4—甲基组胺和三氟啦嗪对WEHI3细胞增殖的影响

用体外细胞液体培养法研究组胺Ｈ２受体激动剂４－甲基组胺（４－ＭＨ）、Ｈ２受体拮抗剂西咪替丁和钙调素拮抗剂三氟啦嗪（ＴＦＰ）对小鼠粒单白血病ＷＥＨＩ３细胞增殖的影响。结果表明：４－ＭＨ呈剂量依赖性抑制ＷＥＨＩ３细胞增殖。１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ西咪替丁可阻断这种效应。１０＾－５－１０＾－４ｍｏｌ／ＬＴＦＰ阻断ＷＥＨＩ３细胞增殖,１０＾－６ｍｏｌ／ＬＴＦＰ对细胞影响不大,但与高浓度４－ＭＨ合用有协同抑制效     

日本血吸虫细胞培养方法初探

日本血吸虫细胞培养方法初探董惠芬,蒋明森,李瑛,杨明义,周述龙（湖北医科大学寄生虫学教研室,武汉４３００７１）关键词日本血吸虫,细胞培养,培养方法ＰＲＥＬＩＭＩＮＡＲＹＳＴＵＤＩＥＳＯＮＴＨＥＣＵＬＴＵＲＡＬＭＥＴＨＯＤＳＯＦＣＥＬＬＳＦＲＯＭＳＣＨ...     

鼻咽部抗酸菌及其L型感染误诊研究

鼻咽部抗酸菌及其Ｌ型感染误诊研究蚌埠医学院蚌埠２３３００３徐淑秀,姚敏中国癌症研究基金会安徽肿瘤康复医院蒋玉梅,芦晓鸿鼻咽部是上呼吸道门户,易感染抗酸菌及其Ｌ型。当患者机体抵抗力较强时,可无任何症状,一旦过度疲劳或因其他疾病导致抵抗力低下时,即可发病...     

玉米资源的综合利用

玉米资源的综合利用蒋建新（南京野生植物研究设计所,南京２１００４２）１．玉米资源的特点及其分布玉米是我国主要粮食作物之一,具有耐旱、高产、快熟等特点,而且籽粒含淀粉量高,副产品种类多,价值高,易于运输和贮存。工厂规模能很大,保持全年生产,不受季节和地...     

小壳化石保存,壳壁成分和显微构造初探

通过大量薄片,初步总结了寒武纪小壳化石的保存类型及其形成过程。论证了以磷质为特征保存的小壳化石原始成分绝大部分经过了次生磷酸盐化改造,相当一部分为钙质,并提出不同壳壁原始成分的鉴定标准,认为磷质小壳化石多层壳壁结构多为成岩次生构造叠加,原生壳壁显微结构罕见。报道了软舌螺化石具有交叉纤晶显微壳壁构造。     

十字花科几种植物的胚培养研究

利用幼胚成功地培养出白菜型油菜、芥菜型油菜、甘蓝型油菜、埃塞俄比亚芥、诸葛菜的再生植株。通过研究表明：不同的植物在培养基中的反应不同。同一个材料,在不同时期,培养的效果也不同。白菜型油菜难形成愈伤组织,且愈伤组织也难以分化,但生根较易。其它几种芸苔属植物则易形成愈伤组织和分化。诸葛菜能够形成胚状体,胚状体极易萌发。除了白菜型油菜外,所有材料都表现出极强的再生能力。     

