慢性肾功能衰竭病人红细胞变形能力的改变

慢性肾功能衰竭(CRF)是发生在各种慢性肾脏疾病后期的一种临床症状,以肾功能减退,代谢产物潴留,水、电解质及酸碱平衡失调为主要表现。为了解CRF时红细胞变形能力的改变情况,我们对CRF病人及正常人的红细胞变形能力进行了测定。     

心脏特异性表达KCNQ1^（V180L）转基因小鼠的建立及表型分析

目的建立心脏特异性表达KCNQ1^V180 L转基因小鼠,为研究KCNQ1基因功能及其突变与心律失常性心脏疾病的关系提供工具动物。方法把KCNQ1^V180 L基因插入α-MHC启动子下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立C57BL/6J KCNQ1^V180 L转基因小鼠,PCR鉴定转基因小鼠的基因型,采用Western Blot鉴定KCNQ1^V180 L在心脏组织中的表达,记录转基因小鼠死亡情况,超声分析转基因小鼠心脏结构形态和功能改变,心电分析转基因小鼠心肌电生理变化。结果建立了2个心脏组织特异性表达KCNQ1^V180 L转基因小鼠品系。转基因小鼠离乳前即出现猝死;超声检查显示转基因小鼠左心室内径变短,心室壁变厚,短轴缩短率增加;心电分析显示其心室复极异常。结论 KCNQ1^V180 L转基因小鼠具有临床长QT综合征类似的病理改变,可作为研究KCNQ1基因功能及其突变与心律失常发病机制的疾病动物模型。     

人参皂甙Rb1抑制扩张型心肌病发生中的HB-EGF表达和纤维化

目的HB-EGF过表达可促进心肌纤维化及心肌细胞凋亡,本文研究人参皂甙Rb1对cTnT^R141W转基因扩张型心肌病小鼠发病过程中的HB-EGF表达和心肌纤维化的影响。方法将cTnT^R141W转基因小鼠随机分为模型组和人参皂甙Rb1组（70 mg/kg/d）,连续给药7个月,取野生型小鼠作为对照组。用Kaplan-Meier法进行生存分析。心脏超声检测心功能及心脏几何构型。计算心重指数。光镜观察心肌细胞及间质变化。Western blot检测心脏HB-EGF,pSTAT3表达水平。结果Rb1长期给药能显著改善该模型的心功能和心脏几何构型,将死亡率降低50%。Rb1治疗组心重指数降低11.3%（P〈0.05）,光镜观察显示Rb1能减轻心肌细胞排列紊乱以及间质纤维化。Western blot结果显示Rb1能够显著降低模型中的HB-EGF及pSTAT3的表达。结论Rb1抑制心肌病发生中的HB-EGF表达及抑制下游信号pSTAT的激活,并改善扩张型心肌病模型的心功能及心脏重构。     

内脂素对转基因小鼠血糖和运动性的影响

目的建立内脂素转基因小鼠动物模型,研究内脂素在转基因表达的情况下对小鼠的影响。方法把内脂素基因插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立内脂素转基因小鼠。PCR鉴定内脂素转基因小鼠的基因型,Western Blot检测基因表达,通过血糖测定、血生化检测、转轮实验以及旷场观察,检测转基因小鼠在血糖和行为等方面的改变。结果建立了2个不同表达水平的内脂素转基因小鼠品系,转入的内脂素基因在骨骼肌和内脏脂肪组织中的表达高于内源性内脂素。血糖、血生化、代谢、疲劳度、协调性和旷场检查证实：内脂素转基因小鼠机体血糖降低,谷丙转氨酶降低,尿素氮升高,高密度脂蛋白胆固醇降低,低密度脂蛋白胆固醇升高,抗疲劳性和和协调性增高。结论成功建立了内脂素转基因小鼠,并证实内脂素对小鼠血糖和运动行为具有明显的影响,为研究脂肪细胞因子的作用机制提供了有价值的动物模型。     

