应用双色荧光原位杂交技术检测克氏综合征

探讨用双色荧光原位杂交技术（dual-color fluorescence in situ hybridization,D-FISH）检测性染色体数目异常克氏综合征的应用价值,建立常规分裂期染色体和间期细胞FISH技术的实验方法。以Biotin标记的X染色体α-卫星DNA（pBamX7）探针和以Digoxigenin标记的Y染色体长臂末端重复序列（pY3.4）探针对19例克氏综合征标本同时进行外周血染色体及其间期细胞核的原位杂交,分别用Avidin-FITC和Rhodamine-FITC及其Anti-avidin进行信号的检测与放大,DAPI复染。于Olympus AX-70型荧光显微镜下,分别通过WIB、WIG及其WU滤光镜观察杂交信号及其染色体或间期核背景,并统计外周血中期染色体及其间期细胞核的杂交信号颗粒数量。在显微镜下可见以Biotin标记的pBamX7探针显示2个绿色杂交信号,以Digoxigenin标记的pY3.4探针显示1个红色杂交信号,染色体或间期核背景经DAPI复染显示蓝色;18例出现XXY杂交信号的细胞,染色体及其间期细胞核杂交平均出现率分别为95.89%和95%,明显大于正常对照标准值2.75%,证实核型为47,XXY,与染色体检测的结果一致;其余1例染色体核型检测为嵌合体,XXY杂交信号细胞出现率为92%,同时检出6.7%的XY杂交信号细胞（>正常对照标准值4.17%）。用FISH 技术检测性染色体数目异常克氏综合征具有快速、敏感度高、信号强、背景低、多色等优点,故FISH 技术在产前诊断检测领域中显示其重要的应用价值和发展前景。 Abstract:The objective of the work is to study the technique of dual-color fluorescence in situ hybridization(D-FISH) and its application value in the diagnosis of sex chromosomal count abnormality Klinefelter syndrome and establish an experimental approach to metaphase chromosome and interphase nucleus FISH technique.Biotin labeled alpha satellite X-chromosome DNA(pBamX7) probe and Digoxigenin labeled Y-chromosome long arm terminal repetitive sequence (pY3.4) probe were hybridized with pre-treated slides of peripheral blood chromosome and interphase nucleus in 19 cases of Klinefelter syndrome specimens.After being washed,the slides were treated with Avidin-FITC,Rhodamine-FITC and Anti-avidin,amplified with an additional layer and counter-stained with DAPI in an antifade solution.The hybridization signals,chromosomal or interphase nucleus settings were observed respectively with WIB,WIG and WU filters under fluorescence microscope Olympus AX-70,and the number of metaphase chromosome and interphase nucleus in the peripheral blood was counted.It was observed under the microscope that the Biotin labeled pBamX7 probe showed 2 green hybridization signals and that the Digoxigenin labeled pY3.4 probe showed 1 red hybridization signal.Chromosome or interphase nucleus counter-stained with DAPI showed blue.The average signal rate of chromosome and interphase nucleus hybridization was 95.89% and 95% respectively,significantly higher than the normal control (2.75%).Karyotype 47,XXY was confirmed,which agrees with the chromosomal findings.One case showed mosaic nuclei.XXY chromosome hybridization signal rate was 92% and XY hybridization signal rate was 6.7%,higher than the normal control rate of 4.17%.FISH is a valuable technique in diagnosing sex chromosomal count abnormality Klinefelter syndrome with the merits of fast speed,high sensitivity,strong signal,low background and multiple color.Therefore,FISH technique can find wide application and potential in prenatal diagnosis.     

芦丁锗的合成、表征及生物活性研究

芦丁在碱溶液中,与氧化锗反应生成芦丁锗;通过UV、IR、1H NMR,确定了锗离子与芦丁的螯合位置;通过差热分析,确定了配合物中结晶水的数量和锗的含量;通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和抗氧化性实验,测定了芦丁锗的生物活性.结果显示:芦丁锗对人子宫颈癌Hela细胞、肺癌SPC-A-1细胞及人食管癌EC9706细胞均没有抗肿瘤活性;清除DPPH自由基实验显示,芦丁锗较芦丁具有更强的清除自由基能力.     

枯草芽孢杆菌BSD-2对黄瓜叶际微生物数量及菌群结构的影响

【目的】阐明枯草芽孢杆菌BSD-2菌株抗菌素、芽孢及发酵液不同施入形式对黄瓜叶际微生物数量及菌群多样性的影响,为该菌株的应用提供理论基础和依据。【方法】以黄瓜为实验材料于室内进行盆栽实验,设置于接种灰霉病原菌前后喷施抗菌素、芽孢、发酵液,单独接种灰霉病原菌和无菌水空白对照,共8个处理。采用传统微生物分离的方法,利用PB、高氏1号和PDA培养基分离并统计叶际可培养细菌、放线菌和真菌的数量;采用Bio-Rad公司的DcodeTM System进行样品的DGGE分析,对条带数量和灰度进行定量分析,采用UPGMA法对各条带进行聚类分析;采用Shannon-Wiener指数、Pielou均匀度指数和丰富度分析可培养微生物和DGGE图谱中的群落多样性;并将条带回收测序。【结果】枯草芽孢杆菌BSD-2抗菌素、芽孢及发酵液以接种灰霉病原菌前喷施的效果最佳,均可提高可培养细菌的数量,降低可培养真菌的数量;可使叶际微生物的Shannon-Wiener多样性指数、Pielou均匀度指数和丰富度指数增加;其中抗菌素处理对叶际微生物种群结构的影响最小。【结论】枯草芽孢杆菌BSD-2的发酵液可有效抑制真菌的数量;芽孢可有效提高细菌及放线菌的数量;抗菌素则利于保持叶际微生物的丰富度及多样性指数。     