发展中的mRNA差别显示技术

随着PCR技术的出现（1985）,在分子生物学界又相继出现了两个很有影响的新技术－PAPD技术（1990）和mRNA差示法（1992）,前者用于分子标记,后者用于基因分离。mRNA差示法的生物学基础是基因的差别表达,即：单个细胞中表达的基因仅占基因总数的15％,这种基因的差别表达决定了生命的所有过程,如：发育和经、对逆境的反应、细胞分裂、老化等。图一给出了该方法最初的技术路线。提取要比较的两种或两种以上样品的mRNAs,分别逆转录成cDNAs,经过PCR扩增后,直接进行测序胶电泳即可识别差别的mRNA。其中、关键是的PCR扩增时两个引物的设计。3′端引物Oligo(dT)MN很容易与具有N′M′－poly(A)-3′末端的大多数mRNA结合,进行cDNA的逆转录合成。M、N提供锚定位点,防止3′端引物在poly(A)序列不同位置上的随机结合。5′端为10个碱基的随机引物。这个经验上的碱基数较理论的6－7个碱基（表一）更能满足测序胶电泳要求的条件：分子大小在500bp左右,每条泳道上条带数在100条左右。该方法近年来又有如下改进：一、PCR退火温度由42℃改为40℃,可在保持特异性的同时,增加泳道上的条带数。cDNA合成的底物改用总RNA,可避免poly(dT）柱纯化mRNA时的污染,造成电泳抹带（smear）现象。二、第二代引物3′端的M位（3′端倒数第二位）碱基改用4个简单碱基,减少了引物的组合数,提高该法的效率和经济性。第三代引物在两种引物的5′端加HindIII酶切位点,3′端引物改为单随机碱基,既：5′－AAGCT11N－3′;5′端引物为5′－AAGCTT＋（AP）7。大大提高了克隆效率和克隆cDNA的可操作性。三、可能由于10个碱基随机引物的特异性还不够,泳道上出现的cDNA条带数多得超过了不可分辨的程度,造成了假阳性现象。有人尝试用不变性凝胶代替变性凝胶、或用Northern亲和层析加以解决。收效不大。也许,还是需要在引物设计上下功夫。四、经比较,^33P的半衰期和放射性强度介于^32P和^35S之间,价格最贵,但效果最好。通过对正常细胞与病变细胞、处理与未处理细胞、不同生理状态和不同发育时期的细胞,以及抗逆性强弱所作的mRNA差别显示分析,在动植物生理、病理以及抗性研究中取得了大量成果。但是,由于该技术要求底物有poly(A）尾,只能限于真核生物核基因组差异表达的研究。而且,所选择的研究材料除要求目的的基因有差异外,其它基因差异要尽可能小。GenHunter公司已推出了方便的专用试剂盒,但使用的是与人有害的、需要较长曝光时间的放射性同位素,这些都是需要进一步改进的,还包括向技术的自动化改进。     

发展中的mRNA差别显示技术

随着ＰＣＲ技术的出现（１９８５）,在分子生物学界又相继出现了两个很有影响的新技术──ＲＡＰＤ技术（１９９０）和ｍＲＮＡ差示法（１９９２）,前者用于分子标记,后者用于基因分离。ｍＲＮＡ差示法的生物学基础是基因的差别表达,既：单个细胞中表达的基因仅占基因总数的１５％。这种基因的差别表达决定了生命的所有过程,如：发育和分化、对逆境的反应、细胞分裂、老化等,图一给出了该方法最初的技术路线。提取要比较的两种或两种以上样品的ｍＲＮＡｓ,分别逆转录成ｃＤＮＡｓ,经过ＰＣＲ扩增后,直接进行测序胶电泳即可识别有差别的ｍＲＮＡ。其中、关键的是ＰＣＲ扩增时两个引物的设计．３＇端引物Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）ＭＮ很容易与具有Ｎ＇Ｍ＇－ｐｏｌｙ（Ａ）－３＇末端的大多数ｍＲＮＡ结合,进行ｃＤＮＡ的逆转录合成。Ｍ、Ｎ提供锚定位点,防止３＇端引物在ｐｏｌｙ（Ａ）序列不同位置上的随机结合。５＇端为１０个碱基的随机引物。这个经验上的碱基数值较理论的６－７个碱基（表一）更能满足测序胶电泳要求的条件：分子大小在５００ｂｐ左右,每条泳道上条带数在１００条左右。该方法近年来又有如下改进：一、ＰＣＲ退火温度由４２℃改为４０℃,可在保证特异性的同时,增加泳道上的     

广西地区蚱科三新种记述

本文记述采自广西壮族自治区蚱科３新种,即瘤米蚱Ｍｉｓｈｔｓｈｅｎｋｏｔｅｔｔｉｘ ｔｕｂｅｒｃｕｌａｔａ ｓｐ．ｎｏｖ．、拟喀蚱Ｔｅｔｒｉｘ ｃｅｐｅｒｏｉｄｅｓ ｓｐ．ｎｏｖ．及粗股蚱Ｔｅｔｒｉｘ ｇｒｏｓｓｉ ｆｍｅｕｒａ ｓｐ．ｎｏｖ。