福林霉素生物合成基因簇的组装和异源表达

[目的]本研究旨在以来源于林可链霉菌NRRL2936中的nosokomycinB2的生物合成基因簇(noso-BGC)为基础,组装获得完整的福林霉素生物合成基因簇(pho-BGC),再利用异源表达策略,激活pho-BGC的表达并通过底盘宿主的优选实现福林霉素发酵产量的提升.[方法]首先,在林可霉素基因簇缺失突变株JCK...     

有机相脂肪酶催化合成乙酸肉桂酯

对有机相中酶法催化合成乙酸肉桂酯的转酯化反应进行研究。结果发现:Candida anatarctic脂肪酶(Novozyme435)、根霉脂肪酶(Rhizopus niveus lipase)和荧光假单胞菌脂肪酶(Pseudomonas fluore lipase)均有较好的催化活性。同时考察各反应参数(温度、反应溶剂、体系水活度、酰化剂类型、肉桂醇与酰化剂摩尔比、肉桂醇浓度等)对脂肪酶Novozyme435合成乙酸肉桂酯反应的影响,确定了反应体系最优工艺条件:在10 mL甲基叔丁基醚中,肉桂醇200 mmol/L,n(肉桂醇)∶n(乙酸乙烯酯)=1∶1.5,初始水活度αw=0.84,温度35℃,酶加量0.02 g,反应3 h后肉桂醇转化率可达到99%,产物经质谱(MS)鉴定。固定化酶经过10个批次反应,反应转化率都保持在90%以上。     

副干酪乳杆菌的功能特性及其应用研究进展

副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)属于乳杆菌属,是一种革兰氏阳性细菌。它不仅具有抑菌和免疫调节性能,对人体有很好的益生作用,而且可以用于代谢合成重要的生物化学品,近几年引起了国内外的关注。本文对副干酪乳杆菌的菌株筛选鉴定、功能特性及其在微胶囊技术、L-乳酸生产、苯乳酸合成等方面的应用研究进展等进行了综述,同时对其研究发展方向进行了探讨。     

羊膜卵和羊膜的实验观察

羊膜动物是真正的陆生脊椎动物,它们所产的卵称为羊膜卵。羊膜卵最早于爬行动物中的出现在脊椎动物进化上是一个巨大的突变,其生物学意义足以同颌的出现或离水登陆相提并论。羊膜的结构和发育特点,尤其是胚胎期形成的羊膜、绒毛膜和尿囊等胚膜,使羊膜动物在个体发育中摆脱对于水的依赖起到极其重要的作用,并有了陆地生活的可能性。本实验通过鸡蛋的解剖和观察,了解羊膜卵的构造及加深羊膜对陆生意义的认识。     

生物教材改革中的几个问题

党的教育方針要求把青年一代培养成“有社会主义觉悟的有文化的劳动者,也就是既懂政治,又有文化,既能从事脑力劳动,又能从事体力劳动,全面发展的共产主义新人”。为了达到这个目的,我們的教育必須为政治服务,必須与生产劳动相结合。因此,教材应当体现教育方针的要求,体現生产发展的要求。应当随着社会政革、生产跃进、技术革命的发展而不断改进。几年来,生物教材是有了很大改进。建国不久,     

国产贝母属的新分类群(续)

