THP-1细胞cDNA为模板,eDNA模板量、引物浓度和退火温度3个因素为影响因素,应用均匀设计3因素8水平,探索影响候选内参基因RT-qPCR的扩增条件,检测不同实验条件下的扩增效果,在最优扩增条件下建立候选内参基因定量扩增的相对标准曲线,并检测扩增效率。结果通过均匀设计,完成对eDNA模板量、引物浓度和退火温度3因素8水平的实验条件优化,建立候选内参基因RT—qPCR检测的最佳组合为eDNA模板量0.5big、引物浓度200μmol/L、退火温度55℃。结论本实验选用均匀设计优化RT—qPCR实验条件,筛选出THP-1细胞候选内参基因RT—qPCR的最优实验条件。均匀设计适合于本实验研究多因素多水平试验条件的配比。 相似文献
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为了更好地保护和开发我国新疆的牦牛遗传资源,对新疆克孜勒苏柯尔克孜地区帕米尔牦牛的遗传多样性及群体遗传结构进行了分析。对3个帕米尔牦牛类群的线粒体COⅠ基因序列进行测定,分析其多态性,构建系统进化树。研究结果显示,帕米尔牦牛COⅠ基因序列全长为1 048 bp,共检测到13个变异位点,其中单态突变位点9个,简约信息位点4个。在帕米尔牦牛类群中共检测出10种单倍型,平均单倍型多样性(haplotype diversity,Hd)、平均核苷酸多样性(nucleotide diversity,Pi)分别为0.762和0.001 64。3个类群间平均遗传距离为0.004 30,且苏木塔什牦牛与布伦口牦牛的遗传距离最小(0.003 72)。结果表明,帕米尔牦牛具有丰富的遗传多样性,但各类群之间遗传分化不明显,且经人工或自然选择后群体发生了扩张和基因交流的情况。研究结果为新疆帕米尔牦牛的遗传改良及新疆优良畜禽遗传资源的保护和开发提供了科学依据。 相似文献
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竹韵 《中国生物工程杂志》2006,26(3):21
受让人专利号授权国家主题Acell,Inc.6,861,074U.S.A组织再生成分的制作方法和使用方法Curis,Inc.6,861,404U.S.A慢性肾脏病的治疗DSMFine,ChemicaisAustriaNFG.GmbH&Co.KG6,861,243U.S.A包含编码羟基腈裂合酶DNA序列的基因,由该基因而获得的重组蛋白及其和羟基腈裂合酶具有的活性使用GeneticsInstitute,LLC6,861,055U.S.A人GDP甘露糖4,6脱水酶GenzymeGlycobi OlogyResearchInstitute,Inc.6,861,242U.S.A产生高质量的磷酸化溶酶体水解酶的方法HumanGenomeSciences,,Inc.6,861,226U.S.A人子宫特定类固醇结合因子Ⅰ,Ⅱ… 相似文献
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