正常小鼠冠状动脉的超声成像技术分析

目的探讨利用高频小动物心脏超声对C57BL／6小鼠冠状动脉进行评价的可行性,为小鼠冠状动脉相关疾病动物模型的制备及其功能评价提供依据。方法采用Vevo770型高分辨小动物超声仪,频率30mHz的宽频探头,对20只健康C57BL／6小鼠于4、8和12周龄时冠状动脉的情况进行观察。测定和分析不同周龄小鼠冠状动脉内径值的变化。结果全部20只小鼠超声均成功检测到冠状动脉。超声心动图显示小鼠4周龄时左冠状动脉主干内径检测值为0．36±0．02mm,右冠状动脉主干内径值为0．29±0．03mm;8周龄时左冠状动脉主干内径值为0．38±0．06mm,右冠状动脉主干内径值为0．37±0．02（mm）;12周龄时左冠状动脉主干内径值为0．38±0．02mm,右冠状动脉主干内径值为0．39±0．03mm。结论利用高频小动物心脏超声可获取正常小鼠清晰的冠状动脉图像,并能准确反映小鼠冠状动脉内径值动态变化。为小鼠冠状动脉疾病模型的制备及其功能评价提供依据。     

大肠杆菌MetD运输系统缺失对蛋氨酸积累的影响

【目的】构建MetD运输系统缺失突变株,研究该运输系统功能缺失对Escherichia coli W3110蛋氨酸吸收和积累的影响。【方法】通过RT-qPCR比较MetJ阻遏调控解除菌株和野生株E.coli metNIQ表达量的变化,并分析蛋氨酸吸收速度的变化;利用Red同源重组系统分别敲除metNIQ基因簇、metN、metI和metQ,构建MetD运输功能缺失的突变株,研究蛋氨酸吸收速度的变化及对蛋氨酸积累的影响。【结果】MetJ阻遏调控解除后,metNIQ的表达量和蛋氨酸吸收速度显著增加。通过敲除E.coli W3110和Me05的metNIQ,MetD运输系统缺失导致蛋氨酸吸收速度下降。另外,分别敲除用于产蛋氨酸基座菌株Me06的metNIQ基因簇、metN、metI和metQ。生长曲线和摇瓶发酵结果表明,metI的敲除促进菌体的生长和蛋氨酸的合成,蛋氨酸的产量从0.39 g/L提高到0.45 g/L,提高了15.4%,蛋氨酸产率从0.14 g/g DCW提高到0.15 g/g DCW。【结论】E.coli MetD功能的缺失能够降低蛋氨酸的吸收速度,敲除metNIQ基因簇上的metI能够提高蛋氨酸产量。     

基于红外相机技术调查长青国家级自然保护区兽类和鸟类多样性

野生动物多样性的有效保护与管理,需要大范围、长时间的系统监测网络的支持。红外相机调查技术近年来已成为自然保护区鸟兽调查的最有效工具之一,为了解和掌握区域性乃至全国性的生物多样性现状,提供了最直接和最基础的数据。长青国家级自然保护区位于秦岭南坡,地处秦岭自然保护区群的核心地带。自2008年至2011年,使用被动式红外触发相机调查技术在长青保护区内调查了大中型兽类与鸟类的本底资源。共完成有效调查位点435个,相机工作日15767d。获得兽类有效拍摄3 282次,记录到分属5目12科的21种野生兽类和1种家畜,其中国家一级和二级重点保护野生动物各有5种,被IUCN物种红色名录评估为濒危（EN）、易危（VU）、近危（NT）的物种分别有2、3、4种。食肉目和偶蹄目是本次调查兽类记录中物种数量（分别有9种和7种）和有效拍摄数（分别占兽类有效拍摄数的13.5%和84.0%）最高的两个类群,食肉目中相对多度指数最高的物种是大熊猫（Ailuropoda melanoleuca, 12.30）,偶蹄目中最高的物种是羚牛（Budorcas taxicolor, 114.04）。保护区内大型兽类（食肉目和偶蹄目）物种多样性沿海拔梯度,大体呈现中部高、两侧低的单峰模式,海拔1600-2200 m的中等海拔段是大型兽类多样性最高的区域。鸟类有效拍摄191次,记录到分属4目8科的17种鸟类,其中国家二级重点保护野生动物物种8种。鸡形目雉科鸟类是有效拍摄数最高的类群,占全部鸟类拍摄数的79.8%。调查中记录到的林猬（Mesechinus hughi）和鹰雕（Spizaetus nipalensis）为长青自然保护区的新记录种。调查结果提供了较为全面的区内大中型兽类和鸟类群落的本底信息,为后续的保护管理规划和长期监测提供了数据支持和指导。     