本续篇记载了新种15个,新变种10个,新组合1个,新变型2个,新记录组1个,新组4个,新系6个。喜马拉雅贝母新种图1     

Nonomuraea candida HMC10T中新结构套索肽noncaromin生物合成基因簇的克隆及异源表达

【目的】本研究旨在通过定向克隆菌株Nonomuraea candida HMC10^T中一个新的Ⅱ型套索肽类生物合成基因簇,通过在放线菌底盘宿主中的异源表达,获得新结构套索肽noncaromin,并完成其抑菌活性分析。【方法】通过antiSMASH软件分析菌株N.candida HMC10^T全基因组序列,确定新的Ⅱ型套索肽noncaromin的生物合成基因簇(biosynthetic gene cluster of noncaromin,nonc-BGC)。然后,利用ExoCET重组技术(exonuclease combined with RecET recombination)获得完整的nonc-BGC,得到重组质粒pJQK652,并通过λ-Red重组技术改造得到整合型质粒pJQK653。采用接合转移方法,将该质粒分别导入白色链霉菌、2株变铅青链霉菌、2株天蓝色链霉菌和红色糖多孢菌宿主中进行异源表达,再通过发酵和分离纯化获得目标套索肽noncaromin。最后,利用QTOF-ESI-MS²完成套索肽noncaromin的结构鉴定,并通过抗菌活性检测确定该化合物的生物活性。【结果】本研究利用ExoCET技术成功获得了完整的nonc-BGC,在6种放线菌宿主中成功异源表达,完成了noncaromin的结构鉴定,确定了其具有微弱的抗枯草芽孢杆菌活性。【结论】本研究在克隆得到新结构套索肽nonc-BGC的基础上,实现了该基因簇在6个放线菌底盘宿主中的成功表达,获得了1个具有微弱抑制枯草芽孢杆菌活性的新结构Ⅱ型套索肽noncaromin。本研究结果为发掘菌株N.candida HMC10^T及其他放线菌中的新结构化合物提供了借鉴。     

荧光晕法在细胞染色质细胞状态检测中的应用

荧光晕法是近年来发展起来的定量检测细胞染色质细胞染色质结构状态的方法,由于其简易、直观、灵敏、快速,已被广泛用于放射生物学及肿瘤细胞这研究中。我们依据文献报道建立了此法,并对其进行了改良,进一步优化了操作步骤。并用３该法检测了两种相同来源（具有相似遗传背景）、具不同辐射敏感性的细胞株的染色质结构状态,发现辐射敏感株ＳＸ－９具有更松散的染色质结构,可能与两者的辐射敏感性差异有关,为研究染色质结构状态     

花生ASR基因家族特性及其对干旱和盐胁迫的响应

【目的】探究花生ASR基因家族特性及在干旱和盐胁迫响应中的作用,为花生抗旱抗盐新品种的培育提供潜在的基因位点。【方法】通过生物信息学方法对花生ASR家族进行全基因组水平鉴定以及基本特性分析,并借助转录组数据分析其在200 mmol/L NaCl及模拟干旱PEG处理下的表达变化。【结果】（1）通过分析花生栽培种狮头企参考基因组,鉴定到7个花生ASR基因,pI为5.34~6.98,蛋白脂肪系数为23.77~56.84,GRAVY值均为负值,表明这7个蛋白均是亲水性蛋白;（2）AhASR3与AhASR7基因表达模式相似,转录水平较高,基因结构及蛋白结构域和保守基序的位置和数量较相似,motif 5、6、9仅存在于AhASR3与AhASR7蛋白中;（3）AhASR1、AhASR5及AhASR2的启动子区域有干旱诱导MYB转录因子的结合位点,AhASR1、AhASR2及AhASR4的启动子区发现有ABA响应元件;（4）花生盐胁迫处理转录组分析结果显示AhASR2、AhASR3及AhASR7在200 mmol/L NaCl处理后根部出现较明显转录上调;（5）模拟干旱PEG处理转录组数据分析结果显示AhASR1、AhASR3、AhASR4及AhASR7在PEG处理4 h和8 h后,转录水平出现2倍以上上调。【结论】明确花生ASR家族基因和蛋白的基本特性,并鉴定可能参与盐胁迫和干旱胁迫响应的ASR基因,为进一步培育耐盐耐旱花生品种提供重要的目标基因。     

母乳溶菌酶含量与婴儿生理性腹泻

观察５４例生理性腹泻的健康婴儿，分别在生后第４，１５天及１￣６月每月随访，共收集粪便标本２８７份及其母乳３２５份，同时观察其粪便性状及次数，测定母乳溶菌酶含量，用直接涂片加勒兰氏染色法，检测粪便中细菌的种类，探索溶菌酶对力群的影响及其与生理性腹泻的关系，发现母乳溶菌酶在生后１５￣３０天时最低，随着其水平的下降，生后１５－９０天，婴儿粪便中的类杆菌逐渐被双歧杆菌取代，腹泻发生率由几乎１００％降至１２