贵州部分洞穴裸灶螽的鉴定及其遗传多样性分析

贵州是中国具有丰富喀斯特洞穴生态系统的省份之一,裸灶螽作为洞穴中的优势物种又为生态环境指示种,其遗传多样性能够反应洞穴生物多样性.为评估洞穴开发对洞穴生物多样性的影响,本研究通过形态鉴定和分子辅助鉴定的方式对来自贵州省毕节、黔西南、铜仁和黔南4个地区8个洞穴97号裸灶螽标本进行鉴定,并对其遗传多样性进行分析.结果共鉴定...     

用间期荧光原位杂交检测卵巢癌细胞中X染色体数目的异常

为了探讨用荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization, FISH）检测卵巢癌细胞中性染色体拷贝数目异常的实验方法及其应用价值,收集18例新鲜卵巢癌组织标本,以Biotin标记的X染色体α-卫星DNA（pBamX7）探针与经处理的标本进行卵巢癌细胞核的原位杂交,分别用Avidin-FITC和Anti-avidin进行信号的检测与放大,PI复染。于Olympus AX-70型荧光显微镜下,通过WIB滤光镜观察杂交信号及其细胞核背景,并统计卵巢癌细胞核中的杂交信号颗粒数量。在显微镜下可见以Biotin标记的pBamX7探针显示绿色杂交信号,细胞核背景经PI复染显示桔红色;发现11/18（61%）卵巢癌标本中X染色体拷贝数增加,其余7例（39%）无拷贝数增加。X染色体拷贝数目增多在卵巢癌中有一定比例的发生频率,其在促进卵巢癌发病及其发展过程中起到某种作用,其意义值得进一步研究。     

miR-346通过靶向调控SRSF10抑制胶质瘤细胞迁移、侵袭和增殖

胶质瘤是最常见的肿瘤之一，预后较差。有研究表明，microRNAs(miRNAs)与包括胶质瘤在内的多种肿瘤有密切联系。然而，miR-346通过靶向调控丝氨酸/精氨酸剪接因子10(serine/arginine splicing factor 10,SRSF10)抑制胶质瘤细胞迁移、侵袭和增殖能力的分子机制目前仍不明确。对GSE165137与GSE139031芯片进行差异表达分析结果显示，miR-346在两个数据集中共同下调，运用CGGA数据库分析显示，miR-346高表达的患者总生存期明显提高(P<0.0001),miR-346的表达随胶质瘤WHO分级升高而降低(P<0.05)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示，miR-346在胶质瘤细胞U251中的表达显著降低(P<0.05),且miR-346过表达质粒转染成功(P<0.05)。Transwell实验，5-乙炔基-2脱氧尿嘧啶核苷(EdU)增殖实验和细胞克隆形成结果显示，与对照组相比，过表达miR-346后U251细胞的迁移、侵袭和增殖能力下降(P<0.05)。生物信息学方法预测miR-34...     

黄河三角洲典型滨海盐沼湿地土壤CO2和CH4排放对水盐变化的响应

滨海盐沼湿地是重要的“蓝碳”碳汇,研究水盐变化对土壤碳矿化(CO₂和CH₄排放)的影响,对理解滨海盐沼湿地的碳汇稳定机制具有重要意义。该研究选取黄河三角洲典型盐沼湿地土壤为研究对象,通过水盐梯度模拟实验,研究土壤碳矿化、理化性质、微生物生物量及群落结构对不同土壤水分和盐分含量的响应。主要结果:(1)水盐变化对土壤CO₂、CH₄排放量以及CH₄:CO₂的影响均不存在交互作用,CO₂排放量随土壤含水量增加呈先升后降的单峰型变化趋势,盐分含量升高则显著抑制CO₂排放;水分含量升高对CH₄排放具有显著促进作用,盐分升高则显著抑制CH₄排放。(2)水盐变化对土壤可溶性有机碳(DOC)含量具有弱交互作用,在低水分处理下,DOC随着土壤盐分的增加呈减少趋势,但在高水分处理下呈增加趋势;CO₂排放与DOC含量呈显著正相关关系,而CH₄排放与D...     

Leroy Hood率领的系统生物学团队

以DNA测序仪的肝发而知铙的Leroy Hood先生于2000年设立了Institute for Systems Biology。网罗生物学、工学、计算机等不同领域的研究人员140人，挑战系统生物学新领域。“为实现新创意而建立的崭新的组织”（Hood先生）的现状追踪。[编者按]     

妊娠早期产前诊断的研究 Ⅰ.绒毛细胞直接制备染色体

通过绒毛活体取样,进行孕早期产前诊断已成为遗传疾病预防的一个新的方向。 绒毛滋养层细胞是受精卵有丝分裂的衍生物,它准确地反映了胎儿的遗传特性。妊娠早期的绒毛有较高的有丝分裂活性,这些特点为用直接法制备胎儿染色体、在孕早期检出染色体异常胎儿提供了有利条件,