大承气汤辅助治疗ARDS患者对其pH、PaO2/FiO2和氧化应激状态的影响

目的:观察大承气汤辅助治疗ARDS患者对其pH、氧合指数(PaO_2/FiO_2)及氧化应激状态的影响。方法:选择2014年8月~2016年8月于成都中医药大学临床医学院就诊的82例ARDS患者,按治疗方式的不同随机分为对照组与实验组,对照组接受常规治疗,实验组在对照组的基础上联合大承气汤治疗,两组均持续用药7天。观察两组ICU住院时间、机械通气时间、不良反应的发生情况、治疗前后pH、PaO_2/FiO_2、血气超氧化物歧化醇(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醇(MDA)水平的变化。结果:实验组ICU住院时间、机械通气时间及不良反应的发生率均显著短于或低于对照组(P0.05)。治疗前,两组pH、PaO_2/FiO_2、血清SOD、GSH-Px、MDA水平比较差异无统计学意义(P0.05);治疗后,两组pH、PaO_2/FiO_2、血清SOD、GSH-Px水平均较治疗前显著上升,且实验组PaO_2/FiO_2、血清SOD、GSH-Px水平明显高于对照组,两组血清MDA水平均较治疗前明显降低,且实验组血清MDA水平显著低于对照组(P0.05)。结论:大承气汤辅助治疗ARDS能够有效改善患者pH、PaO_2/FiO_2,缓解氧化应激状态,利于患者恢复。     

miR-106b转基因小鼠的建立

目的:建立miR-106b转基因小鼠模型,探讨其在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)发病中的作用。方法:构建miR-106b表达载体,显微注射法建立miR-106b转基因小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因型,real time RT-PCR检测miR-106b转基因小鼠脑组织中miR-106b的表达情况,Western blot检测miR-106b转基因小鼠脑组织中TGFBR2蛋白的表达。结果:构建了高表达miR-106b转基因小鼠;与对照相比,miR-106b转基因小鼠脑组织中TGFBR2蛋白的表达升高。结论:miR-106b转基因小鼠的建立为研究该microRNA在AD发病中的作用提供了工具。     

人牙根龋发生中有机质破坏的酶学研究

目的 :了解牙根部有机质破坏的机制。方法 :将健康恒牙根颈 1/ 3牙体硬组织 ,磨制成 38.5～149m组织粉粒作样本 ,乳酸 (p H 4.0和 p H5 .5 )及醋酸 (p H 4.5和 p H5 .5 )溶液预处理后 ,测定钙、总蛋白和胶原含量 ;再经胰酶、胶原酶处理后分析释出的胶原量。结果 :乳酸和醋酸预处理不能降解人牙根部的胶原 ,但采用 p H4.0的乳酸处理牙齿后可以使酶对牙本质胶原的降解量明显增高 ,达 (4 4.0 5± 4.5 0 ) μl/ mg;随 p H升高 ,胰酶和胶原酶对根部牙体组织胶原的降解量明显下降 ,脱矿程度减弱 ,钙释出减少。结论 :酸和酶有协同降解胶原的作用。