NH_4~+离子和Cl~-离子影响谷氨酰胺发酵的研究

在微酸性条件下,当有高浓度铵盐存在时,谷氨酸发酵将转向谷氨酰胺发酵。本文阐述了用硫酸铵和氯化铵作氮源时的不同发酵结果,以及用氯化铵时NH_4~+离子和Cl-离子对发酵的影响。     

转座子挽救法对苜蓿中华根瘤菌与耐盐有关基因的定位

用含Tn5转座子的质粒pRL1063a诱变苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)042BM,得到盐敏感突变株042BML-2。采用转座子挽救法对Tn5插入位点两边的序列进行克隆与测序,获得了1179bp的转座子插入位点侧翼DNA序列。在GenBank中进行序列同源性和基因定位分析,结果表明：转座子插入在一个功能未知的基因内部,此基因长6270bp。研究证明：该基因与042BM的耐盐性有关,并定名为rtsC。氨基酸疏水性分析表明,在RtsC蛋白的N端有两个跨膜区,该蛋白与细菌趋化性相关蛋白的功能域有同源性。并对RtsC蛋白在苜蓿中华根瘤菌042BM耐盐性中的作用进行了讨论。     

生物样品制备的冷冻技术

在分子水平上探讨生物组成,用电子显微镜(EM)与生物化学和X线衍射等方法有着根本的差异。采用电子显微镜可以探讨活细胞及活组织是以怎样的形式存在并起作用的。如何便样品保存得近于活体状态,并能放     

丛毛单胞菌CNB-1合成PHA及相关基因的研究

分析了丛毛单胞菌(Comamonas sp.)CNB-1菌株在不同条件下合成聚羟基烷酸(polyhydroxyalkanoic acids,PHAs)的组分和含量,同时克隆了与PHA合成相关的基因。结果表明,该菌可以多种短链有机酸及醇类为碳源合成PHA多聚物或共聚物,以戊酸和1,4-丁二醇为底物时,可达菌体干重的57%;同时发现小分子醇类的存在能显著促进PHA的合成,推测与醇类氧化过程中提供了更多的还原力有关。为了克隆相关基因,利用已知phaC的保守区简并引物筛选基因组文库,将得到的阳性克隆质粒测序,发现phaC、phaA、phaB组成一个基因簇phaC-A-B。将phaC、phaA、phaB连接到pET载体在E.coli中共表达,重组E.coli菌株能合成PHA;将这3个基因单独连接到pET载体,在E.coli中表达后检测到相应酶活,分别约为原始菌株的4.1、71和2882倍。     

水稻种子发芽过程中活性物质的研究

研究了水稻种子在不同的发芽条件下维生素Ｃ、Ｂ１、Ｂ２、Ｅ,谷胱甘肽,β－胡萝卜素等活性物质含量的变化。结果表明：维生素Ｃ、谷胱甘肽、维生素Ｂ２的含量随着发芽时间的延长而呈线性增加;在发芽的４８ｈ内,维生素Ｂ１的含量是增加的,而后逐渐降低;维生素Ｅ的含量逐渐增加至第三天时达到最大值,以后略有下降;样品中未检测出β－胡萝卜素;光照、醋酸钠、葡萄糖可显著提高维生素Ｃ的含量,其中醋酸钠的效果最佳;硫酸钠提     

江苏省古生物学会举行古生物磨片、绘图、分析技术经验交流会

古生物磨片、绘图、分析技术是古生物学研究工作的重要一环,也是反映研究成果水平的重要标志之一。几十年来我省的有关技术人员刻苦钻研、勤奋工作,为提高我国古生物研究成果的质量,作出了重要贡献。在取得可喜成绩的基础上,我省广大古生物技术人员,迫切要求总结经验,探讨和学习新技术、新方法,以利于进一步做好工作,积极培养新生力量,为我国古生物学研究赶超世界先进水平贡献力量。为此,省古生物学会于1983年6月30日至7月5日在连云港市召开了古生物磨片、绘图、分析技术经验交流会。参加会议的代表来自我省地质、石油、煤炭、科研、教育、林业等系统的代表六十余人。使我们感到高兴的是还有来自北京、上海、安徽、浙江、江西、四川、湖北、贵州、广西、甘肃等省的十多位同志列席了我们的会议。江苏省古生物学会理事长穆恩之教授致开幕词,     

黄色短杆菌ATCC 14067产L-谷氨酰胺的发酵条件

L-谷氨酰胺是L-谷氨酸的r-羧基酰胺化,其分子式为H_2N·OC·CH_2·CH_2·CH(NH_2)·COOH,作为药物,它可以用来治疗神经衰弱,胃和十二指肠溃疡等疾病,疗效明显。我们用谷氨酸产生菌黄色短杆菌ATCC 14067,通过改变发酵条件,使谷氨酸发酵转向谷氨酰胺发酵。发酵65小时,在每毫升发酵液中积累了30mg的谷氨酰胺。     

细菌分类——Ⅳ.遗传方法

细菌分类采用遗传特征是比较近期的事。廿世纪五十年代中期,发现了细菌基因的转移,而且Watson和Crick用实验证明了DNA的碱基顺序中遗传信息的分子基础。从那时起,分析遗传物质的物理化学技术的发展,以及对细菌作为遗传工具的开发,积累了对细菌分类有意义的材料。     

盐激条件下快生大豆根瘤菌的渗透调节

快生大豆根瘤菌(Rhizobium fredii)RTl9在基本培养基中能耐800 mmol/L。NaCl。该菌株在对数生长后期,突然加入高浓度NaCl,使其培养液中的NaCl最终浓度为1000mmol/L。5分钟后,细胞内谷氨酸的含量便急剧增加,而且脯氨酸也大量积累。50分钟后,它们的含量分别达到未受盐激的(对照)4倍和3.8倍。在盐激条件下,RTl9的谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酸合成酶(GOGAT)的活性比对照明显提高。其中GS活性的提高主要是由GSⅡ引起的,GSI变化不大。将这两种酶直接暴露于1000mmol/LNaCl,50分钟后,酶活性降至原来的70％,并未完全失活。聚丙烯酰胺凝胶双向电泳的分析表明,若干蛋白质在盐激后消失,而且发现两种蛋白质是新合成的,其分子量和等电点(MW/pI)分别为110 kD/4.3和76 kD/6.5。     

大肠杆菌表达的人重组IL-3的纯化

本文继大肠杆菌表达含凝血酶切点的人重组IL-3融合蛋白成功的基础上进一步探讨了天然型rhIL-3的纯化。超声破碎细菌细胞得包涵体,经洗涤处理可使包涵体纯度达90％,用8mol/L尿素变性溶解包涵体沉淀后直接稀释复性,再超滤浓缩、凝血酶消化,释放天然型rhIL-3。经DEAE Sepharose Fast Flow和Sepharcyl-100 HR层析得到天然型IL-3,纯度达96％,回收率20％以上,具有刺激正常人骨髓细胞形成集落的活性。本实验为大批量重组IL-3的生产创造了条件。